Приложение А3.1. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с пароксизмальной ночной гемоглобинурией в возрасте от 0 до 18 лет

Приложение А3.1

Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с пароксизмальной ночной гемоглобинурией в возрасте от 0 до 18 лет

1. Общие положения

Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) - медицинская технология, применяемая при лечении злокачественных болезней крови, неизлечимых иными (консервативными) методами. Принцип метода состоит в комбинированном воздействии на гемопоэтическую и лимфоидную систему, пораженные болезнью, которое складывается из 1) иммуно- и миелосупрессивного эффекта высокодозной химио- и лучевой терапии; 2) замещения кроветворной функции костного мозга донорскими гемопоэтическими стволовыми клетками; и 3) иммунологическом (аллоиммунном) воздействии со стороны донорских иммунокомпетентных клеток на резидуальный лимфогемопоэз реципиента.

2. Этапы ТГСК и клиническая периодизация

Процедура ТГСК состоит из следующих этапов (периодов):

1. Предтрансплантационное обследование донора и реципиента

2. Предтрансплантационная подготовка донора и реципиента

3. Кондиционирование реципиента

4. Заготовка и обработка трансплантата

5. Миелоинфузия (собственно трансплантация)

6. Иммуносупрессивная и сопроводительная терапия до миелореконституции (приживления трансплантата)

7. Иммуносупрессивная и сопроводительная терапия на раннем этапе после приживления (день 30-100)

8. Иммуносупрессивная и сопроводительная терапия на позднем этапе после приживления (день 100-365)

3. Выбор донора и источника ГСК [52]

С целью своевременного выбора донора всем пациентам с ПНГ при установлении показаний к ТГСК выполняется тканевое (HLA) типирование пациента и потенциальных родственных доноров. Тактика типирования членов семьи определяется стратегией клиники в отношении использования доноров ГСК. Донором для пациента с ПНГ может быть (в порядке снижения приоритета):

a. Родственный полностью совместимый донор

b. Родственный частично совместимый (гаплоидентичный) донор или Неродственный совместимый донор или неродственный частично совместимый донор с допустимой степенью несовместимости

c. Неродственная пуповинная кровь

Источник ГСК выбирается исходя из технологической платформы ТГСК, реализуемой в клинике. Источником ТГСК может являться:

- Костный мозг (КМ)

- Стволовые клетки периферической крови (СКПК)

- Пуповинная кровь (ПК)

4. Обследование пациента перед ТГСК [53]

Обследование пациента перед ТГСК направлено на установление статуса основного заболевания, оценку коморбидности, функционального статуса, нутритивного статуса, инфекционного статуса, психологического статуса.

Методы клинической лабораторной диагностики, применяемые при обследовании пациента перед ТГСК [53]:

- Общий (клинический) анализ крови развернутый

- Анализ крови биохимический общетерапевтический с исследованием следующих показателей: альбумин, общий белок, общий билирубин, прямой билирубин, креатинин, мочевина, глюкоза, электролиты (K, Na, Mg, Ca), аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, гамма-глутамилтрансфераза, щелочная фосфатаза, лактатдегидрогеназа, альфа-амилаза, панкреатическая амилаза, холестерин общий, триглицериды, липаза, липопротеины низкой плотности, липопротеины высокой плотности

- Исследование уровня ферритина в крови, исследование уровня фолиевой кислоты в сыворотке крови, определение уровня витамина В12 (цианокобаламин) в крови

- Исследование кислотно-основного состояния и газов крови

- Иммунофенотипирование периферической крови для выявления субпопуляционного состава лимфоцитов (основные)

- Исследование уровня иммуноглобулинов в крови

- Определение ДНК вируса Эпштейна-Барр (Epstein-Barr virus) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови, качественное исследование

- Определение ДНК цитомегаловируса (Cytomegalovirus) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови, качественное исследование

- Определение ДНК вируса герпеса 6 типа (HHV6) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови, качественное исследование

- Определение ДНК аденовируса (Human Adenovirus) в мазках со слизистой оболочки носоглотки/ротоглотки методом ПЦР

- Микробиологическое (культуральное) исследование крови на стерильность

- Определение основных групп крови по системе АВ0, определение антигена D системы Резус (резус-фактор)

- Непрямой антиглобулиновый тест (тест Кумбса), определение содержания антител к антигенам эритроцитов в крови, определение содержания антител к антигенам групп крови, определение холодовых антиэритроцитарных антител в крови

- Прямой антиглобулиновый тест (прямая проба Кумбса)

- Определение протромбинового (тромбопластинового) времени в крови или в плазме, определение международного нормализованного отношения (МНО)

- Определение активированного частичного тромбопластинового времени

- Определение тромбинового времени в крови

- Определение антител к грибам рода аспергиллы (Aspergillus spp.) в крови

- Госпитальный скрининг: определение антигена (HbsAg) вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови, определение антител к ядерному антигену вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови, молекулярно-биологическое исследование крови на вирус гепатита С (Hepatitis С virus), молекулярно-биологическое исследование крови на Treponema pallidum, определение антител классов М, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-1 (Human immunodeficiency virus HIV 1) в крови, определение антител классов М, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-2 (Human immunodeficiency virus HIV 2) в крови

- Определение ДНК вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови методом ПЦР, количественное исследование

- Определение РНК вируса гепатита С (Hepatitis С virus) в крови методом ПЦР, количественное исследование

- Иммунохроматографическое экспресс-исследование кала на токсины А и В клостридии (Clostridium difficile)

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний со слизистых оболочек/поверхности кожи

- Общеклиническое исследование спинномозговой жидкости (ликвора): исследование физических свойств спинномозговой жидкости, микроскопическое исследование спинномозговой жидкости, подсчет клеток в счетной камере (определение цитоза), цитологическое исследование клеток спинномозговой жидкости

- Общий (клинический) анализ мочи, микроскопическое исследование осадка мочи,

- Определение белка в моче

- Исследование уровня глюкозы в моче

- Исследование уровня креатинина в моче

- Исследование уровня мочевины в моче

- Микробиологическое (культуральное) исследование на стерильность крови, спинномозговой жидкости, мочи, фрагментов медицинских устройств (ЦВК, имплант)

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в биологических жидкостях (экссудатах, транссудатах)

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в биоптатах

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в бронхоальвеолярном лаваже/мокроте

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в раневом отделяемом

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний фекалий/ректального мазка

- Исследование уровня кальция в моче

- Исследование уровня фосфора в моче

- Исследование уровня калия, натрия, кальция, хлора в моче

- Определение активности панкреатической амилазы в крови

- Исследование уровня тропонинов I, Т в крови

- Исследование функции нефронов по клиренсу креатинина (проба Реберга),

- Сортировка клеточных линий методом проточной цитофлуориметрии (исследование биологического материала методом проточной цитофлуориметрии)

- Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH) (после гипотонической обработки клеток, на готовой суспензии клеток, на отпечатках и мазках) (1 ДНК-зонд)* (молекулярно-цитогенетическое исследование (FISH-метод) на одну пару хромосом)

- Дифференцированный подсчет лейкоцитов (лейкоцитарная формула)

