Приложение N 2. Технология выполнения простой медицинской услуги 12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0"

Приложение N 2
к приказу МЗ РТ
от 15.07.2010 г. N 908

Технология
выполнения простой медицинской услуги 12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0"

Основанием для разработки "Технологии выполнения простой медицинской услуги 12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0", является Отраслевой классификатор "Простые медицинские услуги" (ОК ПМУ N 91500.09.0001-2001), утвержденный Приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации от 10 апреля 2001 г. N 113.

1. Введение

1.1. Сокращения

ГУЗ РСПК МЗ РТ - Государственное учреждение здравоохранения "Республиканская станция переливания крови Министерства здравоохранения Республики Татарстан"

КЛД - клиническая лабораторная диагностика

ЛПУ - лечебно-профилактическое учреждение

МЗ РТ - Министерство здравоохранения Республики Татарстан

МЗ РФ - Министерство здравоохранения Российской Федерации

ПМУ - простая медицинская услуга

РПГА - реакция прямой гемагглютинации

ТВ ПМУ - технология выполнения простой медицинской услуги

1.2. Определения

Простая медицинская услуга - неделимая услуга, выполняемая по формуле "пациент" + "специалист" = "один элемент профилактики, диагностики или лечения".

Иммуногематология - наука о групповых свойствах крови.

Группа крови АВ0 - это набор групповых антигенов А и В и естественных анти-А, анти-В антител, который наследственно детерминирован и не меняется в течение жизни.

Групповые антигены (агглютиногены) А и В - это структурные образования, расположенные на внешней поверхности мембраны эритроцитов, обладающие способностью взаимодействовать с соответствующими антителами и образовывать комплекс антиген-антитело. Групповые антигены А и В обладают высокой иммуногенностью, что и определяет их клиническое значение в развитии немедленных посттрансфузионных осложнений гемолитического типа и гемолитической болезни новорожденных. Антиген А может быть представлен слабыми вариантами, в связи с чем в группах крови А(II) и АВ(IV) выделяют подгруппы А1(II), А2(II), А1В(IV), А2В(IV) соответственно. Эритроциты подгруппы А2 обладают пониженными агглютинабельными свойствами. Слабо выраженная агглютинация может остаться незамеченной, и лица подгруппы А2 могут быть ошибочно отнесены к группе 0(I), а лица с подгруппой А2В (IV) могут быть причислены к группе В(III).

Естественные анти-А, анти-В антитела (агглютинины) - это иммуноглобулины классов IgM, IgG, IgА, которые постоянно находятся в сыворотке крови человека без всякого иммунного стимула. Они являются врожденными (регулярными) и не меняются в течение жизни. В сыворотке крови примерно 1% лиц, имеющих подгруппу А2(II), и почти 25% лиц, имеющих подгруппу А2В(IV), содержатся экстраагглютинины (анти-А1 антитело), специфически взаимодействующее с эритроцитами А1(II), А1В(IV). Они не активны при 37°С и клинического значения не имеют, однако вызывают агглютинацию эритроцитов при проведении проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента.

Иммунные групповые анти-А, анти-В антитела - это антитела, вырабатываемые индивидуумом в ответ на внедрение отсутствующих групповых антигенов А, или В, или А и В.

Определение группы крови АВ0 - это идентификация антигенов и антител с помощью иммунологических стандартов (стандартных изогемагглютинирующих сывороток, стандартных эритроцитов АВ0 или цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ).

Прямой метод - это метод определения группы крови АВ0 по групповым антигенам А и В, основанный на РПГА. Прямой метод выполняется при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток или цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ.

Перекрестный метод - это метод определения группы крови АВ0 по одновременному выявлению групповых антигенов А и В и естественных анти-А, анти-В антител, основанный на РПГА.

Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки - это поликлональные иммунологические стандарты, приготовленные из крови нескольких человек, и содержащие естественные анти-А, анти-В антитела. Предназначены для выявления групповых антигенов А и В. Представляют собой прозрачную жидкость, окрашенную в соответствии с групповой принадлежностью и расфасованную в ампулы или флаконы.

Стандартные эритроциты АВ0 - это иммунологические стандарты, приготовленные из эритроцитной массы специально отобранных доноров. Предназначены для выявления естественных анти-А, анти-В антител перекрестным методом.

Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ - это моноклональные иммунологические стандарты, приготовленные из концентрата асцитной жидкости мышей - носителей анти-А, анти-В гибридом. Предназначены для выявления групповых антигенов А и В. Представляют собой прозрачную жидкость, окрашенную в соответствии с групповой принадлежностью и расфасованную во флаконы.

Агглютинация - это реакция взаимодействия антигена со специфическим антителом, проявляется в виде агрегации (склеивания) эритроцитов.

Аутоантитела - это антитела, имеющие специфичность к собственным антигенам индивида.

Гелевая методика - это метод определения группы крови АВ0, основанный на комбинации методов агглютинации и гель-фильтрации. Проводится с помощью пластиковых диагностических карточек, которые состоят из микропробирок, заполненных полиакриламидным гелем и соответствующими реагентами.

Иммуногенность - способность антигена вызвать иммунный ответ.

Неспецифическая агглютинация - это агглютинация неожиданная, атипичная, не свойственная конкретной групповой антигенной системе. В основе неспецифической агглютинации лежат определенные специфические механизмы. На появление неспецифической агглютинации влияют белковый состав среды, солевой состав среды, состояние свертывающей системы крови гормональный фон.

Полиагглютинабельность - способность исследуемого образца крови давать агглютинацию со всеми образцами стандартных изогемагглютинирующих сывороток, независимо от их групповой принадлежности.

1.3. Номенклатура системы групп крови АВ0

Принято буквенно-цифровое обозначение групп крови АВ0, которое включает в себя буквенное обозначение антигена (0, А, В или АВ), цифровое обозначение (римскими цифрами I, II, III, IV), а также буквенное обозначение антител. По современной классификации антитела обозначают как анти-А и анти-В, взамен и изогемагглютининов (см. таблицу 1).

Таблица 1

Буквенно-цифровое обозначение групп крови АВ0

Группа крови АВ0	Ранее принятое обозначение	Современное обозначение
Первая		0(I) анти-АВ
Вторая		А(II) анти-В
Третья		В(III) анти-А
Четвертая	АВ0(IV)	АВ0(IV)

В настоящее время для обозначения групп крови возможно использование ранее принятого и современного обозначения групп крови по системе АВ0.

На этикетках стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0, выпускаемых учреждениями службы крови МЗ РТ, используется как ранее принятое, так и современное обозначения групп крови АВ0.

