Дата введения: 30 июня 2003 г.
1. Вводная часть
Название препарата: Битал АМ, Синбетан Прогресс ОФ. Бифор Прогресс.
Фирма-производитель: ФМРус, РосАгроХим, АгроЭксперт групп.
Действующие вещества: десмедифам и фенмедифам.
1. Десмедифам (ISO).
3-этоксикарбониламинофенил фенилкарбамат (IUPAC).
Структурная формула:
Эмпирическая формула: .
Молекулярная масса: 300,3.
Химически чистое вещество: бесцветные кристаллы. Температура плавления: 120°С.
Растворимость (г/1000 мл) при 20°С: в воде - 0,007, ацетоне - 400, метаноле - 180, этилацетате - 149, хлороформе - 80, дихлорметане - 17,8, бензоле - 1,6, гексане - 0,5.
2. Фенмедифам (ISО).
3-метоксикарбониламинофенил - 3`метилкар-банилат (IUРАС).
Структурная формула:
Эмпирическая формула: .
Молекулярная масса: 300,3.
Химически чистое вещество: бесцветные кристаллы. Температура плавления: 140-144°С.
Растворимость (г/1000 мл) при 20°С: в воде - 0,006, ацетоне - 200, метаноле - 50, этилацетате - 56,3, хлороформе - 20, дихлорметане - 16,7, бензоле - 2,5, гексане - 0,5.
Гигиенические нормативы: ВМДУ десмедифама в свекле сахарной, столовой и кормовой - 0,1 мг/кг; МДУ фенмедифама в свекле сахарной, столовой и кормовой 0.2 мг/кг.
Область применения препарата: послевсходовый гербицид для борьбы с однолетними двудольными и некоторыми злаковыми сорными растениями на свекле.
2. Метод определения десмедифама и фенмедифама в корнеплодах и ботве сахарной, столовой и кормовой свеклы
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении остаточных количеств десмедифама и фенмедифама из анализируемого объекта ацетоном, проведении очистки экстракта перераспределением в системе растворителей, получении производных путем гидролитического расщепления десмедифама в анилин, а фенмедифама в метиланилин, их бромировании и газохроматографическом анализе с использованием капиллярной колонки и детектора электронного захвата (ДЭЗ).
2.1.2. Избирательность метода
Метод специфичен в присутствии других применяемых пестицидов. Проведение очистки экстрактов, а также использование селективного детектора и капиллярной колонки позволяет устранять влияние на анализ коэкстрактивных веществ.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода
Метрологические параметры метода представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
Метрологические параметры, р = 0,95, n = 6 | |||||
Анализируемый объект |
Предел обнаружения, мг/кг |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Среднее значение определения, % |
Стандартное отклонение, % |
Доверительный интервал среднего результата, % |
Корнеплоды |
0,02 |
0,02-0,16 |
82,7 |
6,1 |
|
Ботва |
0,02 |
0,02-0,16 |
85,3 |
4,7 |
Таблица 2
Полнота определения десмедифама и фенмедифама в корнеплодах и ботве свеклы (n = 6 для каждой концентрации)
Анализируемый объект |
Внесено, мг/кг |
Найдено, мг/кг |
Стандартное отклонение, |
Полнота определения, % |
Корнеплоды свеклы |
0,020 |
0,015 |
0,0015 (7,3%) |
77,0 |
0,040 |
0,032 |
0,0026 (6,4%) |
80,8 |
|
0,080 |
0,068 |
0,0045 (5,6%) |
85,0 |
|
0,160 |
0,141 |
0,0082 (5,1%) |
88,2 |
|
Ботва свеклы |
0,020 |
0,016 |
0,0011 (5,4%) |
80,7 |
0,040 |
0,033 |
0,0019 (4,9%) |
83,3 |
|
0,080 |
0,069 |
0,0036 (4,5%) |
86,7 |
|
0,160 |
0,145 |
0,0064 (4,0%) |
90,5 |
2.2. Реактивы, материалы
Аналитические стандарты десмедифама и фенмедифама.
Азот газообразный высокой чистоты, ТУ 301-07-25-89.
Ацетон, осч, ТУ 2633-004-11291058-94.
Вода дистиллированная и перегнанная над и щелочью.
Калий бромистый, ч, ГОСТ 4160-74.
Калий бромноватокислый, ч, ГОСТ 4457-74.
Калия гидроокись, чда, ГОСТ 24363-80.
Кислота серная, хч, ГОСТ 4204-77.
Натрий сернистокислый (сульфит), чда, ГОСТ 195-77.
