Купить систему ГАРАНТ Получить демо-доступ Узнать стоимость Информационный банк Подобрать комплект Семинары

Приложение А (справочное). Среда RPMI-1640

Приложение А
(справочное)

 

Среда RPMI-1640

 

А.1 Общие положения

Среда RPMI-1640 с буферностью 0,165 моль/л MOPS. 1 л: 10,4 г порошка среды RPMI-1640 (с глютамином и феноловым красным, без бикарбоната).

34,53 г MOPS (3-[N-Морфолино]пропансульфоновая кислота (MOPS) буферный раствор.

Среду в виде порошка растворяют в 900 мл дистиллированной воды. Добавляют MOPS (конечная концентрация 0,165 моль/л) и перемешивают до растворения. В процессе перемешивания устанавливают рН 7,0 при температуре 25°С с использованием 1 моль/л гидроксида натрия. Добавляя воду, доводят объем среды до 1 л. Фильтруют, стерилизуют и хранят при температуре 4°С до момента использования.

 

Таблица А.1 - Состав среды RPMI-1640 (с глютамином и феноловым красным, но без бикарбоната)

 

Компонент

г/мл воды

L-аргинин (свободное основание)

0,200

L-аспарагин (безводный)

0,050

L-аспарагиновая кислота

0,020

L-цистин2HCI

0,065 2

L-глутаминовая кислота

0,020

L-глутамин

0,300

Глицин

0,010

L-гистидин (свободное основание)

0,015

L-гидроксипролин

0,020

L-изолейцин

0,050

L-лейцин

0,050

L-лизинHCI

0,040

L-метионин

0,015

L-фенилаланин

0,015

L-пролин

0,020

L-серин

0,030

L-треонин

0,020

L-триптофан

0,005

L-тирозин2Na

0,028 83

L-валин

0,020

L-тирозин2Na

0,028 83

L-валин

0,020

Биотин

0,0002

D-пантотеновая кислота

0,000 25

Холинхлорид

0,003

Фолиевая кислота

0,001

Мио-инозитол

0,035

Ниацинамид

0,001

ПАБК (парааминобензойная кислота)

0,001

Пиридоксин HCI

0,001

Рибофлавин

0,0002

Тиамин HCI

0,001

Витамин В12

0,000005

Нитрат кальция

0,100

Хлористый кальций

0,400

Сульфат магния (безводный)

0,048 84

Хлористый натрий

6,000

Фосфат натрия, двузамещенный (безводный)

0,800

D-глюкоза (CLSI метод - визуальное чтение)

2,000

D-глюкоза (EUCAST метод - спектрофотометрическое чтение)

2,000

Глютатион, восстановленный

0,001

 

Таблица А.2 - Компоненты RPMI-1640 2% глюкозы

 

Компонент

Одинарная концентрация

Двойная концентрация

Дистиллированная вода

900 мл

900 мл

RPMI-1640(a)

10,4 г

20,8 г

MOPS(b)

34,53 г

89,06 г

Глюкоза

18 г

36 г

(а) См. таблицу А.1.

(b) 3-[N-Морфолино]пропансульфоновая кислота.

А.2 Ссылки к приложению А

a) Clinical and Laboratory Standards Institute (Институт Клинических Лабораторных Стандартов) (2008). Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts: 3rd Informational Supplement. M27-S3. Wayne. PA (Референтный метод для испытаний противогрибковой чувствительности дрожжей с применением метода разведения в бульоне: 3-е информационное приложение. M27-S3. Вэйн. Пенсильвания.)

b) European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (Европейский Комитет no вопросам исследования чувствительности к антимикробным препаратам) (2007). EUCAST Definitive Document EDef 7.1: Method for the determination of broth dilution MICs of antifungal agents for fermentative yeasts. Clinl Microbiol Infect; 14: pp. 398 - 405, 2008.

(EUCAST дефинитивный документ EDef 7.1: Метод определения МПК противогрибковых препаратов для ферментативных дрожжей с применением разведения в бульоне. Клиническая Микробиология и Инфекции; 14: с. 398 - 405, 2008.)

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Получить доступ к системе ГАРАНТ

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.