Методические указания по определению остаточных количеств этилентиомочевины в картофеле, огурцах, томатах, томатном соке, луке, винограде и виноградном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии МУК 4.1.1954-05 (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 18 января 2005 г.)

Дата введения: 18 апреля 2005 г.

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации этилентиомочевины в картофеле, огурцах, томатах и томатном соке в диапазоне 0,002-0,04 мг/кг, луке, винограде и виноградном соке в диапазоне 0,004-0,04 мг/кг.

Этилентиомочевина - продукт метаболизма пестицида класса этиленбисдитиокарбаматов манкоцеба действующего вещества препарата МЕТАКСИЛ, СП (640 г/кг манкоцеба + 80 г/кг металаксила), производитель ЗАО Фирма "Август" (Россия)

Этилентиомочевина (ЭТМ) - имидазолидин-2-тион (IUPAC)

Мол. масса 102,17

Белое кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления: 203-204°С. Практически нерастворима в ацетоне, диэтиловом эфире, хлороформе, бензоле, керосине, умеренно растворима в метаноле, этаноле, уксусной кислоте, этиленгликоле, пиридине. Растворимость в воде - 20 (25°С); 90 (60°С); 440 (90°С).

Острая пероральная токсичность для крыс - 550-1832 мг/кг; для мышей 2400-4000 мг/кг.

Гигиенические нормативы:

ДСД - 0,001 мг/кг массы тела.

МДУ во всех растительных и пищевых продуктах - 0,02 мг/кг

Область применения препарата

Препарат МЕТАКСИЛ, СП (640 г/кг манкоцеба + 80 г/кг металаксила) рекомендуется в качестве фунгицида на виноградной лозе; картофеле, огурцах, томатах открытого грунта; луке.

1. Метрологические характеристики метода

Метрологические характеристики метода представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анализируемый объект	Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20
	Предел обнаружения, мг/кг	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, S, %	Доверительный интервал среднего результата, %
Лук (репка)	0,004	0,004-0,04	90,8	1,3	3,7
Виноград (ягоды)	0,004	0,004-0,04	74,7	1,4	3,9
Виноградный сок	0,004	0,004-0,04	83,5	1,6	4,5
Огурцы	0,002*	0,002-0,04	77,0	1,3	2,8
Томаты, томатный сок	0,002*	0,002-0,04	76,0	1,4	3,0
Картофель	0,002*	0,002-0,04	73,5	1,6	3,3

______________________________

* - при соотношении сигнал/шум равном 5.

Таблица 2

Полнота извлечения ЭТМ из лука, винограда и виноградного сока, огурцов, томатов (томатного сока), картофеля (5 повторностей для каждой концентрации)

Среда	Внесено ЭТМ мг/кг	Обнаружено ЭТМ мг/кг	Полнота извлечения, %
Лук (репка)	0,004		91,2
	0,008		89,8
	0,02		90,1
	0,04		92
Виноград (ягоды)	0,004		76,4
	0,008		74,8
	0,02		74,3
	0,04		73,3
Виноградный сок	0,004		86,9
	0,008		85,3
	0,02		80,5
	0,04		81,2
Огурцы	0,002		73,5
	0,01		76,4
	0,02		74,3
	0,04		73,3
Томаты (томатный сок)	0,002		73,2
	0,01		75,4
	0,02		77,4
	0,04		78,0
Картофель	0,004		70,3
	0,01		73,6
	0,02		75,0
	0,04		75,2

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции из анализируемых проб метанолом, очистки экстракта на колонке с оксидом алюминия.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях определения метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания лука, винограда, огурцов, томатов, картофеля.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны, оборудованный термостатом колонок
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104
Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г	ГОСТ 7328
Меры массы	ГОСТ 7328
Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2, 2-500-2 и 2-1000-2	ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10	ГОСТ 29227
Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10, 25, 50, 250 и 1000	ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Этилентиомочевина, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,0% (ВНИИХСЗР, Россия) или другого производителя
Алюминий оксид для хроматографии, нейтральный (фирмы "Реанал", Венгрия)
Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над
Кальция хлорид, хч	ГОСТ 4161
Метиловый спирт (метанол), хч	ГОСТ 6995
Метилен хлористый (дихлорметан), хч	ГОСТ 12794