- Исследование уровня свободного трийодтиронина (СТ3) в крови

- Исследование уровня свободного тироксина (СТ4) сыворотки крови

- Исследование уровня тиреотропного гормона (ТТГ) в крови

- Исследование уровня общего кортизола в крови

- Исследование уровня инсулиноподобного ростового фактора I в крови

- Исследование уровня фолликулостимулирующего гормона в сыворотке крови, исследование уровня лютеинизирующего гормона в сыворотке крови

- Исследование уровня общего эстрадиола в крови, исследование уровня общего тестостерона в крови

- Определение антител классов М, G (IgM, IgG) к цитомегаловирусу (Cytomegalovirus) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна-Барр (Epstein-Barr virus) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к капсидному антигену (VCА) вируса Эпштейна-Барр (Epstein-Barr virus) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к вирусу ветряной оспы и опоясывающего лишая (Varicella-Zoster virus) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к вирусу ветряной оспы и опоясывающего лишая (Varicella-Zoster virus) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к вирусу простого герпеса 1 и 2 типа (Herpes simplex virus 1, 2) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов (Herpes simplex virus types 1, 2) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к токсоплазме (Toxoplasma gondii) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к токсоплазме (Toxoplasma gondii) в крови

Инструментальные методы, применяемые при обследовании пациента перед ТГСК:

- Прицельная рентгенография грудной клетки (2 проекции)

- Компьютерная томография органов брюшной полости и забрюшинного пространства с внутривенным болюсным контрастированием

- Спиральная компьютерная томография придаточных пазух носа

- Компьютерная томография органов грудной полости

- Магнитно-резонансная томография головного мозга с контрастированием под наркозом - 3Т (Тесла)

- Ультразвуковое исследование почек, надпочечников, мочевого пузыря, органов брюшной полости (печень, желчный пузырь, поджелудочная железа, селезенка), забрюшинного пространства, малого таза

- Регистрация электрокардиограммы; расшифровка, описание и интерпретация электрокардиографических данных (дети 1-18 лет)

- Суточное мониторирование артериального давления

- Эргоспирометрия

- Дуплексное сканирование брахиоцефальных артерий с цветным допплеровским картированием кровотока

- Дуплексное сканирование нижней полой вены и вен портальной системы

- Получение цитологического препарата костного мозга путем пункции, цитологическое исследование мазка костного мозга (миелограмма)

- Спинномозговая пункция

- Анестезиологическое пособие (включая раннее послеоперационное ведение)

- Эзофагогастродуоденоскопия

- Колоноскопия

- Биопсия пищевода, желудка, двенадцатиперстной кишки с помощью эндоскопии

- Биопсия ободочной кишки эндоскопическая

- Биопсия прямой кишки с помощью видеоэндоскопических технологий

- Биопсия кожи

- Бронхоскопия диагностическая

- Электроэнцефалография с видеомониторингом

- Ортопантомография

Консультации врачей-специалистов в предтрансплантационном периоде:

- Врач-офтальмолог

- Врач-отоларинголог

- Врач-невролог

- Врач-стоматолог

- Медицинский психолог

- Врач-кардиолог

- Врач-пульмонолог

- Врач-эндокринолог

- Врач-акушер-гинеколог

5. Обследование донора перед ТГСК [54]

Обследование донора перед ТГСК выполняется в два этапа. Этап 1: обследование потенциального донора. Направлен на установление степени совместимости по антигенам HLA, выявление абсолютных противопоказаний к донации. Этап 2: обследование актуального донора. Направлен на объективную оценку состояния здоровья донора, инфекционного статуса, выявление относительных противопоказаний к донации, установление приоритетного метода заготовки ГСК.

Методы клинической лабораторной диагностики, применяемые при обследовании донора перед ТГСК [54]:

- Общий (клинический) анализ крови развернутый

- Анализ крови биохимический общетерапевтический с исследованием следующих показателей: альбумин, общий белок, общий билирубин, прямой билирубин, креатинин, мочевина, глюкоза, электролиты (K, Na)), аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, гамма-глутамилтрансфераза, щелочная фосфатаза, альфа-амилаза, панкреатическая амилаза, холестерин общий, триглицериды, липаза, липопротеины низкой плотности, липопротеины высокой плотности

- Определение основных групп крови по системе АВ0, определение антигена D системы Резус (резус-фактор)

- Определение протромбинового (тромбопластинового) времени в крови или в плазме, определение международного нормализованного отношения (МНО)

- Определение активированного частичного тромбопластинового времени

- Определение тромбинового времени в крови

- Определение антител к грибам рода аспергиллы (Aspergillus spp.) в крови

- Госпитальный скрининг: определение антигена (HbsAg) вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови, определение антител к ядерному антигену вируса гепатита В (Нepatitis В virus) в крови, молекулярно-биологическое исследование крови на вирус гепатита С (Hepatitis С virus), молекулярно-биологическое исследование крови на Treponema pallidum, определение антител классов М, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-1 (Human immunodeficiency virus HIV 1) в крови, определение антител классов М, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-2 (Human immunodeficiency virus HIV 2) в крови

- Определение ДНК вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови методом ПЦР, количественное исследование

- Определение РНК вируса гепатита С (Hepatitis С virus) в крови методом ПЦР, количественное исследование

- Общий (клинический) анализ мочи, микроскопическое исследование осадка мочи

- Определение антител классов М, G (IgM, IgG) к цитомегаловирусу (Cytomegalovirus) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна-Барр (Epstein-Barr virus) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна-Барр (Epstein-Barr virus) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к вирусу ветряной оспы и опоясывающего лишая (Varicella-Zoster virus) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к вирусу ветряной оспы и опоясывающего лишая (Varicella-Zoster virus) в крови

- Определение антител класса G (IgG) к вирусу простого герпеса 1 и 2 типа (Herpes simplex virus 1, 2) в крови

- Определение антител класса М (IgM) к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов (Herpes simplex virus types 1, 2) в крови

Определение антител класса G (IgG) к токсоплазме (Toxoplasma gondii) в крови

Определение антител класса М (IgM) к токсоплазме (Toxoplasma gondii) в крови

Инструментальные методы, применяемые при обследовании донора перед ТГСК [54]:

Прицельная рентгенография грудной клетки (2 проекции)

- наркозом# - 3Т (Тесла)

- Ультразвуковое исследование почек, надпочечников, мочевого пузыря, органов брюшной полости (печень, желчный пузырь, поджелудочная железа, селезенка), забрюшного пространства, малого таза

- Регистрация электрокардиограммы; расшифровка, описание и интерпретация электрокардиографических данных

- Суточное мониторирование артериального давления

- Дуплексное сканирование брахиоцефальных артерий с цветным допплеровским картированием кровотока

- Дуплексное сканирование нижней полой вены и вен портальной системы

- Эхокардиография

- Анестезиологическое пособие (включая раннее послеоперационное ведение)

6. Заготовка трансплантата [55]

Заготовка и обработка трансплантата ГСК включают мероприятия по извлечению ГСК донора и их последующую обработку, направленную на формирование оптимальных функциональных характеристик трансплантата. Этапами заготовки трансплантата являются:

- Подготовка донора

- Заготовка трансплантата

- Обработка трансплантата

- Контроль качества трансплантата

- Транспортировка и хранение трансплантата (при разобщении места и времени заготовки трансплантата и инфузии трансплантата)

Подготовка донора

Подготовка донора зависит от метода заготовки трансплантата и, соответственно, от избранного источника ГСК (КМ или СКПК).