1.4. Сведения о разработчиках

В разработке "Технологии выполнения простой медицинской услуги 12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0" участвовали специалисты Министерства здравоохранения Республики Татарстан и Государственного учреждения здравоохранения "Республиканская станция переливания крови Министерства здравоохранения Республики Татарстан" (см. таблицу 2).

Таблица 2

Сведения о разработчиках "Технологии выполнения простой медицинской услуги 12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0"

Ф.И.О. разработчиков	Место работы, занимаемая должность, степень, звание	Адрес места работы	Рабочий телефон
Лысенко Галина Викторовна	Начальник Управления качества медицинской помощи и отраслевой стандартизации МЗ РТ	4200111, г. Казань, ул. Островского, д. 11/6	(843) 231-79-73
Бурыкин Игорь Михайлович	Начальник отдела отраслевой стандартизации МЗ РТ, к.м.н.	4200111, г. Казань, ул. Островского, д. 11/6	(843) 231-79-74
Кочнев Александр Владимирович	Ведущий советник отдела отраслевой стандартизации МЗ РТ, к.м.н.	4200111, г. Казань, ул. Островского, д. 11/6	(843) 231-79-74
Закирова Ильмира Нуриахметовна	Ведущий консультант отдела отраслевой стандартизации МЗ РТ	4200111, г. Казань, ул. Островского, д. 11/6	(843) 231-79-76
Сидорук Евгений Александрович	Главный врач ГУЗ РСПК МЗ РТ, главный внештатный специалист трансфузиолог МЗ РТ, к.м.н.	420088, г. Казань, ул. Ново-Азинская, д. 33	(843) 272-28-03
Сибгатуллина Лилия Нагимзяновна	Заместитель главного врача по медицинской части ГУЗ РСПК МЗ РТ.	420029, г. Казань, ул. Сибирский тракт, д. 33	(843) 273-43-72
Хамидуллина Эльмира Рашитовна	Заместитель главного врача по организационно-методической работе ГУЗ РСПК МЗ РТ	420088, г. Казань, ул. Ново-Азинская, д. 33	(843) 273-78-23
Гадыльшина Райса Сагитовна	Заведующая иммунологическим отделением ГУЗ РСПК МЗ РТ	420088, г. Казань, ул. Ново-Азинская, д. 33	(843) 272-26-61
Бельская Елена Евгеньевна	Врач клинической лабораторной диагностики иммунологического отделения ГУЗ РСПК МЗ РТ	420088, г. Казань, ул. Ново-Азинская, д. 33	(843) 272-26-61

Рецензенты:

Д.Т. Сиразитдинов - главный специалист эксперт МЗ РТ по клинической лабораторной диагностике.

Н.Н. Аксенова - заведующая кабинетом гемотрансфузий Государственного учреждения здравоохранения "Республиканский онкологический диспансер МЗ РТ", врач-хирург высшей категории, к.м.н.;

Д.Р. Мухамедов - врач анестезиолог-реаниматолог Муниципального бюджетного учреждения здравоохранения "Апастовская центральная районная больница".

1.5. Цели и задачи

ТВ ПМУ разработана с целью нормативного обеспечения и унификации процесса выполнения простой медицинской услуги 12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0" в медицинских учреждениях на территории Республики Татарстан.

ТВ ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" разработана для решения следующих задач:

- нормативного обеспечения внедрения стандарта ТВ ПМУ "Определение основных групп крови АВ0";

- установления единых требований к оказанию ПМУ "Определение основных групп крови АВ0";

- унификации расчетов трудозатрат на выполнение ТВ ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" в медицинских учреждениях на территории Республики Татарстан;

- контроля качества и безопасности, оказанной пациенту ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" в медицинских учреждениях на территории Республики Татарстан;

- проверки на соответствие установленным требованиям при проведении процедуры лицензирования;

- защиты прав пациента и врача при разрешении спорных и конфликтных вопросов.

ТВ ПМУ представляет собой систематизированный свод медицинских правил и условий, технического обеспечения, определяющий порядок и последовательность действий, выполняемых медицинским персоналом.

При разработке ТВ ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" использовались нормативные документы (приказы, инструкции, методические указания МЗ РФ и МЗ РТ), учитывались результаты научных исследований.

2. Требования отраслевых стандартов технологий выполнения ПМУ

2.1. Требования к специалистам, включая требования к обеспечению безопасности

Определение группы крови АВ0 должны проводить специалисты, имеющие подготовку по вопросам иммуногематологии на специализированных циклах усовершенствования на базе учреждений дополнительного профессионального образования и/или на базе учреждений службы крови РТ (см. таблицу 3).

Таблица 3

Требования к специалистам, выполняющим ПМУ "Определение основных групп крови АВ0"

Медицинское учреждение	Выполнение ПМУ "Определение основных групп крови АВ0"	Медицинский персонал	Дополнительные требования к медицинскому персоналу
Стационар, в том числе дневной в амбулаторно-поликлинических условиях	Первично и перед каждым переливанием крови и ее компонентов	Лечащий или дежурный врач Врач-трансфузиолог	Должны иметь специальную подготовку по вопросам иммуногематологии на специализированных циклах усовершенствования на базе учреждений дополнительного профессионального образования и/или на базе учреждений службы крови РТ не реже одного раза в 5 лет
	Централизованное переопределение	Врач КЛД или биолог КЛД
Другие ЛПУ	Для амбулаторных пациентов	Врач КЛД или биолог КЛД

Все манипуляции проводить в медицинской одежде с использованием индивидуальных средств защиты (медицинские перчатки, защитные очки или щитки). С любыми образцами крови пациента следует обращаться как с потенциальными переносчиками инфекционных заболеваний.

2.2. Условия выполнения ПМУ и функциональное назначение

Таблица 4

Условия выполнения ПМУ и функциональное назначение

Наименование ПМУ	Условия оказания	Функциональное назначение
12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0"	Амбулаторно-поликлинические	Диагностика
12.05.005 "Определение основных групп крови АВ0"	Помощь в условиях стационара, в том числе дневного стационара	Диагностика

2.3. Материальные ресурсы

Для выполнения ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" должно быть оснащено отдельное место (или специальное помещение), которое оборудуется согласно требованиям приказа МЗ РФ от 09.01.1998 N 2 "Об утверждении инструкций по иммуносерологии".