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с	ТУ 64-1-2851-78
Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария) или FINNSONIC OY (Финляндия)
Бумажные фильтры "белая лента", обеззоленные	ТУ 6-09-2678-77
Воронка Бюхнера	ГОСТ 25336
Воронки с фильтром Шота N 3	ГОСТ 8682
Воронки химические конусные диаметром 30-37 и 60 мм	ГОСТ 25336
Гомогенизатор
Груша резиновая
Источник чистого сжатого воздуха (баллон или безмасляный компрессор) или любого инертного газа
Колба Бунзена	ГОСТ 25336
Колбы плоскодонные с пришлифованными пробками вместимостью 200-250	ГОСТ 9737
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100, 150 и 250	ГОСТ 25336
Колонка стеклянная, внутренним диаметром 13-15 мм, высотой 30-40 см
Мелкая терка для овощей
Мембранные фильтры капроновые или фторопластовые, диаметром 47 мм, размер пор 0,45 мкм	ТУ 6-55-221-1323-93
Мешалка магнитная MR 3001 фирмы Heidolph
Набор для фильтрации проб для ВЭЖХ фирмы "MILLIPOR" с капроновыми мембранами, размер пор 0,2 мкм
Набор для фильтрации растворителей через мембрану
Насос водоструйный	ГОСТ 10696
Переход с боковым отводом	ГОСТ 8682
Прибор для получения особо чистой (деионизованной) воды "Водолей"
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi (Швейцария) или Laborota 4000 фирмы "Heidolph" (Германия)	ТУ 25-11-917-74
Стаканы химические, вместимостью 50 и 100	ГОСТ 25336
Стекловата
Стеклянные палочки
Трубка хлоркальциевая	ГОСТ 25336
Установка для перегонки растворителей
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Zorbax SB С18, зернением 5 мкм
Шкаф сушильный ШС-1/80 СПУ ПГИЖ 6819454.006	ТУ 3443-010-00141798-01
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50-100

Допускается применение другого оборудования и хроматографических колонок с аналогичными техническими характеристиками, обеспечивающими аналогичное разделение

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1005).

4.2. При выполнении измерений с использованием газового и жидкостного хроматографов соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят согласно ГОСТу 15150 при температуре воздуха , атмосферном давлении 630-800 мм рт. ст. и относительной влажности не более 80%.

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление градуировочных растворов, построение градуировочной характеристики, подготовка колонки для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонке с оксидом алюминия.

7.1. Подготовка органических растворителей

Метилен хлористый последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, далее водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом. Хранят над безводным сульфатом натрия.

Метанол подвергают перегонке при атмосферном давлении с дефлегматором.

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 помещают 990 бидистиллированной воды, добавляют 10 метанола, перемешивают, фильтруют и дегазируют

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой для ВЭЖХ со скоростью подачи растворителя 0,3 (анализ по п. 9.3.1) или 1 (анализ по п. 9.3.2) до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление растворов для градуировки

7.4.1. Исследование проб лука, винограда и виноградного сока

7.4.1.1. Исходный раствор для градуировки (концентрация 1 )

В мерную колбу вместимостью 100 помещают 0,1 г ЭТМ, доводят до метки бидистиллированной водой, тщательно перемешивают.

Исходный раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев в плотно закрытой посуде.

Растворы N 1-6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.

7.4.1.2. Раствор N 1 для градуировки (концентрация 10 )

В мерную колбу вместимостью 100 помещают 1 исходного раствора для градуировки с концентрацией 1 , доводят до метки бидистиллированной водой, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения ЭТМ из исследуемых образцов.

7.4.1.3. Раствор N 2 для градуировки (концентрация 1 )

В мерную колбу вместимостью 100 помещают 10 раствора N 1 для градуировки с концентрацией 10 , доводят до метки бидистиллированной водой, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.4.1.4. Рабочие растворы NN 3-6 для градуировки (соответствуют концентрациям 0,01-0,1 ).

В 4 мерные колбы вместимостью 100 помещают с помощью пипетки по 1; 2; 5 и 10 раствора N 2 с концентрацией 1 (п. 7.4.1.3), доводят до метки бидистиллированной водой, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы ЭТМ NN 3-6 с концентрациями 0,01; 0,02; 0,05 и 0,1 , соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике в течение недели.

7.4.2. Исследование проб картофеля, огурцов, томатов и томатного сока

7.4.2.1. Исходный раствор для градуировки (концентрация 100 )

В мерную колбу вместимостью 100 помещают 0,01 г ЭТМ, доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают.

Исходный раствор хранится в морозильной камере при -12°С не более 15 дней.

7.4.2.2. Раствор N 1а для градуировки (концентрация 5 )

В мерную колбу вместимостью 100 помещают 5 исходного раствора для градуировки с концентрацией 100 (п. 7.4.2.1), доводят до метки подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 7.2).

7.4.2.3. Рабочие растворы NN 2а-5а дня градуировки (соответствуют концентрациям 0,025-0,5 ).

В 4 мерные колбы вместимостью 100 помещают с помощью пипетки по 0,5; 2,5; 5 и 10 раствора N 1 с концентрацией 5 (п. 7.4.2.2), доводят до метки подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 7.2), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы ЭТМ NN 2а-5а с концентрациями 0,025; 0,125; 0,25 и 0,5 , соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более суток

7.5. Построение градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации ЭТМ в растворе , устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки NN 3-6 или 2а-5а.