При использовании в качестве источника ГСК костного мозга подготовка донора включает:

- Предоперационное обследование

- Обеспечение сосудистого доступа

При использовании в качестве источника ГСК подготовка донора включает:

- Фармакологическую мобилизацию ГСК в сосудистое русло. Целью фармакологической мобилизации ГСК является временное перемещение ГСК костного мозга в сосудистое русло с целью обеспечения возможности заготовки необходимого количества ГСК.

- Обеспечение сосудистого доступа

Заготовка трансплантата

Заготовка донорского КМ [56]

Заготовка донорского КМ выполняется в условиях операционного блока под общей или эпидуральной анестезией. Технически заготовка КМ представляет собой последовательные пункции в области верхней задней подвздошной ости и подвздошного гребня и аспирацию КМ. Целевой объем донорского КМ составляет 20 мл/кг массы тела реципиента и не должен превышать 20 мл/кг массы тела донора. Аспирированный КМ переносится в гепаринизированную емкость (пакет).

Медикаменты и средства медицинского применения, необходимые для заготовки КМ донора [56]:

- Желатин** - раствор 4%

- Пропофол**

- Рокурония бромид**

- Сугаммадекс**

- Севофлуран**

- Фентанил**

- Ропивакаин**

- Интубационная трубка

- Периферический венозный катетер

- Игла для аспирации костного мозга

- Шприц медицинский объем 10 мл, 5 мл, 2 мл

- Система для заготовки костного мозга (или система для забора компонентов крови)

- Система инфузионная

- Гепарин натрия**

- Декстроза + натрия цитрат

- Шовный материал

- Скальпель

- Пластырная повязка

- Перчатки стерильные

- Антисептики и дезинфицирующие средства для обработки операционного поля

Заготовка донорских СКПК [57]

Заготовка донорских СКПК выполняется в условиях отделения переливания крови или врачом-трансфузиологом отделения ТГСК. Технически заготовка донорских СКПК осуществляется методом аппаратного лейкоцитафереза на сепараторе клеток крови. Объем лейкоцитафереза определяется исходя из концентрации ГСК в крови в результате фармакологической мобилизации и составляет от 0.5 до 2 объемов циркулирующей крови (ОЦК).

Медикаменты и средства медицинского применения, необходимые для заготовки СКПК донора [57];

- Колониестимулирующие факторы (группа L03AA по классификации АТХ)

- #Плериксафор 0,24 мг/кг/сут п/к

- Фистульные иглы 17G

- Периферический катетер 16G

- Центральный венозный катетер 7-12F

- Система Spectra Optia Collection Set (ref 10110, Terumo ВСТ) или Spectra Optiа IDL Set (ref 10310, Terumo ВCT)

- Декстроза + натрия цитрат

- Эритроцитарная масса

- Системы для трансфузий крови

- Дискофикс (трёхходовой коннектор)

- Пустой стерильный мешок для компонентов крови

Заготовка ПК [58]

Заготовка ПК выполняется в условиях родильного блока. Технически заготовка ПК осуществляется путем пункции пупочной вены пупочного канатика и сбора ПК в систему для заготовки (четырехкамерный мешок с антикоагулянтом).

Обработка трансплантата ГСК [59]

Обработка трансплантата - набор технических манипуляций, направленных на изменение качественных и количественных параметров трансплантата ГСК с целью обеспечения оптимальных функциональных характеристик трансплантата с точки зрения эффективности и безопасности процедуры ТГСК. Обработка трансплантата выполняется на базе специализированной лаборатории в составе отделения переливания крови или отделения ТГСК.

Основными типами обработки трансплантата являются [60]:

- Разделение трансплантата

- Редукция объема трансплантата

- Редукция (удаление) плазмы

- Редукция (удаление) эритроцитов

- Селекция ГСК (CD34 селекция)

- Избирательная деплеция лимфоцитов (ab Т деплеция, CD19 деплеция, CD45RA деплеция)

- Криоконсервация и разморозка

Выбор метода (комбинации методов) обработки трансплантата определяется исходными характеристиками пары донор-реципиент, источником ГСК и технологической платформой ТГСК, реализуемой в трансплантационном центре.

Контроль качества трансплантата

Трансплантат ГСК представляет собой взвесь ядросодержащих клеток донора, обогащенных ГСК. Перед введением трансплантата ГСК реципиенту обязательно выполняется контроль качества трансплантата.

Обязательными параметрами трансплантата ГСК, подлежащими контролю и регистрации, являются:

- Объем трансплантата

- Концентрация и абсолютное содержание ядросодержащих клеток

- Концентрация и абсолютное содержание CD34+ клеток (фракция, обогащенная ГСК)

Дополнительными параметрами трансплантата ГСК, подлежащими контролю и регистрации, являются

- Концентрация и абсолютное содержание субпопуляций лейкоцитов (в зависимости от избранного метода обработки трансплантата)

- Жизнеспособность CD34+ клеток (фракция, обогащенная ГСК)

Транспортировка и хранение трансплантата ГСК

Транспортировка и хранение трансплантата ГСК (или его части) необходимы в ситуации разобщения процедур заготовки, обработки и введения трансплантата во времени и пространстве. Транспортировка трансплантата ГСК может осуществляться в нативном виде и после криоконсервации. Транспортировка нативного трансплантата осуществляется в температурном режиме от +3 до +8°С с соблюдением холодовой цепи. Максимальный срок транспортировки и хранения (включая обработку) без криоконсервации составляет 72 часа от момента заготовки трансплантата ГСК. Транспортировка криоконсервированного трансплантата осуществляется в температурном режиме от -150 до -196°С с соблюдением холодовой цепи.

7. Режим кондиционирования [61]

Режим кондиционирования представляет собой программу высокодозной химиотерапии +/- лучевой терапии, целью которой является эрадикация опухоли (лейкемии), гемопоэтической и иммунной системы реципиента, и создание, таким образом, условий, необходимых для приживления и функционирования донорского гемопоэза, формирования донорской иммунной системы и реакции трансплантат-против-лейкемии (РТПЛ). В состав режима кондиционирования включают химиопрепараты, обладающие выраженным иммуносупрессивным и/или миелосупрессивным эффектом. Набор препаратов, дозы и последовательность введения химиопрепаратов в составе режима кондиционирования могут варьировать. Как правило, в режиме кондиционирования используют высокие дозы химиопрепаратов, ассоциированные с высоким риском развития дозозависимых побочных эффектов. Выбор режима кондиционирования определяется технологической платформой ТГСК, реализуемой в трансплантационном центре, исходными характеристиками пары донор-реципиент.

Медикаменты, используемые в составе различных режимов кондиционирования при ПНГ (суммарная курсовая доза) [61]:

- #Треосульфан, 30-42 [62]

- #Бусульфан**, 8 мг/кг, пероральная форма [63]

- #Флударабин**, 100-180 [64, 65]

- Тиотепа, 3,38-8,10 мг/кг

- #Циклофосфамид**, 40-200 мг/кг [65]

- Тотальное облучение тела 2-6 Гр

8. Введение в РТПХ [66]

Реакция трансплантат-против-хозяина (РТПХ) - ключевое иммунологическое осложнение ТГСК. РТПХ - иммунопатологический процесс, в основе которого лежит распознавание донорскими иммунокомпетентными клетками антигенных различий между донором и реципиентом, формирование иммунного ответа и воспалительное повреждение органов и тканей реципиента. Выделяют 4 категории РТПХ 1) классическая острая РТПХ (оРТПХ); 2) поздняя острая РТПХ; 3) "синдром перекреста" острой и хронической РТПХ; 4) хроническая РТПХ (хРТПХ). Согласно Консенсусу ВОЗ две последние категории формируют широкую категорию хронической РТПХ.

