Откройте актуальную версию документа прямо сейчас
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Приложение А
(обязательное)
Основные параметры методов испытаний на разъедание кожи с использованием модели RhE
Параметры метода испытаний |
EpiSkin тм |
EpiDerm тм SCT |
SkinEthic тм RHE |
epiCS |
Площадь поверхности модели |
0,38 см 2 |
0,63 см 2 |
0,5 см 2 |
0,6 см 2 |
Количество параллельно обрабатываемых образцов тканей |
Не менее 2 из расчета на каждый заданный период воздействия |
2-3 из расчета на каждый заданный период воздействия |
Не менее 2 из расчета на каждый заданный период воздействия |
Не менее 2 из расчета на каждый заданный период воздействия |
Используемые дозы и применение |
Жидкая и вязкая химическая продукция: (50 |
Жидкая химическая продукция: 50 мм 3 (79,4 мм 3/см 2) с использованием или без нейлоновой сетки Требуется предварительная проверка совместимости исследуемой химической продукции с нейлоновой сеткой |
Жидкая и вязкая химическая продукция: (40 Требуется предварительная проверка совместимости исследуемой химической продукции с нейлоновой сеткой |
Жидкая химическая продукция: 50 мм 3 (83,3 мм 3/см 2) с использованием нейлоновой сетки Требуется предварительная проверка совместимости исследуемой химической продукции с нейлоновой сеткой |
Полутвердая химическая продукция: 50 мм 3 (= 79,4 мм 3/см 2) |
|
Полутвердая химическая продукция: 50 мм 3 (= 83,3 мм 3/см 2) |
||
Твердая химическая продукция: (20 |
Твердая химическая продукция: 25 мм 3 Н 2O (при необходимости больше) + 25 мг (39,7 мг/см 2) |
Твердая химическая продукция: (20 |
Твердая химическая продукция: 25 мг (41,7 мг/см 2) + 25 мм 3 Н 2O (при необходимости больше) |
|
Воскообразная/клейкая химическая продукция: (50 |
Воскообразная химическая продукция: плоские, в форме диска фрагменты диаметром приблизительно 8 мм помещают поверх образца ткани, увлажненного 15 мм 3 Н 2O |
Воскообразная/клейкая химическая продукция: (20 |
Воскообразная химическая продукция: плоские, в форме диска фрагменты диаметром приблизительно 8 мм помещают поверх образца ткани, увлажненного 15 мм 3 Н 2O |
|
Предварительная проверка на способность восстанавливать МТТ |
50 мм 3 (жидкой химической продукции) или 20 мг (твердой химической продукции) + 2 см 3 раствора МТТ концентрацией 0,3 мг/см 3 в течение (180 |
50 мм 3 (жидкой химической продукции) или 25 мг (твердой химической продукции) + 1 см 3 раствора МТТ концентрацией 1 мг/см 3 в течение 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 %, если раствор становится синим/пурпурным, следует применять контрольные пробы с нежизнеспособными клетками после замораживания |
40 мм 3 (жидкой химической продукции) или 20 мг (твердой химической продукции) + 1 см 3 раствора МТТ концентрацией 1 мг/см 3 в течение (180 |
50 мм 3 (жидкой химической продукции) или 25 мг (твердой химической продукции) + 1 см 3 раствора МТТ концентрацией 1 мг/см 3 в течение 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 %, если раствор становится синим/пурпурным, следует применять контрольные пробы с нежизнеспособными клетками после замораживания |
Предварительная проверка на наличие цветовых помех |
10 мм 3 (жидкой химической продукции) или 10 мг (твердой химической продукции) + 90 мм 3 Н 2O перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре |
50 мм 3 (жидкой химической продукции) или 25 мг (твердой химической продукции) + 300 мм 3 Н 2O в течение 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
40 мм 3 (жидкой химической продукции) или 20 мг (твердой химической продукции) + 300 мм 3 Н 2O перемешивают в течение 60 мин при комнатной температуре |
50 мм 3 (жидкой химической продукции) или 25 мг (твердой химической продукции) + 300 мм 3 Н 2O в течение 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
Период воздействия и температура |
3, (60 |
3 мин при комнатной температуре и 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
3 мин при комнатной температуре и 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
3 мин при комнатной температуре и 60 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
Промывание |
25 см 3 фосфатно-солевой буфер (ФБС) (1х) (2 см 3/на одно промывание) |
20 раз непрерывным слабым потоком ФБС (1х) |
20 раз непрерывным слабым потоком ФБС (1х) |
20 раз непрерывным слабым потоком ФБС (1х) |
