Приложение А (справочное). Другие бульоны для обогащения

Приложение А
(справочное)

Другие бульоны для обогащения

А.1 Жидкая лактозная среда с нейтрализирующими и диспергирующими агентами

Эта среда содержит ингредиенты:

- которые нейтрализуют ингибирующие вещества, присутствующие в пробе, - летицин и полисорбат 80),

- и диспергирующий агент октоксинол 9.

А.1.1 Состав

- Мясной экстракт - 3,0 г;

- панкреатический гидролизат желатина - 5,0 г;

- лактоза - 5,0 г;

- яичный лецитин - 1,0 г;

- полисорбат 80 - 5,0 г;

- октоксинол 9 - 1,0 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.1.2 Приготовление

Растворяют последовательно компоненты (полисорбат 80, октоксинол 9 и яичный лецитин) в кипящей воде до полного их растворения. Растворяют остальные компоненты, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации охлаждают среду как можно быстрее. рН должен быть равен 6,9  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.2 Жидкая лактозная среда

А.2.1 Состав

- Мясной экстракт - 3,0 г;

- панкреатический гидролизат желатина - 5,0 г;

- лактоза - 5,0 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.2.2 Приготовление

Растворяют компоненты в воде. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации охлаждают среду как можно быстрее, рН должен быть равен 6,9  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.3 Среда с соево-казеиновым гидролизатом, летицином и полисорбатом 80 (бульон SCDLP 80)

А.3.1 Состав

- Казеиновый пептон - 17,0 г;

- соевый пептон - 3,0 г;

- хлорид натрия - 5,0 г;

- калий фосфорнокислый двузамещенный - 2,5 г;

- глюкоза - 2,5 г;

- лецитин - 1,0 г;

- полисорбат 80 - 7,0 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.3.2 Приготовление

Растворяют все компоненты или готовую сухую среду последовательно в кипящей воде до их полного растворения. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,2  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.4 Нейтрализирующий бульон D/E (нейтрализирующий бульон Dey/Engley) [7]

А.4.1 Состав

- Глюкоза - 10,0 г;

- соевый лецитин - 7,0 г;

- пятиводный тиосульфат натрия - 6,0 г;

- полисорбат 80 - 5,0 г;

- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;

- бисульфит натрия - 2,5 г;

- дрожжевой экстракт - 2,5 г;

- тиогликолят натрия - 1,0 г;

- бромкрезоловый пурпурный - 0,02 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.4.2 Приготовление

Растворяют все компоненты или готовую сухую среду последовательно в кипящей воде до полного растворения. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,6  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.5 Модифицированный летиновый (Letheen) бульон

А.5.1 Состав

- Пепсиновый гидролизат мяса - 20,0 г;

- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;

- говяжий экстракт - 5,0 г;

- дрожжевой экстракт - 2,0 г;

- лецитин - 0,7 г;

- полисорбат 80 - 5,0 г;

- хлорид натрия - 5,0 г;

- бисульфит натрия - 0,1 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.5.2 Приготовление

Последовательно растворяют полисорбат 80 и летицин в кипящей воде до полного их растворения. Растворяют остальные компоненты, перемешивая при нагревании. Перемешивают осторожно во избежание пенообразования. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,2  0,2 при измерении при комнатной температуре.