1) Классическая оРТПХ: клинический синдром, развивающийся в интервале до 100 дня после ТГСК или инфузии донорских лимфоцитов (ИДЛ). В основе - острое воспалительное повреждение органов и их дисфункция. Классические органы-мишени: кожа, желудочно-кишечный тракт (ЖКТ), печень. Поражение кожи проявляется пятнисто-папулезной сыпью, эпидермолизом. Поражение ЖКТ - диарея, тошнота, рвота, гемоколит, илеус. Поражение печени - гепатит с преобладанием холестаза.

2) Поздняя оРТПХ: типичные клинические проявления оРТПХ, развившиеся после дня 100 после ТГСК или инфузии донорских лимфоцитов (ИДЛ). Часто наблюдается при отмене иммуносупрессивной терапии.

3) "Синдром перекреста" оРТПХ и хРТПХ: сочетание типичных клинических проявлений оРТПХ и хРТПХ, независимо от срока развития.

4) хРТПХ: хроническое иммуноопосредованное повреждение органов и тканей, в основе которого лежит нарушение формирования иммунологической толерантности. Гистопатологически характерен исход в фиброз.

К основным факторам риска развития РТПХ относятся: различия в HLA-совместимости донора и реципиента (при классическом подходе к профилактике РТПХ), донор женского пола у реципиента мужского пола, использование СКПК в качестве источника трансплантата, аллоиммунизация донора (беременности, гемотрансфузии в анамнезе), предлеченность пациента, миелоаблативное кондиционирование, наличие цитомегаловирусной инфекции.

9. Профилактика РТПХ [67]

Целью профилактики РТПХ является предотвращение развития РТПХ в целом и в особенности тяжелых, угрожающих жизни и инвалидизирующих форм РТПХ. Профилактика РТПХ может быть основана на целенаправленном удалении эффекторов РТПХ из трансплантата ГСК ех vivo (см. раздел Заготовка трансплантата) и на фармакологическом воздействии на реципиента. Список препаратов, применяющихся в профилактике РТПХ представлен ниже [67]. Препараты группируют в схемы профилактики РТПХ, выбор схемы определяется риском развития РТПХ в паре донор-реципиент и технологической платформой ТГСК, реализуемой в трансплантационном центре.

- #Циклоспорин**, 3 мг/кг/сут

- #Метотрексат**, 10-15

- #Такролимус**, 0,02-0,03 мг/кг/сут [68]

- #Микофенолата мофетил**, 30 мг/кг/сут

- #Циклофосфамид**, 50 мг/кг/сут [69]

- #Иммуноглобулин антитимоцитарный**, кроличий 1,5-2,5 мг/кг/сут, суммарная доза 2,5-10 мг/кг [70]

- #Бортезомиб**, 1,3 [71]

- #Абатацепт**, 10 мг/кг (не более 800 мг) каждые 2 недели первые 3 дозы, далее - каждые 4 недели [72]

- #Тоцилизумаб**, 4-8 мг/кг 1 раз в неделю [73]

- #Сиролимус 4-12 мг/сут [74]

- #Эверолимус* - 1,5 2 раза в день [75]

- #Ритуксимаб**, 375 . [76]

10. Приживление транасплантата (миелореконституция) [4]

Первый этап оценки эффективности ТГСК - достижение приживления трансплантата. К критериям приживления трансплантата относятся: достижение концентрации лейкоцитов более 1 тыс. в мкл, нейтрофилов более 0.5 тыс. в мкл и тромбоцитов выше 20 тыс. в мкл в течение 3 последовательных дней. Дополнительным критерием приживления является наличие донорского химеризма в костном мозге. Первичное неприживление можно констатировать при отсутствии критериев приживления в течение 30 дней, однако, использование ряда трансплантационных технологий (например, посттрансплантационный циклофосфамид** или трансплантация 2 доз пуповинной крови) приживление может наступать и в более поздние сроки. Оппортунистические вирусные инфекции также могут задерживать приживление трансплантата.

11. Диагностика и терапия острой РТПХ [77, 78]

Диагностика оРТПХ основана на наблюдении и фиксации характерных клинических проявлений и симптомов у реципиента после инфузии трансплантата ГСК. Для верификации клинического диагноза оРТПХ необходимо выполнение биопсии вовлеченного органа и гистологического исследования. Тяжесть оРТПХ оценивается в соответствии с международной шкалой, приведенной в таблицах 1, 2 [77, 78].

Таблица 1. Клиническое стадирование острой РТПХ (тяжесть органного поражения) [77]
Степень	Кожа	Печень	Кишечник
+ (I)	Макуло-папулезная сыпь <25% поверхности тела	Билирубин, 2-3 мг/дл (34-50 мкмоль/л)	Диарея, 500-1000 мл/сутки (300-580 в сутки). *Диарея >10-15 мл/кг/24 ч либо постоянная тошнота и "+" биопсия
+ + (II)	Макуло-папулезная сыпь 25-50% поверхности тела	Билирубин, 3-6 мг/дл (51-102 мкмоль/л)	Диарея, 1000-1500 мл/сутки (580-880 в сутки). *Диарея >16-20 мл/кг/24 ч
+ + + (III)	Генерализованная эритродерма	Билирубин, 6-15 мг/дл (102-255 мкмоль/л)	Диарея, >1500 мл/сутки (>880 в сутки). *Диарея >21-25 мл/кг/24 ч
+ + + + (IV)	Десквамация и образование булл	Билирубин, >15 мг/дл (>255 мкмоль/л)	Сильная боль или илеус *Диарея >26 мл/кг/24 ч *St Jude

Таблица 2. Клиническое стадирование острой РТПХ (общая стадия (grade) [77]
Стадия	Степень			Нарушение функции
	Кожа	Печень	Кишечник
0 (отсутствует)	0	0	0	0
I (легкая)	+ до + +	0	0	0
II (умеренная)	+ до + + +	+	+	+
III (выраженная)	+ + до + + +	+ + до + + +	+ + до + + +	+ +
IV (жизнеугрожающая)	+ + до + + + +	+ + до + + + +	+ + до + + + +	+ + +

При установлении клинического диагноза оРТПХ инициируется терапия, состав которой определяется тяжестью оРТПХ. Тяжесть оРТПХ и ответ на терапию первой линии определяют прогноз течения оРТПХ и выживаемости. При отсутствии ответа на терапию первой линии, принимают решение о назначении терапии второй и последующих линий.

