Приложение 3. Исследование кала на скрытую кровь

Приложение 3
к приказу Минздрава РТ
от 24 июня 2013 г. N 1123

Исследование кала на скрытую кровь

Методические рекомендации

Использование тест-системы для количественного определения скрытой крови в стуле.

Пробоподготовка:

материалом анализа является проба кала пациента. Кал может быть отобран в любое время без какой либо подготовки пациента (диета и т.д.).

Проба должна быть доставлена в лабораторию в течение 6 часов при комнатной температуре, либо в течение 12 часов в замороженном состоянии (-20С).

В лаборатории кал переносится в специализированную пробирку. Пробирки для сбора образца содержат буфер для экстракции и сохранения гемоглобина (содержит азид натрия).

Полученный материал может храниться в пробирке при температуре 2-8°С в течение недели без воздействия прямого света.

"Порядок взятия пробы"

1. Перевернуть пробирку зеленой крышкой вверх.

2. Открутить зеленую крышку, аккуратно достать пробоотборник, пробирку поставить вертикально, избегая опрокидывания.

3. Кончик пробоотборника с бороздками три раза погрузить в разные места кала так, чтобы все бороздки были заполнены. Излишки кала удалить бумажной салфеткой.

4. Аккуратно вставить пробоотборник в пробирку, плотно закрутить зеленую крышку, перевернуть пробирку белой крышкой вверх.

5. Пробирки должны быть промаркированы и плотно закрыты. Маркировка на пробирках должна обязательно совпадать с маркировкой в списке.

6. Пробирки не центрифугировать и не встряхивать.

7. Проведение анализа.

Анализ полученных проб на наличие скрытой крови в стуле можно проводить на любом биохимическом анализаторе открытого типа или на специализированном автоматическом анализаторе.

Перед проведением анализа анализатор необходимо включить и пошагово выполнить все требования программы во время инициации и промывки системы.

1.1. Калибровка прибора.

Процедуру калибровки прибора требуется провести перед первым запуском анализатора и в дальнейшем через каждые две недели. Калибровка проводится согласно процедуре, описанной в программном обеспечении прибора. В качестве калибратора используется специализированный набор калибраторов.

1.2. Контроль качества.

Процедура контроля качества производится при первичном запуске анализатора и в дальнейшем перед каждой постановкой проб. Для процедуры контроля качества используется специализированный набор контролей. Перед сменой набора калибраторов необходимо поменять в программе значения контрольной сыворотки (прилагаются во вкладыше к набору), а также номер лота набора. Контроль качества необходимо проводить в пределах 2S в трех повторностях. В случае устойчивого отклонения данных контроля от заданных показателей, анализ проб не проводить до устранения возникших несоответствий.

1.3. Анализ проб.

Подготовка образцов:

наденьте перчатки.

Убедитесь, что пробирки для сбора образца не мешают другим пробам в карусели для образцов прибора. При необходимости перенесите образец из пробирки в контейнер карусели образцов прибора.

Данные с маркировки пробирки необходимо ввести в программу прибора, после чего установить пробирки белыми крышками вверх в штатив для образцов анализатора в порядке, который укажет программа. Крышки с пробирок перед анализом необходимо удалить. Также следует удалить возможные пузыри (при помощи ватной палочки).

Процедура теста:

Длина волны: основная = 570 нм, референс = 800 нм*

Протяженность: 1 см

Температура: 37°С

Образец/Реагент N 1/Реагент N 2: 1/10.4/10.4

Реакция: фиксированное время.

Перед постановкой доведите реагенты до рабочей температуры.

Пропорциональное изменение объема реагента не влияет на результаты теста.

Пример процедуры теста для автоматического анализатора:

Время 0

Калибратор/контроли/образец = 12 мкл

Реагент N 1 = 125 мкл

После 300 секунд

Добавление Реагента N 2 = 125 мкл

После 50-70 секунд

Считывание 1

После 90-110 секунд

Считывание 2.

Подсчет результатов:

1. Постройте калибровочную кривую на графике, используя оптическую плотность (ось y) в соответствии с концентрацией нг/мл (ось x) для каждого калибратора.

2. Укажите на калибровочной кривой ОП значения образца и контроля.

3. Экстраполируйте нг/мл значение образца и контроля с калибровочной кривой.

Фактор конверсии - Hb[ng/mL]/1000=Hb[_g/mL].

Значения Cut-Off.

Для каждой л