2.3.1. Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения

Таблица 5

Приборы, инструменты, изделия медицинского назначения, необходимые для определения групп крови АВ0, а также альтернативные приборы и изделия медицинской техники

Наименование прибора, изделия медицинской техники и др.	Количество приборов, инструментов, изделий медицинской техники	Альтернативный прибор, изделие медицинской техники
Определение основных групп крови АВ0 прямым и перекрестным методами
Стол лабораторный	1 шт.	Стол с покрытием из пластика
Стул	1 шт.
Настольная лампа	1 шт.	Настенная лампа
Планшеты для иммуногематологических исследований	1 шт. на 1 исследование	Тарелка белого цвета фарфоровая или эмалированная
Пипетка Пастера	1 шт.	Автоматическая пипетка переменного объема 20-200 мкл
Стеклянные палочки (лопаточки)	От 1 до 10 шт.	Палочка из пластмассы
Песочные часы на 3 и 5 минут	По 1 шт.	Секундомер
Лупа с 8-кратным увеличением	1 шт.
Штатив лабораторный на 10 гнезд	1 шт.
Стеклянные баночки	2 шт.	Стеклянные стаканы
Центрифуга лабораторная ОПН-3	1 шт.	Центрифуга лабораторная СМ-6 М, ELMI
Определение основных групп крови АВ0 гелевой методикой
Стол лабораторный	1 шт.	Стол с покрытием из пластика
Стул	1 шт.
Штатив лабораторный на 10 гнезд	1 шт.
Стеклянные стаканы	2 шт.	Стеклянные баночки
Центрифуга лабораторная ОПН-3	1 шт.	Центрифуга лабораторная СМ-6 М, ELMI
Центрифуга для гелевых пластиковых карт	1 шт.
Автоматическая пипетка переменного объема	5-40 мкл 1 шт. 100-1000 мкл 1 шт.
Штатив для автоматических пипеток переменного объема	1 шт.
Пробирки центрифужные	1 шт.

2.3.2. Реактивы

Для выполнения ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" используются иммунологические стандарты различной специфичности (см. таблицу 6).

Таблица 6

Иммунологические стандарты, используемые для определения группы крови АВ0

Наименование реактива	Документ, регламентирующий использование реактива	Количество реактива, необходимое для выполнения 1-го исследования		Сроки и особенности хранения реактива, работы с ним*	Особенности уничтожения и обеззараживания реактива или продуктов реакций	Требования к обеспечению безопасности персонала при работе с реактивом
Определение основных групп крови АВ0 прямым и перекрестным методами
Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки АВ0	Приказ МЗ РФ от 09.01.1998 N 2 "Об утверждении инструкций по иммуносерологии"	По одной большой капле (100 мкл) реактивов 0(I) (анти -АВ), А(II) (анти-В) и В(III) (анти-А) двух серий; 100 мкл, АВ(IV)0 - одной серии		Хранить при t+2...+8°С. Срок годности - 6 месяцев с даты изготовления. После вскрытия годен в течение 2 недель.	Сгустки крови обеззараживаются с помощью дез. средств с содержанием активного хлора, дезинфекция лабораторной посуды производится с применением дезинфицирующих средств, не содержащих активного хлора	Работа в медицинской спецодежде, медицинских перчатках, защитных очках (щитках)
Стандартные эритроциты АВ0		По одной маленькой капле (10 мкл) каждой группы		Хранить при t+2...+8°С Срок годности - 2 месяца с даты изготовления. После вскрытия годен в течение 5-7 дней.
Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ		По одной большой капле (100 мкл) каждой группы		Хранить при t+2...+8°С Срок годности - 2 года с даты изготовления. После вскрытия годен в течение 1 месяца.
Цоликлон анти-А1 (лектин) (для КДЛ и специализированных лабораторий)		Одна большая капля (100 мкл)		Хранить при t+2...+8°С Срок годности - 2 года с даты изготовления. После вскрытия годен в течение 1 месяца.
Раствор натрия хлорида, 0,9%		По 50 мкл в каждую лунку		Хранить при t+15...+25°С
Определение основных групп крови АВ0 гелевой методикой
Диагностические карточки для определения группы крови	Инструкции, прилагаемые к соответствующим диагностическим карточкам		От 0,5 до 1 шт. в зависимости от используемой диагностической карты.	Хранить при t+15...+25°С	Произвести дезинфекцию как биологических отходов (класс отходов Б)	Работа в медицинской спецодежде, медицинских перчатках, защитных очках (щитках)
Раствор для приготовления суспензии исследуемых эритроцитов	Инструкция, прилагаемая к раствору		От 0,5 до 1,0 мл в зависимости от производителя	Хранить при t+2...+8°С
Набор стандартных эритроцитов А1 и В	Инструкция, прилагаемая к набору		По 50 мкл каждого реактива	Хранить при t+2...+8°С

* - Температура внутри холодильной камеры, где хранятся реактивы, контролируется средним медработником дважды в день. Показания термометра регистрируются в "Журнале регистрации температурного режима хранения диагностических стандартов для иммуногематологических исследований" (см. приложение 1).

2.3.3. Прочий расходуемый материал

Для выполнения ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" используются прочий расходуемый материал (см. таблицу 7).

Таблица 7

Прочий расходуемый материал, используемый для определения группы крови АВ0

Наименование	Количество	Примечание
Определение основных групп крови АВ0 прямым и перекрестным методами
Ватно-марлевый тампон	На 1 тампон: вата - 3,0 гр., бинт - 30 см	Для подсушивания пипетки и стеклянной палочки
Медицинские перчатки одноразовые	1 пара на каждые 3 часа работы	Заменить немедленно при нарушении целостности или сильном загрязнении.
Раствор натрия хлорида, 0,9%	0,5 л	Для промывания пипеток и палочек
Спирт этиловый медицинский, 70,0%	3,0 гр. на 1 обработку	Для обработки рук персона после окончания работы
Дезинфицирующий раствор	В соответствии с методическими указаниями по применению дез. средств, разрешенных к использованию в РФ и РТ	Для дезинфекции биологического материала, лабораторной посуды и рабочего места.
Определение основных групп крови АВ0 гелевой методикой
Медицинские перчатки одноразовые	1 пара на каждые 3 часа работы	Заменить немедленно при нарушении целостности или сильном загрязнении.
Спирт этиловый медицинский, 70,0%	3,0 гр. на 1 обработку	Для обработки рук персона после окончания работы
	7-10 гр. на 1 центрифугу в конце рабочего дня	Для обработки центрифуги
Наконечники для автоматических пипеток переменного объема, одноразовые	3 шт. на 1 исследование
Дезинфицирующий раствор	В соответствии с методическими указаниями по применению дез. средств, разрешенных к использованию в РФ и РТ	Для дезинфекции биологического материала, лабораторной посуды и рабочего места.

2.4. Характеристика методики выполнения ПМУ "Определение основных групп крови АВ0"

2.4.1. Требования к образцам крови

Перед процедурой забора крови на исследование у пациента уточнить его фамилию, имя и отчество. Взять сухую чистую пробирку, на которую нанести следующую информацию о пациенте: Ф.И.О., дату забора крови, для стационарных больных - номер медицинской карты. Кровь пациента забрать из вены в количестве 3-5 мл и перенести в подписанную пробирку. Для исследования используют цельную кровь, отмытые эритроциты, эритроциты в плазме, сыворотке, консерванте или физиологическом растворе.

При наличии у пациента анемии (содержание гемоглобина крови менее 70 г/л) для получения достаточного количества эритроцитов использовать для исследования образец крови пациента, с консервантом (цитрат натрия, ЭДТА). Соотношение исследуемой крови и консерванта для цитрата натрия 10:1, для ЭДТА 100:1.

Использовать для исследования кровь пациента не более двухдневного срока хранения при t+2°С...+8°С.

Не использовать для исследований гемолизированную кровь. При наличии гемолиза процедуру взятия крови повторить.

2.4.2. Требования к помещению

Иммуногематологические исследования проводить в помещении с естественным освещением, температура воздуха в помещении должна быть в пределах +15°С...+25°С.

2.4.3. Требования к объемам исследований в зависимости от медицинского учреждения

2.4.3.1. Стационар, в том числе дневной стационар в амбулаторно-поликлинических условиях

При поступлении в стационар группу крови АВ0 пациенту определяет дежурный или лечащий врач прямым методом.

Во избежание ошибки процедуру взятия крови и определения группы крови АВ0 повторяют. Повторное определение групповой принадлежности крови осуществляется централизованно в лаборатории ЛПУ, кабинете переливания крови или в отделении переливания крови перекрестным методом или гелевой методикой. При направлении на централизованное переопределение образец крови пациента сопровождается направлением (см. приложение 2).

Для первичного определения при поступлении пациента и централизованного переопределения группы крови АВ0 перекрестным методом используются диагностические стандарты различных наименований или различных серий.

Результат переопределения вклеивается в медицинскую карту (см. приложение 2). При совпадении результатов первичного и централизованного переопределения групповая принадлежность крови пациента выносится на титульный лист медицинской карты, скрепляется подписью врача, проводившего первичное определение.

Категорически запрещается переносить сведения о групповой принадлежности крови пациента с любого другого документа!

Перед переливанием крови и ее компонентов крови определение групповой принадлежности крови реципиента (из пробирки) и донора (из сегмента трубки контейнера) проводится прямым методом с использованием стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0 или цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ.

Предтрансфузионный образец крови реципиента хранить при температуре t+2°С...+8°С в течение 5 суток. Остатки трансфузионной среды хранить при температуре t+2°С...+8°С в течение 48 часов.

Предтрансфузионный образец крови реципиента и остатки трансфузионной среды предназначены для исследования в специализированной лаборатории службы крови при возникновении посттрансфузионного осложнения.

2.4.3.2. Женская консультация

При постановке на учет по беременности женщинам группу крови АВ0 определяют перекрестным методом. Повторное определение группы крови АВ0 произвести в 28-30 недель беременности перекрестным методом или гелевой методикой.

Результат определения групп крови АВ0, полученный в лаборатории женской консультации заносятся в "Журнал регистрации результатов определения групповой и резус-принадлежности" (см. приложение 3).

Категорически запрещается переносить сведения о групповой принадлежности крови пациента с любого другого документа.

При несовпадении результатов первичного и повторного исследования образец крови беременной женщины направить в специализированную лабораторию СПК или ОПК для дальнейшего исследования.

2.4.3.3. Поликлиника

Для амбулаторно-поликлинических пациентов определение группы крови АВ0 производится перекрестным методом или гелевой методикой.

Результат определения групп крови АВ0, полученный в лаборатории поликлиники заносятся в "Журнал регистрации результатов определения групповой и резус-принадлежности" (см. приложение 3).

Категорически запрещается переносить сведения о групповой принадлежности крови пациента с любого другого документа.

2.4.4. Методы определения группы крови по системе АВ0

Прежде чем приступить к исследованию, необходимо произвести макроскопическую оценку диагностических стандартов: реактивы должны быть прозрачными, без осадка и других признаков загрязнения; вскрытые ампулы (флаконы) должны быть закрытыми для предотвращения подсыхания содержимого. Проверить срок годности реактивов с даты изготовления, указанной на этикетке, и со дня вскрытия реактива (срок годности флакона (ампулы) см. таблица 6).

Ампулы (флаконы) расположить в штативе в определенном порядке: 1 ряд слева направо - одна серия стандартных изогемагглютинирующих сывороток (анти-АВ), (анти-В) и (анти-А); 2 ряд слева направо - вторая серия стандартных изогемагглютинирующих сывороток (анти-АВ), (анти-В) и (анти-А), а также сыворотка АВ0(IV); 3 ряд слева направо - стандартные эритроциты 0(I), А(II) и В(III).

При работе с цоликлонами порядок расположения реактивов в штативе следующий: слева направо - анти-А, анти-В, анти-АВ. При определении группы крови перекрестным методом с использованием цоликлонов (для удобства при чтении результатов) расположение цоликлонов следующее: анти-АВ, анти-В, анти-А.

Перед работой иммунологические стандарты выдержать при комнатной температуре не менее 1 часа.

2.4.4.1. Определение основных групп крови АВ0 прямым методом при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0

Порядок проведения исследования:

Определение группы крови АВ0 производить на планшете со смачиваемой поверхностью.

1. Промаркировать планшет, для чего указать Ф.И.О. пациента, кровь которого исследуют, а также надписать специфичность изогемагглютинирующих сывороток АВ0 в порядке их нанесения.

2. Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки АВ0 раскапать в два ряда: в первом ряду сыворотки одной серии (анти-АВ), (анти-В) и (анти-А), во втором ряду сыворотки другой серии (анти-АВ), (анти-В) и (анти-А) по одной большой капле (по 100 мкл) под соответствующими надписями.

3. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно взять пипеткой эритроциты и нанести маленькую каплю (10 мкл) рядом со стандартными сыворотками. Соотношение эритроцитов и сыворотки - 1:10 (см. рисунок 1).

"Рисунок 1. Порядок расположения стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0 и их соотношение с исследуемой кровью"

4. Каждую каплю стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0 перемешать с каплей эритроцитов стеклянной палочкой (см. рисунок 2).

"Рисунок 2. Перемешивание изогемагглютинирующих сывороток с исследуемыми эритроцитами"

Наблюдать за реакцией 5 минут при постоянном покачивании планшета. После окончания экспозиции в те капли, где имеется агглютинация, добавить по одной капле (50 мкл) раствора натрия хлорида, 0,9%, покачивая планшет.

5. Трактовка результатов реакции.

Положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов, агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких или крупных красных агрегатов.

При отрицательном результате (-) капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинации в ней не обнаруживается.

Результаты могут быть выражены в 4-х различных комбинациях.

а) Исследуемая кровь принадлежит к группе 0(I), если со всеми стандартными изогемагглютинирующими сыворотками АВ0 получены отрицательные результаты (см. рисунок 3).

"Рисунок 3. Исследуемая кровь группы 0(I)"

б) Исследуемая кровь принадлежит к группе А(II), если в реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками (анти-АВ) и (анти-А) получен положительный результат, а со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой (анти-В) получен отрицательный результат (см. рисунок 4).

"Рисунок 4. Исследуемая кровь группы А(II)"

в) Исследуемая кровь принадлежит к группе B(III), если в реакции со стандартными изогемагглютинирующими сывороткам (анти-АВ) и (анти-В) получен положительный результат, а со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой (анти-А) получен отрицательный результат (см. рисунок 5).

"Рисунок 5. Исследуемая кровь группы В(III)"

г) В тех случаях, когда положительный результат получен со всеми стандартными сыворотками, для исключения неспецифической агглютинации провести дополнительное контрольное исследование со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой АВ0(IV) группы. Для этого на планшет нанести большую каплю (100 мкл) стандартной изогемагглютинирующей сыворотки АВ0(IV), рядом маленькую каплю (10 мкл) исследуемых эритроцитов. Капли перемешать стеклянной палочкой. Наблюдать за реакцией 5 минут.

Исследуемая кровь принадлежит к группе АВ0(IV), если со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой АВ0(IV) получен отрицательный результат (см. рисунок 6).

"Рисунок 6. Исследуемая кровь группы АВ0(IV)"

2.4.4.2. Определение основных групп крови АВ0 прямым методом при помощи цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ

Порядок проведения исследования:

Определение группы крови АВ0 производить на планшете со смачиваемой поверхностью.

1. Промаркировать планшет, для чего указать Ф.И.О. пациента, кровь которого исследуют, а также надписать специфичность цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ в порядке их нанесения.

2. Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ раскапать в один ряд по одной большой капле (по 100 мкл) под соответствующими надписями.

3. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно взять пипеткой эритроциты и нанести по одной маленькой капле (10-30 мкл) рядом с цоликлонами, соотношение эритроцитов и цоликлонов - 1:10 или 3:10 (см. рисунок 7).

"Рисунок 7. Порядок расположения цоликлонов и соотношение с исследуемыми эритроцитами"

4. Перемешать эритроциты с реагентами стеклянной палочкой. Наблюдать за реакцией 3 минуты при постоянном покачивании.

5. Трактовка результатов реакции.

Положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов, агглютинаты видны невооруженным глазом в виде крупных красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья.

При отрицательном результате (-) капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинации в ней не обнаруживается.

Результаты могут быть выражены в 4-х различных комбинациях.

а) Исследуемая кровь принадлежит к группе 0(I), если со всеми цоликлонами получены отрицательные результаты (см. рисунок 8).

"Рисунок 8. Исследуемая кровь группы 0(I)"

б) Исследуемая кровь принадлежит к группе А(II), если в реакции с цоликлонами анти-А и анти-АВ получен положительный результат, а с цоликлоном анти-В получен отрицательный результат (см. рисунок 9).

"Рисунок 9. Исследуемая кровь группы А(II)"

в) Исследуемая кровь принадлежит к группе B(III), если в реакции с цоликлонами анти-В и анти-АВ получен положительный результат, а с цоликлоном анти-А получен отрицательный результат (см. рисунок 10).

"Рисунок 10. Исследуемая кровь группы В(III)"

г) В тех случаях, когда положительный результат получен со всеми цоликлонами, для исключения неспецифической агглютинации произвести дополнительное контрольное исследование с раствором натрия хлорида, 0,9%. Для этого на планшет нанести большую каплю (100 мкл) раствора натрия хлорида, 0,9%, рядом добавить 10-30 мкл исследуемых эритроцитов. Капли перемешать стеклянной палочкой. Наблюдать за реакцией 3 минуты, покачивая планшет.

Исследуемая кровь принадлежит к группе АВ (IV) если в реакции с раствором натрия хлорида, 0,9% получен отрицательный результат (см. рисунок 11).

"Рисунок 11. Исследуемая кровь группы АВ(IV)"

2.4.4.3. Определение основных групп группы крови АВ0 перекрестным методом при помощи стандартных сывороток АВ0 и стандартных эритроцитов АВ0

Порядок проведения исследования:

Определение группы крови АВ0 производить на планшете со смачиваемой поверхностью.

1. Промаркировать планшет, для чего указать Ф.И.О. пациента, кровь которого исследуют, а также надписать специфичность изогемагглютинирующих сывороток АВ0 и стандартных эритроцитов АВ0 в порядке их нанесения.

2. Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки АВ0 раскапать в два ряда: в первом ряду сыворотки одной серии (анти-АВ), (анти-В) и (анти-А), во втором ряду сыворотки другой серии (анти-АВ), (анти-В) и (анти-А) по одной большой капле (по 100 мкл) под соответствующими надписями.

3. В третий ряд раскапать по одной маленькой капле (10 мкл) стандартных эритроцитов 0(I), A(II), B(III) под соответствующими надписями.

4. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно взять пипеткой сыворотку крови пациента (100 мкл) и поместить рядом со стандартными эритроцитами АВ0, соотношение стандартных эритроцитов и исследуемой сыворотки - 1:10. Этой же пипеткой из пробирки взять исследуемые эритроциты (10 мкл) и поместить рядом со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками АВ0, соотношение исследуемых эритроцитов и стандартных сывороток - 1:10 (см. рисунок 12).

"Рисунок 12. Порядок расположения стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0, стандартных эритроцитов АВ0 и соотношение с исследуемой кровью"

5. Каждую каплю исследуемого материала перемешать стеклянной палочкой с соответствующим диагностическим стандартом. Наблюдать за реакцией 5 минут, при постоянном покачивании планшета. После окончания экспозиции в те капли, где имеется агглютинация, добавить по одной капле (50 мкл) раствора натрия хлорида, 0,9%.

6. Трактовка результатов реакции.

Положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов, агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких или крупных красных агрегатов.

При отрицательном результате (-) капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинации в ней не обнаруживается.

Результаты могут быть выражены в 4-х различных комбинациях.

а) Исследуемая кровь принадлежит к группе (анти-АВ), если в реакции со всеми стандартными изогемагглютинирующими сыворотками АВ0 и стандартными эритроцитами 0(I) получены отрицательные результаты, а положительные результаты получены в реакции со стандартными эритроцитами A (II) и B(III) (см. рисунок 13).

"Рисунок 13. Исследуемая кровь группы 0АВ(I) (анти-АВ)"

б) Исследуемая кровь принадлежит к группе (анти-В), если в реакциях со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками (анти-АВ) и (анти-А) и со стандартными эритроцитами B(III) получены положительные результаты, а отрицательные результаты получены в реакциях со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой (анти-В) и стандартными эритроцитами 0(I), A(II) (см. рисунок 14).

"Рисунок 14. Исследуемая кровь группы АВ(II) (анти-В)"

в) Исследуемая кровь принадлежит к группе (анти-А), если в реакциях со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками (анти-АВ), (анти-В) и со стандартными эритроцитами А(II) получены положительные результаты, а отрицательные результаты получены в реакциях со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой (анти-А) и стандартными эритроцитами 0(I), В(III) (см. рисунок 15).

"Рисунок 15. Исследуемая кровь группы ВА(III) (анти-А)"

г) В тех случаях, когда положительный результат получен со всеми стандартными сыворотками, а со всеми стандартными эритроцитами получен отрицательный результат, для исключения неспецифической агглютинации провести дополнительное контрольное исследование со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой АВ0(IV) группы. Для этого на планшет нанести большую каплю (100 мкл) стандартной изогемагглютинирующей сыворотки АВ0(IV), рядом маленькую каплю (10 мкл) исследуемых эритроцитов. Капли перемешать стеклянной палочкой. Наблюдать за реакцией 5 минут при покачивании планшета.

Исследуемая кровь принадлежит к группе АВ0(IV), если со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой АВ0(IV) получен отрицательный результат (см. рисунок 16).

"Рисунок 16. Исследуемая кровь группы АВ0 (IV)"

2.4.4.4. Определение основных групп группы крови АВ0 перекрестным методом при помощи цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ и стандартных эритроцитов АВ0

Порядок проведения исследования:

Определение группы крови АВ0 производить на планшете со смачиваемой поверхностью.

1. Промаркировать планшет, для чего указать Ф.И.О. пациента, кровь которого исследуют, а также надписать специфичность цоликлонов анти-АВ, анти-В, анти-А и стандартных эритроцитов АВ0 в порядке их нанесения.

2. Цоликлоны анти-АВ, анти-В, анти-А раскапать в один ряд по одной большой капле (по 100 мкл) под соответствующими надписями.

3. Во второй ряд раскапать по одной маленькой капле (10-30 мкл) стандартных эритроцитов. 0(I), A(II), B(III) групп. 

4. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно взять пипеткой сыворотку крови пациента (100 мкл) и поместить рядом со стандартными эритроцитами АВ0, соотношение стандартных эритроцитов и исследуемой сыворотки - 1:10. Этой же пипеткой из пробирки взять исследуемые эритроциты (10-30 мкл) и поместить рядом с цоликлонами анти-АВ, анти-В, анти-А, соотношение исследуемых эритроцитов и цоликлонов - 1:10 или 3:10 (см. рисунок 17)

"Рисунок 17. Порядок расположения цоликлонов и стандартных эритроцитов АВ0 и соотношение с исследуемыми эритроцитами"

5. Каждую каплю исследуемого материала перемешать стеклянной палочкой с соответствующим диагностическим стандартом. Наблюдать за реакцией 3 минуты, при постоянном покачивании планшета.

6. Трактовка результатов реакции.

Положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов, агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких или крупных красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья.

При отрицательном результате (-) капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинации в ней не обнаруживается.

Результаты могут быть выражены в 4-х различных комбинациях.

а) Исследуемая кровь принадлежит к группе 0(I) анти-АВ, если в реакции если со всеми цоликлонами и стандартными эритроцитами 0(I) получены отрицательные результаты, а положительные результаты получены в реакции со стандартными эритроцитами A(II) и B(III) (см. рисунок 18).

"Рисунок 18. Исследуемая кровь группы 0(I) анти-АВ"

б) Исследуемая кровь принадлежит к группе А(II) анти-В, если в реакции с цоликлонами анти-А и анти-АВ и со стандартными эритроцитами B(III) получены положительные результаты, а отрицательные результаты получены в реакциях с цоликлоном анти-В и стандартными эритроцитами 0(I), A(II) (см. рисунок 19).

"Рисунок 19. Исследуемая кровь группы А(II) анти-В"

в) Исследуемая кровь принадлежит к группе B(III), если в реакции с цоликлонами анти-В и анти-АВ и со стандартными эритроцитами А(II) получены положительные результаты, а отрицательные результаты получены в реакциях с цоликлоном анти-А и стандартными эритроцитами 0(I), В(III) (см. рисунок 20).

"Рисунок 20. Исследуемая кровь группы В(III) анти-А"

г) В тех случаях, когда положительный результат получен со всеми цоликлонами, а со всеми стандартными эритроцитами получен отрицательный результат, для исключения неспецифической агглютинации провести дополнительное контрольное исследование с раствором натрия хлорида, 0,9%. Для этого на планшет нанести большую каплю (100 мкл) раствора натрия хлорида, 0,9%, рядом добавить маленькую каплю (10-30 мкл) исследуемых эритроцитов. Капли перемешать стеклянной палочкой. Наблюдать за реакцией 3 минуты.

Исследуемая кровь принадлежит к группе АВ0(IV), если с раствором натрия хлорида, 0,9% получен отрицательный результат (см. рисунок 21).

"Рисунок 21. Исследуемая кровь группы АВ0(IV)"

2.4.4.5. Определение основных групп крови АВ0 при помощи гелевой методики

2.4.4.5.1. Определение основных групп крови АВ0 при помощи идентификации групповых антигенов А и В в геле.

Для определения группы крови АВ0 использовать диагностическую карту, содержащую микропробирки для идентификации групповых антигенов А и В. Микропробирки для идентификации групповых антигенов А и В имеют цветную и соответствующую буквенную (А, В, АВ) маркировку.

Перед исследованием провести макроскопическую оценку диагностической карты. Не использовать карту, если в микропробирках наблюдается изменение цвета, в геле имеются взвешенные пузырьки, наблюдается уменьшение объема геля или его растрескивание. Микропробирки должны содержать надосадочную жидкость. Если наблюдается рассредоточенное каплеобразование в верхней части микропробирки, рекомендуется центрифугировать карты перед использованием. Если капли не оседают, карту не использовать.

В настоящее время существует множество модификаций карт для определения групп крови. К каждой карте прилагается инструкция по использованию. Перед работой необходимо внимательно ознакомиться с прилагаемой инструкцией.

2.4.4.5.2. Определение основных групп крови АВ0 при помощи идентификации групповых антигенов А, В и естественных анти-А, анти-В антител в геле.

Для определения группы крови АВ0 использовать диагностическую карту, содержащую микропробирки для идентификации групповых антигенов А, В и естественных анти-А, анти-В антител. Микропробирки для идентификации групповых антигенов А и В имеют цветную и соответствующую буквенную (А, В, АВ) маркировку. Микропробирки для идентификации естественных анти-А, анти-В антител имеют белую и соответствующую буквенную (А1, В) маркировку.

Перед исследованием провести макроскопическую оценку диагностической карты. Не использовать карту, если в микропробирках наблюдается изменение цвета, в геле имеются взвешенные пузырьки, наблюдается уменьшение объема геля или его растрескивание. Микропробирки должны содержать надосадочную жидкость. Если наблюдается рассредоточенное каплеобразование в верхней части микропробирки, рекомендуется центрифугировать карты перед использованием. Если капли не оседают карту не использовать.

В настоящее время существует множество модификаций карт для определения групп крови перекрестным способом гелевой методикой. К каждой карте прилагается инструкция по использованию. Перед работой необходимо внимательно ознакомится с прилагаемой инструкцией.

2.5. Дополнительные сведения об особенностях выполнения ПМУ "Определение основных групп крови АВ0"

У некоторых категорий пациентов встречаются затруднения при определении групповой принадлежности. Индивидуальные особенности, характер затруднений и способы решения проблемы представлены в таблице 8.

Таблица 8

Категории пациентов, у которых встречаются затруднения при определении основных групп крови АВ0

N п/п	Категория пациентов	Индивидуальные особенности	Характер затруднения	Способ решения проблемы
1.	Новорожденные	Слабо выражена активность групповых антигенов А и В	Слабо выраженная агглютинация, вероятность пропустить реакцию агглютинации	Использовать прямой метод с цоликлонами анти-А, анти-В, анти-АВ или гелевую методику
		Отсутствие в сыворотке естественных групповых анти-А, анти-В антител	Отсутствие агглютинации во всех лунках со стандартными эритроцитами АВ0 при исследовании перекрестным методом
2.	Беременные	Ослабление активности групповых антигенов А и В	Слабо выраженная агглютинация, вероятность пропустить реакцию агглютинации	Использовать различные реактивы в перекрестном методе
3.	Больные с гематологическими или онкологическими заболеваниями и другими видами патологических состояний (ожоги, цирроз печени, сепсис и др.)	Ослабление активности или полная утрата групповых антигенов А и В вследствие приема цитостатиков, больших доз гормональных препаратов, радиотерапия, химиотерапия	Слабо выраженная агглютинация или ее отсутствие. Несовпадение результатов исследования, полученных со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками АВ0 (цоликлонами анти-А, анти-В, анти-АВ) и стандартными эритроцитами АВ0	Использовать различные реактивы в перекрестном методе. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию службы крови
		Наличие неспецифических алло- и/или аутоантител	Ложно-положительные реакции агглютинации	Использовать перекрестный метод или гелевую методику. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию службы крови
		Полиагглютинабельность исследуемого образца	Положительные результаты контроля	Использование гелевой методики. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию службы крови
4.	У различных категорий пациентов	Слабые варианты антигена А	Несовпадение результатов исследования, полученных со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками АВ0 (цоликлонами анти-А, анти-В, анти-АВ) и стандартными эритроцитами АВ0	Использовать цоликлон анти-А1 (лектин) или гелевую методику. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию службы крови
		Массивная гемотрансфузия или трансфузия несовместимых переносчиков газов крови по АВ0	Сомнительный результат исследования	Использовать гелевую методику. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию службы крови
		Гиперлипидемия	Возможна неспецифическая агглютинация	Исследуемые эритроциты отмыть. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию службы крови
		Внутривенное введение растворов декстранов или желатина	Ложноположительные реакции агглютинации и (или) положительный результат контроля (в т.ч. аутоконтроля)	Исследуемые эритроциты отмыть. При затруднении направить кровь больного в специализированную лабораторию

Образец крови больного направляется в специализированную лабораторию (в учреждения службы крови) в сопровождении направления (см. приложение 4).

2.6. Достигаемые результаты и их оценка

Выполнение требований ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" является профилактикой посттрансфузионных осложнений гемолитического типа и адекватному ведению АВ0-конфликтной беременности.

За период 2006-2008 гг. специалистами ГУЗ РСПК МЗ РТ было проверено 72 медицинские учреждения РТ. Из них:

ЛПУ (городские и центральные районные больницы) - 36,

Женские консультации - 14,

Поликлиники г. Казани - 22.

По результатам проверок выявлены следующие нарушения действующих нормативных документов:

- к проведению иммуногематологических исследований допускаются специалисты, не имеющие специальной подготовки по иммуногематологии на базе учреждений службы крови РТ или на специализированных циклах усовершенствования,

- при проведении иммуногематологических исследований специалисты не соблюдают требований соответствующих методик, имеют место неверное определение групповой принадлежности, невыявление слабых вариантов антигена А.

- в отдельных ЛПУ стационарного типа не проводится централизованное переопределение групповой и резус принадлежности крови пациентов. Повторное переопределение могло бы выявить ошибки при первичном исследовании и, как следствие, предотвратить несовместимые трансфузии.

За период 2006-2008 годы зарегистрирован один случай посттрансфузионного осложнения по причине переливания переносчиков газов крови несовместимых по системе АВ0.

2.7. Требования к режиму труда, отдыха, лечения, реабилитации, диетическим назначениям и ограничениям, к подготовке пациента в процессе выполнения Технологии

Дополнительные рекомендации, назначения и ограничения режима труда, отдыха, лечения или реабилитации не предусмотрены.

Диетические назначения и ограничения не предусмотрены.

Для получения достоверных результатов выполнения ПМУ "Определение основных групп крови АВ0" забор образца крови пациента производить до проведения инфузионной терапии растворами декстранов и желатины.

3. Графическое, схематические и табличное представление технологий выполнения ПМУ

3.1. Выполнение ПМУ "Определение основных групп крови АВ0".

Таблица 9

Краткие инструкции по проведению исследования группы крови АВ0 прямым методом при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0

Вид исследования	Диагностические стандарты для проведения исследования	Кровь пациента	Метод определения	Соотношение диагностический стандарт/ исследуемая кровь	Экспозиция	Добавление раствора NaCl 0,9%	Контроль	Чтение результатов
Определение группы крови АВ0	Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки АВ0	Из вены	На плоскости РПГА	10:1	5 минут	По 1-2 капли в каждую лунку с агглютинацией	Для подтверждения четвертой группы крови использовать стандартную изогемагглютинирующую сыворотку АВ0 (IV) группы	См. рисунок 22

"Рисунок 22. Определение основных групп крови АВ0 прямым методом при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0"

Таблица 10

Краткие инструкции по проведению исследования группы крови АВ0 прямым методом при помощи цоликлонов а-А, а-В, а-АВ

Вид исследования	Диагностические стандарты для проведения исследования	Кровь пациента	Метод определения	Соотношение диагностический стандарт/ исследуемая кровь	Экспозиция	Добавление раствора NaCl 0,9%	Контроль	Чтение результатов
Определение группы крови АВ0	Цоликлоны а-А, а-В, а-АВ	Из вены или капиллярная	На плоскости РПГА	От 10:1 до 10:3	3 минуты	Не добавлять	Для подтверждения четвертой группы крови АВ(IV) использовать раствор NaCl 0,9%	См. рисунок 23

"Рисунок 23. Определение основных групп крови АВ0 прямым методом при помощи цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ"

Таблица 11

Краткие инструкции по проведению исследования группы крови АВ0 перекрестным методом при помощи стандартных изогеамгглютинирующих сывороток АВ0 и стандартных эритроцитов АВ0

Вид исследования	Диагностические стандарты для проведения исследования	Кровь пациента	Метод определения	Соотношение диагностический стандарт/ исследуемая кровь	Экспозиция	Добавление раствора NaCl 0,9%	Контроль	Чтение результатов
Определение группы крови АВ0	Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки АВ0	Из вены	На плоскости РПГА	10:1	5 минут	По 1-2 капли в каждую лунку с агглютинацией	Для подтверждения четвертой группы крови использовать стандартную изогемагглютинирующую сыворотку АВ0 (IV) группы	См. рисунок 24
	Стандартные эритроциты АВ0			1:10

"Рис. 24. Определение основных групп крови АВ0 перекрестным методом при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток АВ0 и стандартных эритроцитов АВ0"

Таблица 12

Краткие инструкции по проведению исследования группы крови АВ0 перекрестным методом при помощи цоликлонов а-А, а-В, а-АВ и стандартных эритроцитов АВ0

Вид исследования	Диагностические стандарты для проведения исследования	Кровь пациента	Метод определения	Соотношение диагностический стандарт/ исследуемая кровь	Экспозиция	Добавление раствора NaCl 0,9%	Контроль	Чтение результатов
Определение группы крови АВ0	Цоликлоны а-А, а-В, а-АВ	Из вены	На плоскости РПГА	От 10:1 до 10:3	3 минуты	Не добавлять	Для подтверждения четвертой группы крови АВ(IV) использовать раствор NaCl 0,9%	См. рисунок 25
	Стандартные эритроциты АВ0			1:10	5 минут	По 1-2 капли в каждую лунку

"Рис. 25 Определение основных групп крови АВ0 перекрестным методом при помощи цоликлонов анти-А, анти-В, анти-АВ и стандартных эритроцитов АВ0"

Литература (нормативные документы)

1. Приказ МЗ РФ от 09.01.1998 N 2 "Об утверждении инструкций по иммуносерологии"

2. Приказ МЗ РФ от 25.11.2002 N 363 "Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови"

3. Приказ МЗ РТ от 13.05.1999 N 367 "О мерах по предупреждению осложнений при переливании компонентов, препаратов крови, кровезаменителей"

4. Приказ МЗ РТ от 05.08.2004 N 1135 "О совершенствовании работы по профилактике посттрансфузионных осложнений в учреждениях здравоохранения Республики Татарстан"

5. Приказ МЗ СССР N 700 от 23.05.1985 "О мерах по дальнейшему предупреждению осложнений при переливании крови, ее компонентов, препаратов и кровезаменителей"

6. Приказ МЗ РТ от 27.04.2004 N 691 "О совершенствовании преконцепционной, пренатальной и постнатальной профилактики иммуноконфликтной беременности в Республике Татарстан"

7. Приказ МЗ РФ от 25.12.1997 N 380 "О состоянии и мерах по совершенствованию лабораторного обеспечения диагностики и лечения пациентов в учреждениях здравоохранения Российской Федерации".

8. Приказ МЗ РТ от 16.07.2004 N 1047 "О порядке получения, учета и хранения компонентов крови"

9. Методические указания N 52001-109 МЗ РФ, РНИИ гематологии и трансфузиологии "Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ", Санкт-Петербург, 2002 г.

10. Методические рекомендации МЗ РФ "Алгоритмы исследования антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител в сложнодиагностируемых случаях", Санкт-Петербург, 2000 г.

11. Методическое письмо Минздравсоцразвития N 15-4/3118-09 от 10.10.2008 "О порядке проведения иммуногематологических исследований у беременных, рожениц, плодов и новорожденных".

12. Методические указания "Организация иммуносерологических исследований (определение группы крови и резус фактора) больным в лабораториях лечебно-профилактических учреждений г. Самары и Самарской области".

13. Инструкция о порядке проведения иммуногематологических исследований пациентов в учреждениях здравоохранения Санкт-Петербурга, 2005 г.

14. Инструкции по использованию гелевой диагностической системы.

15. "Групповые антигены эритроцитов. Концепция совместимости" С.И. Донсков, В.А. Мороков, И.В. Дубинин, Москва, 2008 г.

16. "Группы крови человека. Основы иммуногематологии" Н.В. Минеева, Санкт-Петербург, 2004 г.

17. Пособие для врачей "Посттрансфузионные гемолитические осложнения (причины, изосерологическая диагностика и профилактика)" утвержденные МЗ РФ. Санкт-Петербург, 1997 г.