Методы клинической лабораторной диагностики, применяемые при диагностике и терапии РТПХ [77, 78]:

- Общий (клинический) анализ крови развернутый

- Анализ крови биохимический общетерапевтический с исследованием следующих показателей: альбумин, общий белок, общий билирубин, прямой билирубин, креатинин, мочевина, глюкоза, электролиты (K, Na, Mg, Са), аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, гамма-глутамилтрансфераза, щелочная фосфатаза, альфа-амилаза, панкреатическая амилаза, холестерин общий, триглицериды, липаза, липопротеины низкой плотности, липопротеины высокой плотности

- Исследование кислотно-основного состояния и газов крови

- Иммунофенотипирование периферической крови для выявления субпопуляционного состава лимфоцитов (основные)

- Исследование уровня иммуноглобулинов в крови

- Молекулярно-генетическое исследование химеризма кроветворения после неродственной трансплантации костного мозга

- Определение ДНК вируса Эпштейна-Барр (Epstein-Barr virus) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови, качественное исследование

- Определение ДНК цитомегаловируса (Cytomegalovirus) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови, качественное исследование

- Определение ДНК вируса герпеса 6 типа (HHV6) методом ПЦР в периферической и пуповинной крови, качественное исследование

- Определение ДНК аденовируса (Human Adenovirus) в мазках со слизистой оболочки носоглотки/ротоглотки методом ПЦР

- Микробиологическое (культуральное) исследование крови на стерильность

- Определение основных групп крови по системе АВ0, определение антигена D системы Резус (резус-фактор)

- Непрямой антиглобулиновый тест (тест Кумбса), определение содержания антител к антигенам эритроцитов в крови, определение содержания антител к антигенам групп крови, определение холодовых антиэритроцитарных антител в крови

- Прямой антиглобулиновый тест (прямая проба Кумбса)

- Совместимость эритромассы индивидуальная (Проба на совместимость по иммунным антителам реципиента и антигенам главного комплекса гистосовместимости донора)

- Определение протромбинового (тромбопластинового) времени в крови или в плазме, определение международного нормализованного отношения (МНО)

- Определение активированного частичного тромбопластинового времени

- Определение тромбинового времени в крови

- Определение антител к грибам рода аспергиллы (Aspergillus spp.) в крови

- Госпитальный скрининг: определение антигена (HbsAg) вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови, определение антител к ядерному антигену вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови, молекулярно-биологическое исследование крови на вирус гепатита С (Hepatitis С virus), молекулярно-биологическое исследование крови на Treponema pallidum, определение антител классов М, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-1 (Human immunodeficiency virus HIV 1) в крови, определение антител классов М, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-2 (Human immunodeficiency virus HIV 2) в крови

- Определение ДНК вируса гепатита В (Hepatitis В virus) в крови методом ПЦР, количественное исследование

- Определение РНК вируса гепатита С (Hepatitis С virus) в крови методом ПЦР, количественное исследование

- Иммунохроматографическое экспресс-исследование кала на токсины А и В клостридии (Clostridium difficile)

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний со слизистых оболочек/поверхности кожи

- Общеклиническое исследование спинномозговой жидкости (ликвора): исследование физических свойств спинномозговой жидкости, микроскопическое исследование спинномозговой жидкости, подсчет клеток в счетной камере (определение цитоза), цитологическое исследование клеток спинномозговой жидкости

- Общий (клинический) анализ мочи, микроскопическое исследование осадка мочи,

- Определение белка в моче

- Исследование уровня глюкозы в моче

- Исследование уровня креатинина в моче

- Исследование уровня мочевины в моче

- Микробиологическое (культуральное) исследование на стерильность крови, спинномозговой жидкости, мочи, фрагментов медицинских устройств (ЦВК, имплант)

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в биологических жидкостях (экссудатах, транссудатах)

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в биоптатах

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в бронхоальвеолярном лаваже/мокроте

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний в раневом отделяемом

- Микробиологические исследования основных возбудителей инфекционных заболеваний фекалий/ректального мазка

- Исследование уровня кальция в моче

- Исследование уровня фосфора в моче

- Исследование уровня калия, натрия, кальция, хлора в моче

- Определение активности панкреатической амилазы в крови

- Исследование уровня тропонинов I, Т в крови

- Исследование функции нефронов по клиренсу креатинина (проба Реберга),

- Сортировка клеточных линий методом проточной цитофлуориметрии (исследование биологического материала методом проточной цитофлуориметрии)

- Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH) (после гипотонической обработки клеток, на готовой суспензии клеток, на отпечатках и мазках) (1 ДНК-зонд)* (молекулярно-цитогенетическое исследование (FISH-метод) на одну пару хромосом)

Инструментальные методы и пособия, применяемые при диагностике и терапии РТПХ [77, 78]

- Прицельная рентгенография грудной клетки (2 проекции)

- Компьютерная томография органов брюшной полости и забрюшинного пространства с внутривенным болюсным контрастированием

- Спиральная компьютерная томография придаточных пазух носа

- Компьютерная томография органов грудной полости

- Магнитно-резонансная томография головного мозга с контрастированием под наркозом - 3Т (Тесла)

- Ультразвуковое исследование почек, надпочечников, мочевого пузыря, органов брюшной полости (печень, желчный пузырь, поджелудочная железа, селезенка), заброшенного пространства, малого таза

- Регистрация электрокардиограммы; расшифровка, описание и интерпретация электрокардиографических данных (дети 1-18 лет)

- Суточное мониторирование артериального давления

- Эргоспирометрия

- Исследование диффузионной способности легких (дети >10 лет)

- Дуплексное сканирование брахиоцефальных артерий с цветным допплеровским картированием кровотока

- Эхокардиография в динамике (предоставляется пациентам, находящимся в стационаре)

- Дуплексное сканирование нижней полой вены и вен портальной системы

- Получение цитологического препарата костного мозга путем пункции, цитологическое исследование мазка костного мозга (миелограмма)

- Спинномозговая пункция

- Анестезиологическое пособие (включая раннее послеоперационное ведение)

- Эзофагогастродуоденоскопия

- Колоноскопия

- Биопсия пищевода, желудка, двенадцатиперстной кишки с помощью эндоскопии

- Биопсия ободочной кишки эндоскопическая

- Биопсия прямой кишки с помощью видеоэндоскопических технологий

- Биопсия кожи

- Бронхоскопия диагностическая

- Электроэнцефалография с видеомониторингом

Медикаменты, используемые в терапии РТПХ (суточная доза) [78-80]:

- #Метилпреднизолон**, 2 мг/кг/сут

- Иммуноглобулин антитимоцитарный** кроличий - кроличий 1,5-2,5 мг/кг/сут, суммарная доза 2,5-10 мг/кг [70]

- Циклоспорин**, 1-3 мг/кг/сут

- #Метотрексат**, 5-15 [81]

- #Такролимус**, 0,03 мг/кг/сут [68]

- #Микофенолата мофетил**, 190-1600 [82]

- #Циклофосфамид**, 50 мг/кг/сут [69]

- #Алемтузумаб**, 0,3-2 мг/кг (суммарная доза, вводимая в течение 2-6 дней) [83]

- Ибрутиниб**, 140-420 мг/сут

- #Руксолитиниб**, 2,5-10 2 раза в сутки [84]

- #Этанерцепт**, 0,4 мг/кг 2 раза в неделю [85]

- #Бортезомиб**, 1,3 мг/кг/сут [71]

- #Абатацепт**, 10 мг/кг (не более 800 мг) каждые 2 недели первые 3 дозы, далее - каждые 4 недели [72]

- #Тоцилизумаб**, 4-8 мг/кг 1 раз в неделю [73]

- #Сиролимус 2-4 мг/сут [74]

- #Эверолимус**, 1,5 2 раза в день [75]

- #Инфликсимаб**, 10 мг/кг 1 раз в неделю [86]

- #Ритуксимаб**, 375 . [76]

- Глюкокортикоиды для местного применения

- Топические ингибиторы кальциневрина (из группы "Препараты для лечения дерматита, кроме глюкокортикостероидов", D11AH по АТХ классификации) - #такролимус**, #пимекролимус** в форме для наружного применения [87, 88]

- Мезенхимальные стромальные клетки

- #Иматиниб**, 65-260 [89]

12. Диагностика и терапия хронической РТПХ [90]

Диагноз хронической РТПХ устанавливается при выявлении одной диагностической манифестации либо одного отличительного проявления с подтверждением биопсией, лабораторными тестами или рентгенологическим исследованием (табл. 3).

