Приложение N 2. Правила сбора, транспортирования и хранения сыворотки крови

Приложение N 2
к приказу Министерства здравоохранения
Оренбургской области
и Управления Роспотребнадзора
от 4 мая 2008 г. N 714/98-о.д.

Правила
сбора, транспортирования и хранения сыворотки крови

1. Техника взятия и первичная обработка крови

При проведении серологических исследований от каждого включенного в наблюдаемую группу необходима только одна проба крови. Минимальное количество сыворотки крови, необходимое для исследования, составляет не менее 0,2 мл., лучше располагать 1 мл. Поэтому минимальный объем пробы крови должен быть не менее 0,5 мл; оптимально 2 мл. Кровь лучше брать из вены, так как этот способ наименее травматичен, позволяет получать нужные объемы при минимальном уровне гемолиза.

Кровь из вены в количестве 5 мл. берут одноразовым стерильным шприцем в стерильную пробирку в асептических условиях.

Если взятие крови из вены по каким-либо причинам не может быть осуществлено, кровь берут уколом пальца. Этим способом можно получить достаточное количество крови для серологических исследований. Кровь в объеме 1,0 - 1,5 мл собирают непосредственно через край стерильной одноразовой центрифужной пробирки с пробкой (или в специальные микропробирки для взятия капиллярной крови). Перед взятием крови кисть руки пациента согревают горячей водой, затем насухо вытирают чистым полотенцем. Палец обрабатывают стерильным ватным шариком, смоченным 70% спиртом, и прокалывают стерильным скарификатором одноразового пользования. Прокол делают, немного отступив от средней линии, ближе к боковой поверхности пальца (место прохождения крупных сосудов). Выступающие на месте прокола капли крови собирают краем сухой, стерильной мерной центрифужной пробирки так, чтобы капли по стенке стекали на дно. Для получения большого количества крови рекомендуется слегка массировать боковые стороны фаланги. У самых маленьких детей пробу крови можно получить уколом пятки.

После взятия крови место укола смазывают стерильным ватным шариком, смоченным 5%-ным раствором йода.

Пробирку с кровью закрывают стерильной резиновой пробкой, на пробирку наклеивают полоску лейкопластыря, на которой пишут номер обследуемого, соответствующий порядковому номеру в сопроводительном документе, фамилию и инициалы, дату забора. До отправления в лабораторию кровь можно хранить при температуре +4° - +8°С не более 24 часов.

В лаборатории для получения сыворотки пробирку с кровью оставляют в наклонном (под углом 10 - 20°) положении при комнатной температуре на 30 мин. для образования сгустка; после чего пробирку с кровью встряхивают для отделения сгустка от стенки пробирки и оставляют на ночь в холодильнике при температуре +4 - 8°С.

После отведения сыворотки от сгустка (пробирки обводят по внутренней поверхности пастеровской пипеткой), ее центрифугируют при 1000 - 1200 об./мин. в течение 15 - 20 мин. Затем сыворотку осторожно переливают или отсасывают пипеткой с грушей в стерильные центрифужные (пластиковые) пробирки или эппендорфы с обязательным переносом на них этикетки с соответствующей пробирки.

Если в лаборатории нет центрифуги, то цельную кровь надо оставить в холодильнике до тех пор, пока не произойдет полная ретракция сгустка (отделение сгустка эритроцитов от сыворотки). Осторожно, тщательно, избегая повреждения эритроцитов, перенести сыворотку в другую стерильную пробирку, снабженную этикеткой. Сыворотка должна быть прозрачной, светло-желтого цвета, без выраженного гемолиза.

Поступающие в лабораторию сыворотки (без сгустка) можно хранить до исследования в бытовых холодильниках при температуре 4°С в течение 7 дней. При более длительном хранении сыворотка может быть заморожена при -20°С.

2. Транспортирование образцов сыворотки (крови)

Перед транспортированием собранного материала очень важно принять меры предосторожности: проверить наличие собранной информации, прочно закрыть пробирки пробкой, расположить пробы согласно их номерам, уложить сыворотки в пластиковый пакет.

Для транспортировки крови (сыворотки) следует использовать термоконтейнеры (сумки-холодильники, термос). Если используются холодильные элементы (они должны быть заморожены), нужно положить их на дно и по бокам контейнера, а затем внутрь поместить пластиковый пакет с образцами сыворотки, сверху - вновь положить замороженные элементы. Сопроводительные документы, указав дату и время отправления, поместить в полиэтиленов