Отрицательная контрольная проба |
50 мм 3 раствора NaCl (9 г/дм 3) Подвергают испытанию в течение каждого периода воздействия |
50 мм 3 Н 2O Подвергают испытанию в течение каждого периода воздействия |
40 мм 3 Н 2O Подвергают испытанию в течение каждого периода воздействия |
50 мм 3 Н 2O Подвергают испытанию в течение каждого периода воздействия |
Положительная контрольная проба |
50 мм 3 ледяной уксусной кислоты Подвергают испытанию только в течение периода воздействия 4 ч |
50 мм 3 8 н раствора KОН Подвергают испытанию в течение каждого периода воздействия |
40 мм 3 8 н раствора KОН Подвергают испытанию только в течение периода воздействия 1 ч |
50 мм 3 8 н раствора KОН Подвергают испытанию в течение каждого периода воздействия |
Раствор МТТ |
2 см 3 концентрацией 0,3 мг/см 3 |
300 мм 3 концентрацией 1 мг/см 3 |
300 мм 3 концентрацией 1 мг/см 3 |
300 мм 3 концентрацией 1 мг/см 3 |
Время и температура обработки МТТ |
180 мин ( |
180 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
180 мин ( |
180 мин при 37 °С, 5 % СO 2, относительной влажности 95 % |
Растворитель для экстракции |
500 мм 3 подкисленного изопропанола (0,04 н раствор HCl в изопропаноле) (образец ткани полностью погружен) |
2 см 3 изопропанола (экстрагирование из верхней и нижней частей вставки) |
1,5 см 3 изопропанола (экстрагирование из верхней и нижней частей вставки) |
2 см 3 изопропанола (экстрагирование из верхней и нижней частей вставки) |
Время и температура экстрагирования |
Оставляют на ночь при комнатной температуре в защищенном от света месте |
Оставляют на ночь без встряхивания при комнатной температуре или на 120 мин со встряхиванием ( |
Оставляют на ночь без встряхивания при комнатной температуре или на 120 мин со встряхиванием ( |
Оставляют на ночь без встряхивания при комнатной температуре или на 120 мин со встряхиванием ( |
Определение ОП |
570 нм (от 545 до 595 нм) без фильтра сравнения |
570 нм (или 540 нм) без фильтра сравнения |
570 нм (от 540 до 600 нм) без фильтра сравнения |
От 540 до 570 нм без фильтра сравнения |
Контроль качества образцов ткани |
Обрабатывают ДСН концентрацией 1,0 мг/см 3 |
Обрабатывают Тритоном Х-100 концентрацией 1 % в течение 4,08 ч |
Обрабатывают Тритоном Х-100 концентрацией 1 % в течение 4,0 ч |
Обрабатывают Тритоном Х-100 концентрацией 1 % в течение 2,0 ч |
Критерии приемлемости |
1 Среднее арифметическое значение ОП для образцов ткани, параллельно обработанных отрицательной контрольной пробой (NaCl), должно составлять 2 Среднее арифметическое значение жизнеспособности образцов ткани, параллельно подвергавшихся воздействию положительной контрольной пробы (ледяной уксусной кислоты) в течение 4 ч, в % от результата для отрицательной контрольной пробы, должно составлять 3 В диапазоне жизнеспособности от 20 % до 100 % и при значениях ОП |
1 Среднее арифметическое значение ОП для образцов ткани, параллельно обработанных отрицательной контрольной пробой (Н 2O), должно составлять 2 Среднее арифметическое значение жизнеспособности образцов ткани, параллельно подвергавшихся воздействию положительной контрольной пробы (8 н KОН) в течение 1 ч, в % от результата для отрицательной контрольной пробы, должно составлять < 15 %. 3 В диапазоне жизнеспособности от 20 % до 100 % коэффициент вариации (КВ) параллельно обработанных образцов ткани должен составлять |
1 Среднее арифметическое значение ОП для образцов ткани, параллельно обработанных отрицательной контрольной пробой (Н 2O), должно составлять 2 Среднее арифметическое значение жизнеспособности образцов ткани, параллельно подвергавшихся воздействию положительной контрольной пробы (8 н KОН) в течение 1 ч (а также, если требуется, 4 ч), в % от результата для отрицательной контрольной пробы, должно составлять < 15 %. 3 В диапазоне жизнеспособности от 20 % до 100 % и при значениях ОП |
1 Среднее арифметическое значение ОП для образцов ткани, параллельно обработанных отрицательной контрольной пробой (Н 2O), должно составлять 2 Среднее арифметическое значение жизнеспособности образцов ткани, параллельно подвергавшихся воздействию положительной контрольной пробы (8 н KОН) в течение 1 ч, в % от результата для отрицательной контрольной пробы, должно составлять < 20 %. 3 В диапазоне жизнеспособности от 20 % до 100 % и при значениях ОП |
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.