Таблица 3 - Характерные признаки и диагностические критерии хронической РТПХ [91]
Орган или локализация	Диагностические (достаточные для постановки диагноза хронической РТПХ)	Отличительные (наблюдаемые при хронической РТПХ, но недостаточные для постановки диагноза)	Другие проявления	Общие (для острой и хронической РТПХ)
Кожа	- пойкилодерма - лихеноиды - склеротические изменения - кольцевидная склеродермия - склерозированные лихеноиды	- депигментация - папулосквамозные поражения	- нарушение потоотделения - ихтиоз - кератоз - гипопигментация - гиперпигментация	- эритема - макуло-папулезная сыпь - зуд
Ногти		- дистрофия - вертикальная исчерченность - лизис ногтевых пластинок - птеригиум ногтя (гипертрофия эпонихия) - симметричная потеря ногтевых пластинок
Волосяной покров		- возобновление алопеции с/без рубцеванием (после восстановления роста волос после химиотерапии) - потеря волос на теле - шелушение, папулосквамозные участки	- истончение волос, обычно очаговое, жесткие и тусклые волосы (не связано с эндокринными и иными нарушениями), - преждевременное поседение волос
Ротовая полость	- лихеноидные проявления	- ксеростомия - мукоцеле - атрофия слизистой - псевдомембраны - язвенное поражение		- гингивит - мукозит - эритема - боль
Глаза		- сухость, зуд, боли в глазах - рубцующий конъюнктивит - сухой кератоконъюнктивит - точечная кератопатия	- фотофобия - периорбитальная гиперпигментация - блефарит (эритема и отек век)
Гениталии	- лихеноиды - рубцевание и стеноз влагалища, фимоз или стеноз уретры	- эрозии - трещины - язвы
ЖКТ	- пищеводные спайки - стриктуры или стеноз верхней и средней третей пищевода		- экзокринная панкреотическая недостаточность	- анорексия - тошнота - рвота - диарея - потеря веса - нарушение развития у детей
Печень				- общий билирубин, ЩФ*(1) в 2 р. > нормы - АЛТ*(2) или АСТ*(3) в 2 раза > нормы
Легкие	- облитерирующий бронхиолит, подтвержденный биопсией - синдром облитерирующего бронхиолита	- облитерирующий бронхиолит, подтвержденный радиологически и тестами - воздушные ловушки или бронхоэктазы	- облитерирующий бронхиолит с организующейся пневмонией - рестриктивная болезнь легких
Мышцы, фасции, суставы	- фасциит - тугоподвижность суставов или контрактуры вследствие склероза	- миозит или полимиозит (проксимальная мышечная слабость; миалгии нехарактерны)	- отек - судороги в мышцах - артралгия или артрит
Гемопоэз и иммунные нарушения			- тромбоцитопения - эозинофилия - лимфопения - гипо- или гипергаммаглобулинемия - аутоантитела (АИГА*(4), ИТП*(5)) - феномен Рейно
Другие			- выпоты в перикард или плевральную полость - асцит - периферическая нейропатия - нефротический синдром - миастения gravis - нарушения сердечной сократимости или кардиомиопатии

Тяжесть хРТПХ определяется на основании числа пораженных органов и степени выраженности нарушения функции пораженного органа (см. табл. 4) [92].

- Незначительная (mild) хРТПХ - вовлечение 1-2 органов или локализаций (кроме легких), без клинически значимого функционального нарушения (максимально 1 балл во всех пораженных органах)

- Умеренная (moderate) хРТПХ - вовлечение по меньшей мере одного органа или участка с клинически значимой, но не обширной дисфункцией (максимально 2 балла), либо 3-х и более органов без нарушения клинической функции (максимально 1 балл в каждом органе), либо поражение легких не более 1 балла.

- Тяжелая (severe) хРТПХ - значительная дисфункция (3 балла в каждом органе), либо поражение легких (2 балла и более).

Таблица 4 - Балльная оценка проявлений хронической РТПХ [92]
Орган	Балл 0	Балл 1	Балл 2	Балл 3
Шкалы: Индекс Карновского (ИК) Индекс Ланского (ИЛ)	отсутствие симптомов или полная активность (ECOG* 0; ИК или ИЛ 100%)	симптоматика, амбулаторное наблюдение, ограничение физической активности (ECОG 1, ИК или ИЛ 80-90%)	симптоматика, амбулаторное наблюдение, способность к самообслуживанию, >50% бодрствования вне постели (ECОG 2, ИК или ИЛ 60-70%)	симптоматика, ограничение самообслуживания, >50% бодрствования в постельном режиме (ECOG 3-4, ИК или ИЛ <60%)
Кожа Клинические проявления: - пятнисто-папулезная сыпь - лихеноиды - папулосквамозные участки, ихтиоз - гиперпигментация - гипопигментация - кератоз - эритема - эритродермия - пойкилодерма - склеротические изменения - зуд - повреждение волос - нарушение структуры ногтей ППТ - % вовлеченной площади	нет симптомов	<18% ППТ с признаками заболевания но без склеротических изменений	19-50% ППТ или поверхностные склеротические изменения (не глубокие, возможность щипка)	>50% ППТ или глубокие склеротические изменения или нарушение мобильности, язвенные поражения, или выраженный зуд
Полость рта - Лейкоплакии	нет симптомов	незначительные симптомы с признаками заболевания но без значительного ограничения перорального приема пищи	умеренные проявления с признаками заболевания и с частичным ограничением перорального приема	выраженные симптомы с признаками заболевания и выраженным ограничением перорального приема
Глаза - Сухой кератоконъюнктивит (подтвержден офтальмологом) - Тест Ширмера (мм)	нет симптомов	легкая сухость, без нарушения ежедневной активности (ЕДА) (капли раз в день) или асимптоматическое течение сухого кератоконъюнктивита	умеренная сухость с частичным нарушением ЕДА (капли >3х раз в день), без нарушения зрения	выраженная сухость со значительным нарушением ЕДА (специальные гели для обезболивания) или неспособность работать вследствие поражения глаз либо потеря зрения вследствие сухого кератоконъюнктивита
ЖКТ - стриктуры пищевода - дисфагия - анорексия - тошнота - рвота - диарея - потеря веса за 3 мес. - нарушение глотания	нет симптомов	дисфагия, анорексия, тошнота, рвота, боли в животе или диарея без значительной потери веса (<5%)	симптомы ассоциированы с незначительной либо умеренной потерей веса (5-15%)	симптомы ассоциированы со значительной потерей веса >15%, требуют нутритивной поддержки для обеспечения основных энергетических затрат либо дилатации пищевода
Печень	общий билирубин в норме, АЛТ или ЩФ <3х норм	общий билирубин в норме, АЛТ норм, или ЩФ** норм	общий билирубин повышен, но мг/дл, или АЛТ > - 5 норм	общий билирубин >3 мг/дл
Легкие***	нет симптомов ОВФ1 > 80% или LFS = 2	незначительные симптомы (одышка при подъеме по лестнице) ОФВ1 60-79% или LFS 3-5	умеренные симптомы (одышка при ходьбе по плоскости) ОВФ1 40-59% или LFS 6-9	выраженные симптомы (одышка в покое; требующая ) ОФВ1 или LFS 9-12
Суставы и фасции Для оценки активности движений (АД) используется фотографическая шкала объема движений в суставах (Р-ROM)	нет симптомов	легкая тугоподвижность рук или ног, нормальная или несколько сниженная АД, не влияющая на ЕДА	тугоподвижность рук или ног либо контрактуры суставов, эритема вследствие фасциита, умеренное снижение АД и от незначительного до умеренного ограничения ЕДА	контрактуры со значительным снижением АД и выраженным ограничением ЕДА (невозможность обуться, завязать шнурки, застегнуть рубашку, одеться самостоятельно и т.д.)
Гениталии Активная половая жизнь	нет симптомов	незначительные проявления при осмотре, без влияния на коитус и минимальный дискомфорт при гинекологическом обследовании	умеренные проявления при осмотре, с незначительной диспареунией или дискомфортом при гинекологическом обследовании	выраженные симптомы (стриктуры, лабиаагглютинация с язвенным поражением) и сильная боль при коитусе либо невозможность влагалищной пенетрации

Примечания. -

* ECOG (Eastern Cooperative Oncology Group), шкала Европейской Кооперативной Группы Онкологов

** ЩФ может быть повышена у растущих детей, без отражения печеночной дисфункции

*** Оценка легочной функции по шкале должна осуществляться с учетом клиники и функции внешнего дыхания. Lung Function Score (LFS) - наиболее распространенная шкала, отражающая глобальную оценку функции легких после установления диагноза облитерирующего бронхиолита. Процент FEV1 и DLCO необходимо перевести в численную шкалу: >80% = 1; 70-79% = 2; 60-69% = 3; 50-59% = 4; 40-49% = 5; <40% = 6. LFS = FEV1 + DLCO, в норме 2-12.

Сокращения: ИК - индекс Карновского, ИЛ - индекс Ланского, ППТ - площадь поверхности тела, ЕДА - ежедневная активность, ЖКТ - желудочно-кишечный тракт, ЩФ - щелочная фосфатаза, АЛТ - аланинаминотрансфераза, АСТ - аспартатаминотраснфераза, LFS - lung function score: оценка функции легких, ОВФ1 - объем формированного выдоха за 1 сек., DLCO - диффузионная способность легких по монооксиду углерода, АД - активность движений, Р-ROM - photographic range of motions, фотографическая шкала движения в суставах

С целью своевременной постановки диагноза и раннего начала терапии, предупреждения развития жизнеугрожающих состояний и инвалидизации, необходимо проведение систематической и тщательной оценки органов и систем пациентов. Это также помогает оценивать ответ на терапию и определять дальнейшую стратегию лечения. Частота систематической оценки вовлеченности органов и тяжести хРТПХ составляет 1 раз в 4 недели.

Терапия хРТПХ основана на фармакологической иммуносупрессии. Целью терапии является восстановление функции пораженных органов, предотвращение или минимизация инвалидизации, восстановление качества жизни. Базовым препаратом является преднизолон в дозе 1 мг/кг/сутки (или метилпреднизолон в эквипотентной дозе). Подход к дополнительной лекарственной терапии и терапии второй линии определяется тяжестью процесса, набором вовлеченных органов, базовой иммуносупрессивной терапией на момент манифестации хРТПХ.

13. Профилактика и терапия инфекционных осложнений [93]

Вторичный иммунодефицит у реципиентов ТГСК формируется вследствие основного заболевания, базовой терапии, режима кондиционирования, режима профилактики и терапии РТПХ и собственно РТПХ. Иммунодефицит носит комбинированный характер и включает нарушения всех основных компонентов иммунной защиты: 1) нарушение барьерной функции кожи и слизистых; 2) нарушение нормальной микробиоты с потерей колонизационной резистентности; 3) гранулоцитопения; 4) моноцитопения; 5) гуморальный иммунодефицит; 6) клеточный иммунодефицит; Характер иммунодефицита и его тяжесть варьирует на разных этапах ТГСК. В первые 30 дней (до приживления и ранние сроки после приживления) доминирует гранулоцитопения и нарушение барьерной функции кожи и слизистых. Между 30 и 100 днем доминирует клеточный иммунодефицит. После 100 дней сохраняется гуморальный иммунодефицит, а выраженность клеточного варьирует в зависимости от объема иммуносупрессивной терапии. Характер иммунодефицита определяет предрасположенность к развитию определенного типа инфекций и диктует набор мер по профилактике и терапии инфекционных осложнений в соответствии с периодом после ТГСК.

а. Бактериальные инфекции [94]

Основными факторами риска развития бактериальных инфекций у реципиентов ТГСК на ранних сроках являются гранулоцитопения, использование центральных венозных катетеров, мукозит, дерматит, предсуществующая колонизация мультирезистентными патогенами, рефрактерное течение основного заболевания. Бактериальные инфекции на ранних сроках вызываются Грамположительными кокки и Грам-отрицательными палочками. На поздних сроках основным фактором риска становится дефицит гуморального звена иммунитета и гипоспления, предрасполагающие к инфекциям инкапсулированными микроорганизмами (пневмококк, гемофильная палочка, менингококк). Основными типами бактериальных инфекций после ТГСК являются пневмония, синуситы, проктиты, инфекции мягких тканей и бактериемия/сепсис.

Профилактика бактериальных инфекций включает санитарно-эпидемические меры: контроль доступа, обработка рук персонала и ухаживающего члена семьи, микробиологическая безопасность продуктов питания и воды. Фармакологическая профилактика бактериальных инфекций возможна в соответствии с политикой инфекционного контроля в стационаре.

Диагностика бактериальных инфекций включает клиническую, инструментальную и лабораторную диагностику.

Терапия бактериальных инфекций у реципиентов ТГСК проводится по принципу эмпирической терапии с последующей коррекцией в соответствии с результатами микробиологического исследования и этапной эскалацией или дезэскалацией в зависимости от динамики течения инфекционного процесса.

b. Вирусные инфекции [95]

Основными факторами риска развития вирусных инфекций у реципиентов ТГСК являются лимфопения, клеточный иммунодефицит, течение РТПХ, терапия кортикостероидами системного действия, терапия лимфодеплетирующими моноклональными антителами, использование неродственных и частично совместимых доноров, наличие персистирующей вирусной инфекции у пациента и/или донора до ТГСК, ex vivo Т деплеция, рефрактерное течение основного заболевания. Основными вирусными патогенами у реципиентов ТГСК являются цитомегаловирус (ЦМВ), Эпштейн-Барр вирус, Герпес вирус человека 6 типа, Вирус простого герпеса, вирус варицелла-зостер, парвовирус В19, аденовирус, респираторно-синтициальный вирус. Вирусные инфекции у реципиентов ТГСК могут протекать в типичной форме, однако характерно тяжелое течение и генерализация инфекции.