Натрий сернокислый б/в (сульфат), чда, ГОСТ 4166-76.
Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.
Этиленгликоль, чда, ГОСТ 10164-75.
Эфир этиловый (серный), ГОСТ ФС 42-3643-98.
Фильтры бумажные, красная лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
Фильтры бумажные, белая лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Газовый хроматограф с ДЭЗ и хроматографической колонкой капиллярной кварцевой длиной 15 м, внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-52, толщиной слоя 0,4 мкм.
Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73 или аналогичный.
Весы аналитические типа ВЛА-200, ГОСТ 34104-80.
Весы лабораторные типа ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80.
Воронки делительные емкостью 500 мл, ГОСТ 25336-82.
Воронки для фильтрования стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Инструментарий для первичной подготовки проб к определению (нож, ножницы, шпатели, кюветы и др.).
Колбы-концентраторы емкостью 100, 250 мл, ГОСТ 25336-82.
Колбы плоскодонные емкостью 300 мл, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные со шлифом емкостью 25, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.
Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.
Приспособление для обжима колпачков на флаконах, ТУ 42-2-2442-73.
Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1 или аналогичный.
Пипетки мерные емкостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Стаканы химические емкостью 500 мл, ГОСТ 25336-82.
Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении.
Установка для упаривания растворителей в токе азота.
Установка ультразвуковая "Серьга" УЗМ002 или аналогичная.
Флаконы стеклянные (типа пенициллиновых) емкостью 20,0 мл.
Шкаф сушильный, ТУ 64-1-1411-76.
Электроплитка, ГОСТ 14919-83.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1. Очистка органических растворителей и воды.
Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном испарителе при температуре 40°С до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.
В обязательном порядке проводят дополнительную очистку воды, используемой при обработке проб к проведению определения. Для этого 150 мл (из расчета обработки 1 пробы) дистиллированной воды, перегнанной над и щелочью, помещают в делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку вносят 50 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, 1,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия и после перемешивания 50 мл этилового эфира. Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После разделения слоев нижний водно-солевой слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, а верхний эфирный слой отбрасывают. К водно-солевой фракции, находящейся в колбе, добавляют (до рН 3-4) ~1,5 мл 5% водного раствора серной кислоты. Содержимое колбы перемешивают встряхиванием, переносят в делительную воронку емкостью 500 мл и добавляют 50 мл этилового эфира. Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После разделения слоев нижний водно-солевой слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, а верхний эфирный слой отбрасывают. Очищенный водно-солевой раствор используют при обработке пробы к проведению определения по п. 2.6.
2.4.2. Приготовление щелочного этиленгликоля.
В мерной колбе емкостью 25 мл растворяют 1,0 г гидроокиси калия в 1,0 мл дистиллированной воды и доводят объем до 25 мл этиленгликолем.
2.4.3. Приготовление стандартных растворов десмедифама и фенмедифама.
Основные растворы десмедифама и фенмедифама с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением в ацетоне 0,01 г каждого препарата в мерных колбах на 100 мл. Растворы хранят в холодильнике при 4-6°С не более 3-х месяцев.
Смеси рабочих стандартных растворов десмедифама и фенмедифама с концентрациями 4,0, 2,0, 1,0 и 0,5 мкг/мл готовят во флаконах емкостью 20 мл (типа пенициллиновых) из основных стандартных растворов соответствующим последовательным разбавлением ацетоном. Ацетон упаривают в токе азота досуха и проводят гидролиз стандартных веществ с получением их бромпроизводных по п. 2.6.2.
Экстракты, приготовленные по п. 2.6.2 для построения калибровочного графика, хранят в холодильнике при 4-6°С не более месяца.
2.4.4. Построение калибровочного графика.
Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 1 мкл приготовленных по пп. 2.4.3. и 2.6.2. экстрактов, содержащих смеси стандартных растворов десмедифама и фенмедифама (в виде бромпроизводных) с концентрациями 0,5, 1,0, 2,0 и 4,0 мкг/мл. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм от концентрации десмедифама и фенмедифама в растворе в мкг/мл.
2.5. Отбор и хранение проб
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными 21.08.1979 г., N 2051-79.
Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру с температурой -18°С.
2.6. Проведение определения
2.6.1. Экстракция десмедифама и фенмедифама
Аналитическую пробу корнеплодов или ботвы массой г помещают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, добавляют 150 мл ацетона, слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане два раза по 5 мин. Ацетоновый экстракт фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбы с пробой ополаскивают 20 мл ацетона и экстрагент фильтруют в колбу-концентратор.