В инжектор хроматографа вводят по 20 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3.1. или 9.3.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

7.6. Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта

Оксид алюминия, помещенный на воронку Бюхнера, промывают трижды порциями метанола, равными объему сорбента, сушат разряжением, создаваемым водоструйным насосом, затем активируют в сушильном шкафу при 140-150°С в течение 15-ти часов, охлаждают в эксикаторе.

При исследовании проб лука, винограда и виноградного сока нижнюю часть стеклянной колонки длиной 35-40 см, внутренним диаметром 13-15 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 20 г оксида алюминия в 30-35 хлористого метилена. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. После этого колонка готова к работе.

При исследовании проб картофеля, огурцов, томатов и томатного сока используют суспензию 7,5 г оксида алюминия в 20 дихлорметана, а также колонку длиной 30 см.

7.7. Проверка хроматографического поведения ЭТМ на колонке с оксидом алюминия

7.7.1. Лук, виноград и виноградный сок

В круглодонную колбу вместимостью 10 помещают 0,5 раствора N 2 для градуировки (п. 7.4.1.3), добавляют 8 метанола, перемешивают и наносят на колонку, подготовленную по п. 7.6. Промывают колонку 100 смеси хлористый метилен-метанол (19:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек. Фракционно (по 10 ) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 5-ти бидистиллированной воды, анализируют на содержание ЭТМ по п. 9.3.1.

7.7.2. Картофель, огурцов, томатов и томатный сок

В круглодонную колбу вместимостью 10 помещают 0,05 исходного раствора с концентрацией ЭТМ 100 в метаноле (п. 7.4.2.1), удаляют растворитель слабым потоком чистого сжатого воздуха или инертного газа, остаток количественно переносят тремя порциями (1,5 + 1,5 + 2 ) водного метанола (150 мг воды в 5 метанола) на колонку, подготовленную по п. 7.6. Промывают колонку 90 смеси хлористый метилен-метанол (19:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек. Фракционно (по 6 ) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1-2-х подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 7.2), анализируют на содержание ЭТМ по п. 9.3.2.

Фракции, содержащие ЭТМ, объединяют и вновь анализируют.

Рассчитывают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Примечание: Проверку хроматографического поведения ЭТМ следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

8. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 г., N 2051-79.

Отобранные пробы лука, винограда и виноградного сока анализируют в день отбора или хранят при 4°С в течение 10-ти дней, срок хранения образцов огурцов, томатов, картофеля - не более недели.

Для длительного хранения пробы замораживают и хранят при температуре -18°С. Непосредственно перед анализом образцы лука и винограда измельчают на гомогенизаторе, огурцов, томатов, картофеля - при помощи терки для овощей.

9. Выполнение определения

9.1. Экстракция

9.1.1. Лук, виноград, виноградный сок

Образец измельченного лука, ягод винограда или виноградного сока массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 200-250 , вносят 100 метанола. Колбы с образцами лука и ягод винограда встряхивают на механическом встряхивателе в течение 45-ти минут. Образец виноградного сока помещают на 2 часа в холодильник (4-6°С).

Затем растворы фильтруют на воронке Бюхнера через двойной бумажный фильтр "красная лента" под вакуумом. Осадок на фильтре промывают дважды по 20 метанола. Экстракт и промывку переносят в мерный цилиндр вместимостью 200 с пришлифованной пробкой, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/2 его часть (эквивалентную 10 г образца) переносят в круглодонную колбу и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45°С до получения малоподвижной вязкой массы. Колбу с остатком отсоединяют от роторного испарителя. Оставшиеся капли конденсата выше уровня исходного фильтрата (около шлифа грушевидной колбы) удаляют с помощью фильтровальной бумаги. Для более полного освобождения от летучих продуктов содержимое колбы продувают слабой струей сжатого воздуха в течение 10-15 мин.

Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.1.

9.1.2. Картофель, огурцы, томаты, томатный сок

Образец измельченных огурцов, картофеля, томатов или томатного сока массой 25 г помещают в коническую колбу вместимостью 200-250 , вносят 50 метанола. Содержимое колбы интенсивно перемешивают в течение 30-ти минут на магнитной мешалке. Полученный экстракт переносят на фильтр Шота, присоединенный через переходник к грушевидной колбе вместимостью 200 , и фильтруют с помощью водоструйного насоса. Осадок растительного материала на фильтре промывают 25 метанола, фильтруя промывной раствор в ту же грушевидную колбу. Фильтрат упаривают при температуре не выше 60°С до получения малоподвижной (томаты, томатный сок) или практически не текучей (огурцы, картофель) вязкой массы. Колбу с остатком отсоединяют от роторного испарителя. Оставшиеся капли конденсата выше уровня исходного фильтрата (около шлифа грушевидной колбы) удаляют с помощью фильтровальной бумаги. Для более полного освобождения от летучих продуктов содержимое колбы продувают слабой струей сжатого воздуха или инертного газа в течение 20-30 мин.

9.2. Очистка экстракта

9.2.1. Лук, виноград, виноградный сок

Высушенный экстракт, полученный по п. 9.1.1, растворяют при перемешивании и температуре 38-42°С в 2 метанола и 0,5 бидистиллированной воды, помещая колбу на ультразвуковую баню. Затем в колбу вносят порциями по 2 еще 6 метанола. После прибавления последней порции колбу закрывают пришлифованной пробкой и помещают на ультразвуковую баню на 2-3 мин.

Полученный водно-метанольный раствор переносят в подготовленную по п. 7.3 колонку, дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. ЭТМ элюируют с колонки 70 смеси хлористый метилен-метанол (19:1, по объему), собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 . Раствор упаривают при температуре не выше 45°С почти досуха, затем продувают слабой струей сжатого воздуха досуха. Остаток растворяют в 4 бидистиллированной воды, помещая колбу на ультразвуковую баню. Раствор фильтруют при помощи набора для фильтрации проб (или через плотный тампон из стекловаты, помещенный в конусную воронку) и анализируют на содержание ЭТМ по п.п. 9.3.

9.2.2. Огурцы, томаты, томатный сок, картофель

Высушенный экстракт, полученный по п. 9.1.2, растворяют при медленном перемешивании и температуре 38-42°С в 1 метанола и строго определенного количества бидистиллированной воды, помещая колбу на ультразвуковую баню. Количество добавляемой воды оставляет 145, 150 и 350 , соответственно для огурцов, томатов (томатного сока) и картофеля. Операция растворения высушенного экстракта занимает достаточно длительное время (от одного до 2-х часов). Затем в колбу вносят порциями по 1 еще 4 метанола. После прибавления каждой порции метанола содержимое колбы осторожно перемешивают, после прибавления последней порции колбу закрывают пришлифованной пробкой и помещают на ультразвуковую баню на 10 мин.

Полученный водно-метанольный раствор переносят в подготовленную по п. 7.3 колонку, дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. ЭТМ элюируют с колонки 60 смеси хлористый метилен-метанол (19:1, по объему), собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 100 . Раствор упаривают при температуре не выше 50°С почти досуха, затем продувают слабой струей сжатого воздуха или инертного газа досуха. Остаток растворяют в 2 бидистиллированной воды, помещая колбу на ультразвуковую баню. Раствор фильтруют при помощи набора для фильтрации проб (или через плотный тампон из стекловаты, помещенный в конусную воронку) и анализируют на содержание ЭТМ по п.п. 9.3.

9.3. Условия хроматографирования

9.3.1. Лук, виноград, виноградный сок

Хроматограф жидкостной с ультрафиолетовым детектором (Perkin-Elmer, США)

Колонка хроматографическая стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм

Температура колонки: комнатная

Скорость потока элюента: 0,3

Рабочая длина волны: 233 нм

Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 мкл

Подвижная фаза: вода-метанол (99:1, по объему)

Ориентировочное время выхода ЭТМ: 4,6-4,9 мин

Линейный диапазон детектирования 0,2-2,0 нг

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы с концентрацией 0,1 , разбавляют бидистиллированной водой.

9.3.2. Огурцы, томаты, томатный сок, картофель

Хроматограф жидкостной с ультрафиолетовым детектором, модель 1100 (Agilent Technologies, США)

Колонка хроматографическая стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Zorbax SB С18, зернением 5 мкм

Температура термостата колонки: 25°С

Скорость потока элюента: 1

Рабочая длина волны: 233 нм

Чувствительность: 0,007 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 50 мкл

Подвижная фаза: вода - метанол (99:1, по объему)

Ориентировочное время выхода ЭТМ: 4,5 мин

Линейный диапазон детектирования 0,5-10 нг

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы с концентрацией 0,5 , разбавляют подвижной фазой (п. 7.2).

10. Обработка результатов анализа

Содержание ЭТМ в пробе рассчитывают по формуле:

, где

X - содержание ЭТМ в пробе, мг/кг;

А - концентрация ЭТМ, найденная по градуировочному графику, ;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, ;

m - масса анализируемого образца, г.

K - коэффициент пересчета, учитывающий объем экстрактов проб, используемый для анализа, равный для лука, винограда и виноградного сока - 2, для огурцов, томатов, томатного сока, картофеля - 1.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

12. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана); Братина И.В. (Федеральный центр Госсанэпиднадзора) - лук, виноград, виноградный сок;

Белов М.Ю., Кулешова О.Ю. (ЗАО Фирма "Август") - огурцы, томаты, томатный сок, картофель.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Г.Г. Онищенко