Профилактика вирусных инфекций включает санитарно-эпидемические меры: контроль доступа, обработка рук персонала и ухаживающего члена семьи, микробиологическая безопасность продуктов питания и воды, микробиологическая безопасность компонентов крови. Специфической мерой профилактики является выбор донора, соответствующего пациенту в части экспозиции к ключевым вирусным патогенам, и выбор технологии ТГСК с минимизацией объема и длительности фармакологической иммуносупрессии после ТГСК. Фармакологическая профилактика вирусных инфекций проводится в отношении вирусов семейства герпес в соответствии с индивидуальным риском развития инфекции соответствующим представителем группы.

Диагностика вирусных инфекций включает клиническую, инструментальную и лабораторную диагностику.

Терапия вирусных инфекций у реципиентов ТГСК проводится по принципу упреждающей терапии и эмпирической терапии с последующей коррекцией в соответствии с результатами микробиологического исследования и этапной эскалацией или дезэскалацией в зависимости от динамики течения инфекционного процесса. Упреждающая терапия является стандартом для контроля ЦМВ инфекции и включает еженедельный количественный мониторинг вирусной нагрузки в крови пациента и назначение противовирусной терапии при превышении пороговых значений. Аналогичная тактика применяется для ЭБВ, аденовируса и ГВЧ 6 типа в группе высокого риска.

с. Грибковые инфекции [96, 97]

Основными факторами риска развития вирусных# инфекций у реципиентов ТГСК являются гранулоцитопения, лимфопения, клеточный иммунодефицит, течение РТПХ, терапия кортикостероидами системного действия, терапия лимфодеплетирующими моноклональными антителами, использование неродственных и частично совместимых доноров, наличие колонизации слизистых дрожжевыми грибами, инвазивная грибковая инфекции у пациента до ТГСК, ex vivо Т деплеция, рефрактерное течение основного заболевания. Основными грибковыми патогенами у реципиентов ТГСК являются грибы рода Candida, рода Aspergillus и Зигомицеты. Грибковые инфекции у реципиентов ТГСК могут протекать в виде поверхностного микоза, однако характерно тяжелое течение, инвазивный рост и генерализация инфекции.

Профилактика грибковых инфекций включает санитарно-эпидемические меры: контроль качества воздуха, контроль доступа, обработка рук персонала и ухаживающего члена семьи, микробиологическая безопасность продуктов питания и воды. Специфической мерой профилактики является выбор технологии ТГСК с минимизацией объема и длительности фармакологической иммуносупрессии после ТГСК. Фармакологическая профилактика грибковых инфекций проводится в соответствии с индивидуальным риском развития инфекции в конкретный период после ТГСК.

Диагностика грибковых инфекций включает клиническую, инструментальную и лабораторную диагностику. В зависимости от локальной эпидемиологии грибковых инфекций может использоваться мониторинг биомаркеров грибковых инфекций и упреждающая тактика терапии.

Терапия грибковых инфекций у реципиентов ТГСК проводится по принципу упреждающей терапии и эмпирической терапии с последующей коррекцией в соответствии с результатами микробиологического исследования и этапной эскалацией или дезэскалацией в зависимости от динамики течения инфекционного процесса.

14. Профилактика и терапия специфических (органных) осложнений

а. Геморрагический цистит [98]

Геморрагический цистит - специфическое осложнение ТГСК, развивающееся вследствие повреждения слизистой мочевого пузыря препаратами, применяемыми в составе кондиционирования и/или инфекционного процесса. Наибольший риск развития раннего геморрагического цистита характерен для режимов кондиционирования, включающих высокие дозы циклофосфамида**, бусульфана** и тотального облучения тела. Поздний геморрагический цистит ассоциирован с инфекцией полиомавирусом ВK, некоторыми серотипами аденовируса и, реже, цитомегаловирусом. Определенную роль в развитии геморрагического цистита играет РТПХ. Клинически геморрагический цистит проявляется дизурией, гематурией (от микрогематурии до массивного кровотечения обтурации уретры сгустками). Профилактика геморрагического цистита включает выбор режима кондиционирования с минимизацией экспозиции к высоким дозам циклофосфамида**, режим гиперинфузии во время терапии циклофосфамидом**, системное введение месны**. Терапия раннего геморрагического цистита включает инфузию, форсированный диурез, системную гемостатическую терапию, локальный гемостаз. Терапия позднего геморрагического цистита включает инфузию, форсированный диурез, системную гемостатическую терапию, локальный гемостаз, противовирусную терапию.

b. Вено-окклюзионная болезнь печени (синдром обструкции синусоидов) [99, 100]

Вено-окклюзионная болезнь печени - специфическое осложнение ТГСК, обусловленное повреждением эндотелия синусоидов портальной системы, развитием микротромбоза и окклюзии сосудов портальной системы, с исходом в портальную гипертензию и печеночную недостаточность. Факторами риска веноокклюзивной болезни (ВОБ) печени являются миелоаблативные режимы кондиционирования с использованием таких препаратов, как бусульфан**, циклофосфамид** или этопозид**, а также применение тотального облучения тела. Вероятность развития данной патологии также увеличивают флударабин**, сиролимус и ингибиторы кальциневрина. Кроме того, риском развития ВОБ являются предсуществующие нарушения функции печени (цирроз, фиброз), гепатит С, перегрузка печени железом (ферритин сыворотки >1000 нг/дл).

Диагноз ВОБ устанавливается на основании следующих критериев:

Наличие двух и более симптомов:

- Тромбоцитопения, рефрактерная к трансфузиям тромбоконцентрата

- Необъяснимая прибавка массы тела в течение 3 дней, несмотря на диуретическую терапию или увеличение массы тела >5% от исходного значения

- Гепатомегалия

- Асцит

- Повышение уровня билирубина выше исходного значение в течение 3 дней или мг/дл в течение 72 часов.

Профилактика ВОБ включает выбор режима кондиционирования в соответствии с анализом факторов риска ВОБ, в частности отказ от применения высоких доз бусульфана** и комбинации алкилирующих средств у пациентов с предсуществующим поражением печени. Медикаменты, используемые в профилактике и терапии ВОБ суммированы ниже.

с. Мукозит [101]

Поражение слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, обусловленное цитотоксичностью химиопрепаратов и лучевой терапии, входящих в состав кондиционирования. Основными факторами риска развития являются состав кондиционирования и дозы противоопухолевых препаратов. Локализация поражения варьирует от ограниченных форм (стоматит, эзофагит, гастрит, энтероколит) до генерализованного поражения. Определенный вклад в развитие мукозита вносят инфекции, в частности вирус простого герпеса и грибы рода Candida. Клинические проявления мукозита включают болевой синдром, отек, гиперемию и изъязвление слизистой, нарушение глотания, диарейный синдром. