Приложение N 1. Алгоритм взятия, хранения и транспортировки клинического материала для лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа

Приложение N 1
к приказу Минздрава РТ
от 30 ноября 2011 г. N 1572

Алгоритм взятия, хранения и транспортировки клинического материала для лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа

Общие положения

Сбор клинического материала проводится в медицинских учреждениях (амбулаторно-поликлинических, стационарных) непосредственно после изоляции больного. Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность высокопатогенными штаммами вируса гриппа.

Материал отбирается стерильными инструментами в стерильные пластиковые емкости (контейнеры с завинчивающимися крышками, одноразовые флаконы).

Процедуры по отбору клинического материала осуществляются в средствах индивидуальной защиты органов дыхания (респиратор), защитных очках (или щитках для защиты лица), двойных резиновых перчатках.

Доставка клинического и секционного материала в лабораторию производится транспортом лечебно-профилактических учреждений.

Для исследования от больных с подозрением на заболевание, вызванное высокопатогенными штаммами вируса гриппа забирают следующие виды клинического материала: мазки из полости носа и ротоглотки (для первичного исследования материала методом ПЦР) и носоглоточное отделяемое (для выделения вируса гриппа и первичного исследования материала методом ПЦР).

Целесообразно также включать в исследование аспираты из трахеи, бронхоальвеолярный лаваж и биоптаты легких при возможности их получения.

Образцы клинического материала должны быть собраны в течение 3 суток после появления клинических признаков у пациентов с респираторными заболеваниями тяжелого течения неясной этиологии при наличии, как минимум, двух и более из перечисленных симптомов:

- фебрильная лихорадка, плохо поддающаяся контролю жаропонижающими препаратами;

- скудные катаральные явления;

- дыхательная недостаточность (гипоксемия, выраженное тахипное);

- признаки острой пневмонии при рентгенографическом исследовании органов грудной клетки;

в комбинации хотя бы с одним из эпидемиологических признаков в период 1-7 дней перед появлением клинических симптомов заболевания:

- тесный контакт с лицом, являющимся вероятным или подтвержденным случаем заболевания, вызванного высокопатогенным штаммом вируса гриппа;

- манипуляции с образцами клинического материала (от животных или людей), подозрительными на зараженность высокопатогенным штаммом вируса гриппа.

Сбор материала

1. Мазки из ротоглотки берутся после предварительного полоскания полости рта водой вращательными движениями сухими стерильными зондами с ватными тампонами с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки глотки.

После взятия материала тампон (рабочая область зонда с ватным тампоном) помещается в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды. Конец зонда отламывается или отрезается с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирка с раствором и рабочей областью зонда закрывается.

2. Мазки из полости носа (слизь) берутся сухими стерильными зондами с ватными тампонами. Зонд вводится легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускается книзу, вводится в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делается вращательное движение и зонд удаляется вдоль наружной стенки носа.

После взятия материала тампон (рабочая область зонда с ватным тампоном) помещается в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды. Конец зонда отламывается или отрезается с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Тампоны с материалом из правой и левой ноздри помещают в одну пробирку. Пробирка с раствором и рабочими областями зондов закрывается.

3. Носоглоточное отделяемое собирается натощак после взятия мазков из полости носа двумя способами.

Способ 1: Больной в три приема прополаскивает горло 10-15 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Смыв собирают в одноразовые полипропиленовые флаконы с завинчивающимися крышками объемом 50 мл. Ватными тампонами, зажатыми пинцетом, протирают заднюю стенку глотки и носовые ходы. Тампоны опускают во флакон со смывом.

Способ 2: Сухим или слегка увлажненным 0,9% раствором натрия хлорида тампоном, зажатым пинцетом, протирают заднюю стенку глотки и опускают тампон в пробирку с 5 мл транспортной среды. Процедуру повторяют 2-3 раза. Затем тщательно протирают носовые ходы ватными тампонами и опускают их в ту же пробирку. Пробирку закрывают.

4. Смывы из полости носа производят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. В оба носовых хода поочередно с помощью шприца вводят по 3-5 мл теплого 0,9% раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через стерильную воронку в одну стерильную пробирку.

5. Смывы из ротоглотки собирают следующим образом. Перед сбором материала необходимо предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 сек.) 8-10 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через стерильную воронку в стерильную пробирку.

6. В качестве секционного материала используют аутоптаты легких, трахеи, сегментарных бронхов и селезенки. Секционный материал собирается в одноразовые полипропиленовые флаконы объемом 50 мл с завинчивающимися крышками.

Условия хранения материала: при температуре от 2 до 8°С в течение 3 суток. Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала. Температура хранения -20°С не допускается.

Обеззараживание рук, одежды, помещения

После отбора клинического или секционного материала перчатки обрабатываются растворами дезинфицирующих средств, руки после снятия перчаток обрабатываются кожными антисептиками.

Обеззараживание поверхностей помещения (пол, стены, двери), оборудования, рабочих столов и т.д. - двукратным протиранием с интервалом 15 мин. 6% раствором перекиси водорода или 3% раствором хлорамина (экспозиция 120 мин.), либо любым дезинфицирующим средством, обладающим вирулицидной активностью, с последующей УФ обработкой в течение 60 мин.

Запрещено одновременное использование 6% раствора перекиси водорода и 3% раствора хлорамина в пределах одного помещения в связи с опасностью взрыва при смешивании этих растворов.

Обеззараживание защитной одежды осуществляется кипячением в 2% растворе соды в течение 30 мин. с момента закипания или замачиванием на 30 мин. при температуре 50°С в 3% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего средства.

Обеззараживание перчаток осуществляют замачиванием на 60 мин. в 6% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего средства или в 3% растворе хлорамина.

Обеззараживание инструментария проводится методом автоклавирования в течение 45 мин. - давление 2,0 кГс/см2 (0,2 МПа), температура 132+-2°С.

Упаковывание и транспортирование клинического или секционного материала

Все материалы, направляемые в лабораторию, должны быть герметично упакованы:

1. в транспортную емкость (пластиковые пробирки или флаконы с плотно закрывающимися крышками). Верхний конец транспортной емкости и крышку герметизируют пластификаторами (парафин и т.д.), емкость маркируют;

2. затем в плотный полиэтиленовый пакет с гигроскопичным материалом в количестве, достаточном для абсорбции всего объема образца в случае его утечки. Пакет герметично заклеивают или запаивают.

3. Бланки направлений вкладывают в отдельный полиэтиленовый пакет.

4. Пакеты с образцами от одного пациента и направлениями упаковывают во второй плотный полиэтиленовый пакет. Не допускается упаковывание материалов от разных пациентов в один пакет.

Затем герметично закрытые полиэтиленовые пакеты с образцами помещают в термоизолирующий плотно закрывающийся контейнер (термос, сумка-холодильник), приспособленный для транспортирования биологических материалов. В термоконтейнер помещают охлаждающие элементы, к наружной стенке прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, пункта назначения.

Транспортирование клинического материала в лаборатории осуществляется нарочным, информированным о правилах доставки биологического материала в соответствии с действующими нормативно-методическими документами.

Условия транспортирования материала: в термоконтейнере при температуре от 0 до 4°С в течение 3 суток. Температура транспортирования -20°С допускается только при однократном замораживании материала во время транспортирования, не более 4 дней.

Транспортная среда должна соответствовать используемым в лаборатории тест-системам.