Методические указания МУК 4.1.1969-05 "Определение остаточных количеств ацетохлора в ботве, корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 апреля 2005 г.)

Методические указания МУК 4.1.1969-05
"Определение остаточных количеств ацетохлора в ботве, корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 апреля 2005 г.)

Дата введения: 1 июля 2005 г.
Введены впервые

2. Методика определения ацетохлора в ботве и корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод определения ацетохлора основан на экстракции пестицида органическими растворителями и очистке экстракта на патроне Диапак С-16. Количественное определение проводят методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора электронного захвата (ДЭЗ или ДПР).

2.1.2. Избирательность метода

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования. Присутствие других пестицидов, близких по химическому строению и области применения, определению не мешает.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Метрологическая характеристика метода представлена в таблице.

Таблица

Метрологическая характеристика метода

Объект анализа	Предел обнаружения, мг/кг	Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг	Среднее значение определения, % (n = 24)	Стандартное отклонение S, %	Доверительный интервал среднего %, n = 24, Р = 0,95
Ботва свеклы	0,005	0,01-0,2	95	10	7
Корнеплоды свеклы	0,005	0,01-0,2	98	9	6
Корнеплоды моркови	0,005	0,01-0,2	89	13	8

2.2. Реактивы, материалы

Ацетохлор, аналитический стандарт >= 96%
Ацетон, чда	ГОСТ 2603-79
Вода дистиллированная	ГОСТ 7602-76
н-Гексан, хч	ТУ 6-09-3375-78
Концентрирующие патроны
Диапак С-16 (0,6 г)
Хлористый метилен, чда	ТУ-2631-020-11291058-96

2.3. Приборы и посуда

Газовый хроматограф "Цвет 550" или аналогичный с ДЭЗ
Колонка стеклянная 1 м х 3 мм с 5% SE-30 на хроматоне N-супер (0,125-0,160 мм)
Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные	ГОСТ 34104-80Е
Весы технические ВЛКТ-500	ГОСТ 24104-80
Установка ультразвуковая "Серьга"	ТУ 3.836.008
Микрошприц МШ-10, МШ-10М	ТУ 2.833.106
Аллонж НШ 14,5
Шприц с разъемом типа Льюер объемом не менее 10 мл
Насос водоструйный	МРТУ 42 861-64
Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС	ГОСТ 10384-72
Воронки лабораторные В-75-110	ГОСТ 25336-82
Цилиндры мерные на 100 см3, 500 см3	ГОСТ 1774-74
Колбы мерные на 100 см3	ГОСТ 1770-74
Пипетки на 1, 2, 5, 10 см3	ГОСТ 22292-74
Стаканы химические	ГОСТ 25336-82Е

Допускается использование оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают на вакуумном ротационном испарителе до объема 1 мл и хроматографируют. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.

2.5.2. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку, не присоединяя к детектору, кондиционируют в токе инертного газа (азот) при температуре 250°С в течение 8-10 ч.

2.5.3. Приготовление стандартного и градуировочных растворов

Для приготовления стандартного раствора с концентрацией 1 мг/мл количественно переносят 50 мг аналитического стандарта ацетохлора в мерную колбу на 50 мл и растворяют навеску в ацетоне. Из полученного раствора готовят градуировочные растворы с концентрациями 2; 1; 0,5; 0,2 мкг/мл методом последовательного разбавления гексаном.

Для внесения в образец при определении полноты извлечения используют соответствующие растворы ацетохлора в ацетоне.

2.5.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика зависимости площади пика от концентрации ацетохлора в растворе в хроматограф вводят по 2 мкл градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади (мВ х с) пика от концентрации ацетохлора в градуировочном растворе (мкг/мл).

2.5.5. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С-16 для очистки экстракта

Патрон устанавливают на аллонж с отводом для соединения с водоструйным насосом. Сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Льюер объемом не менее 10 мл (используется как емкость для прокачивания водно-ацетонового экстракта и элюирующего растворителя). Для активации и кондиционирования патрона через него последовательно пропускают 10 мл ацетона и 10 мл дистиллированной воды. Элюаты отбрасывают. Скорость потока через патрон не должна превышать 1-2 мл/мин. После кондиционирования патрона нельзя допускать высыхания поверхности картриджа и попадания в него пузырьков воздуха. Сразу после приготовления патрон используют для работы.

2.5.6. Проверка хроматографического поведения ацетохлора на патронах Диапак С-16

Готовят водный модельный раствор. Для этого к 150 мл 3%-ного водно-ацетонового раствора добавляют 1 мл стандартного раствора ацетохлора в ацетоне с концентрацией 1 мкг/мл. Пропускают полученный раствор через предварительно активированный патрон Диапак С-16 со скоростью не более 2 мл/мин. После подсушивания патрона в течение 15 мин в токе азота элюируют ацетохлор 20 мл хлористого метилена, отбирая фракции по 5 мл. Каждую фракцию упаривают на роторном испарителе при температуре не выше 35°С. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и хроматографируют. Определяют профиль вымывания ацетохлора с сорбента.

Примечание: профиль вымывания ацетохлора может измениться при использовании другой партии патронов Диапак С-16.

2.5.7. Подготовка приборов и средств измерения

Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

2.6. Проведение определения

Навеску ботвы или корнеплодов свеклы и моркови (20 г) измельчают, помещают в коническую колбу с притертой пробкой, добавляют 70 мл 3%-го водно-ацетонового раствора и экстрагируют на ультразвуковой ванне в течение 5 мин. Экстракцию повторяют дважды. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр. Объединенный экстракт пропускают через подготовленный патрон Диапак С-16 со скоростью не более 2 мл/мин. После подсушивания патрона в течение 15 мин в токе инертного газа ацетохлор элюируют хлористым метиленом. Элюат упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 35°С. Сухой остаток растворяют в 1-4 мл гексана и хроматографируют.

ГАРАНТ:

Нумерация пунктов приводится в соответствии с источником

2.6.3. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф "Цвет 550М" с ДПР или аналогичный. Колонка стеклянная 3 м х 3 мм с 5% SE-30 на хроматоне N-супер (0,125-0,160 мм). Температура колонки 210°С, испарителя 250°С, детектора 310°С. Скорость газа-носителя (азот) через колонку 82,8 /мин.

Объем вводимой пробы 1 мкл. Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,2-2,0 нг.

2.6.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание ацетохлора в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

, где

- высота (площадь) пика ацетохлора в стандартном растворе, мм ();

- высота (площадь) пика ацетохлора в анализируемой пробе, мм ();

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

Р - навеска анализируемого образца, г;

С - концентрация ацетохлора в стандартном растворе, мкг/мл.

Концентрацию ацетохлора в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2 параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор ацетохлора с концентрацией 2 мкг/мл, разбавляют.

3. Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования инструкции "Основные правила безопасной работы в химической лаборатории", общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, а также инструкции по эксплуатации газового хроматографа и электрооборудования до 400 В.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-2003. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

Долженко В.И., Цибульская И.А., Остроухова О.К.

Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко