Приложение А (справочное). Другие питательные среды

Приложение А
(справочное)

Другие питательные среды

А.1 Другие бульоны для обогащения

А.1.1 Жидкая питательная среда с соево-казеиновым гидролизатом

А.1.1.1 Состав

- Панкреатический гидролизат казеина - 15,0 г;

- папаиновый гидролизат соевой муки - 5,0 г;

- хлорид натрия - 5,0 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.1.1.2 Приготовление

Растворяют последовательно все компоненты (или готовую сухую среду) в воде, нагревая при необходимости. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.

После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,3  0,2 при измерении при комнатной температуре.

Разливают среду в подходящую лабораторную посуду.

А.1.2 Нейтрализующий бульон D/E (нейтрализующий бульон Dey/Engley) [7]

А.1.2.1 Состав

- Глюкоза - 10,0 г;

- соевый лецитин - 7,0 г;

- пятиводный тиосульфат натрия - 6,0 г;

- полисорбат 80 - 5,0 г;

- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;

- бисульфит натрия - 2,5 г;

- дрожжевой экстракт - 2,5 г;

- тиогликолят натрия - 1,0 г;

- краситель бромкрезоловый пурпурный - 0,02 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.1.2.2 Приготовление

Растворяют последовательно все компоненты или готовую сухую среду в кипящей воде до полного растворения. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.

После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,6  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.1.3 Модифицированный летиновый (Letheen) бульон

А.1.3.1 Состав

- Ферментативный гидролизат мяса - 20,0 г;

- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;

- говяжий экстракт - 5,0 г;

- дрожжевой экстракт - 2,0 г;

- лецитин - 0,7 г;

- полисорбат 80 - 5,0 г;

- хлорид натрия - 5,0 г;

- бисульфит натрия - 0,1 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.1.3.2 Приготовление

Растворяют последовательно в кипящей воде полисорбат 80 и лецитин до их полного растворения. Растворяют другие компоненты, перемешивая при нагревании. Перемешивают осторожно во избежание пенообразования. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.

После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,2  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.2 Другая селективная агаризованная среда

А.2.1 Солевой агар с маннитом (агар Chapman)

А.2.1.1 Состав

- Говяжий экстракт - 1,0 г;

- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;

- панкреатический гидролизат мяса - 5,0 г;

- хлорид натрия - 75,0 г;

- D-маннитол - 10,0 г;

- агар - 15,0 г;

- феноловый красный - 0,025 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.2.1.2 Приготовление

Смешивают все компоненты, нагревают при интенсивном перемешивании и кипятят в течение 1 мин для растворения. Разливают по флаконам и стерилизуют.

После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,4  0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.2.2 Агаризованная среда Фогеля-Джонсона (Vogel-Johnson)

А.2.2.1 Состав

- Панкреатический гидролизат казеина - 10,0 г;

- дрожжевой экстракт - 5,0 г;

- маннитол - 10,0 г;

- однозамещенный фосфат калия - 5,0 г;

- хлорид лития - 5,0 г;

- глицин - 10,0 г;

- агар - 16,0 г;

- феноловый красный - 0,025 г;

- вода - 1 000 см ³.

А.2.2.2 Приготовление

Кипятят раствор, состоящий из растворенных компонентов, в течение 1 мин. Стерилизуют, охлаждают до температуры 45 °С - 50 °С и добавляют 20 см ³ стерильного раствора теллурита калия.

После стерилизации и охлаждения рН должен быть равен 7,2  0,2 при измерении при комнатной температуре.