При использовании аппарата для встряхивания в плоскодонную колбу с аналитической пробой массой г вносят 150 мл ацетона и содержимое колбы встряхивают в течение 60 мин. После этого экстракт фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбы с пробой ополаскивают 20 мл ацетона и экстрагент фильтруют в колбу-концентратор.
Колбу-концентратор с объединенным экстрактом устанавливают в ротационный вакуумный испаритель и упаривают ацетон при температуре 40°С до объема экстракта 20-30 мл. К остатку экстракта в колбе добавляют 200 мл водно-солевого раствора, приготовленного по п. 2.4.1. Содержимое колбы-концентратора фильтруют через бумажный фильтр белая лента в делительную воронку емкостью 500 мл. Затем в делительную воронку вносят 50 мл этилового эфира, содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут и после разделения слоев нижний водно-солевой слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 250 мл, а верхний эфирный слой в колбу-концентратор емкостью 100 мл. Процедуру экстрагирования десмедифама и фенмедифама из водно-солевого раствора повторяют с использованием 25 мл этилового эфира.
Колбу-концентратор с объединенным эфирным экстрактом устанавливают в ротационный испаритель и упаривают этиловый эфир при температуре 40°С до объема экстракта 10-15 мл. Остаток экстракта количественно переносят во флакон (типа пенициллинового) емкостью 20 мл и упаривают этиловый эфир в токе азота.
2.6.2. Проведение гидролиза и бромирования производных десмедифама и фенмедифама.
К остатку во флаконе прибавляют 1 мл щелочного этиленгликоля, приготовленного по п. 2.4.2., флакон герметизируют и термостатируют при 150°С в течение 30 мин. После охлаждения во флакон последовательно добавляют 10 мл 1н водного раствора серной кислоты, 0,25 мл 20% раствора (в 1н водном растворе серной кислоты) бромистого калия и 0,25 мл 1% водного раствора бромноватокислого калия (хранят в темноте). Содержимое флакона перемешивают, флакон закрывают пробкой и выдерживают в темноте 15 мин. После этого во флакон последовательно добавляют небольшое количество ("на кончике шпателя") порошкообразного сульфита натрия до обесцвечивания содержимого, 1,0 мл 50% водного раствора гидроокиси калия и после перемешивания - 2,5 мл толуола. Флакон закрывают пробкой, интенсивно встряхивают в руке и оставляют в покое на 10-15 минут до разделения слоев содержимого флакона. Аликвотную часть верхнего толуольного слоя хроматографируют по п. 2.7.
В том случае, если через 10-15 минут верхний толуольный слой остается мутным, аликвотную его часть (1,5-2,0 мл) пропускают через слой (толщина 0,3-0,5 см) безводного сульфата натрия и затем анализируют на содержание десмедифама и фенмедифама по п. 2.7.
2.7. Условия хроматографирования
Газовый хроматограф с ДЭЗ.
Колонка хроматографическая капиллярная длиной 15 м, внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-52 толщиной слоя 0,4 мкм.
Температура колонки с программированием от 80°С (3 мин) до 280°С (15 мин) со скоростью 10°С/мин.
Температура испарителя: 250°С.
Температура детектора: 300°С.
Расход газов: газа-носителя (азот в/ч) - 2,0 , дополнительного газа (азот в/ч) к ДЭЗ - 40 .
Объем хроматографируемой пробы: 1 мкл.
Время удерживания: десмедифама (в виде бромпроизводного) - мин, фенмедифама (в виде бромпроизводного) - мин.
Линейный диапазон детектирования (по бромпроизводным): 0,25-8,0 нг.
2.8. Обработка результатов анализа
Содержание десмедифама или фенмедифама рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
, где:
X - содержание десмедифама или фенмедифама в пробе, мг/кг,
- высота (площадь) пика анализируемого вещества, мм ,
- высота (площадь) пика стандартного вещества, мм ,
А - концентрация смеси стандартных растворов десмедифама и фенмедифама, мкг/мл,
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл,
m - масса (г) аналитической пробы.
3. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
4. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации к приборам.
5. Разработчики
П.А. Тарарин, Т.А. Маханькова, Л.В. Григорьева (ВНИИ защиты растений).
Главный государственный санитарный врач |
Г.Г. Онищенко |
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Методические указания МУК 4.1.1473-03 по определению остаточных количеств десмедифама и фенмедифама в корнеплодах и ботве сахарной, столовой и кормовой свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)
Текст методических указаний опубликован не был
Дата введения: 30 июня 2003 г.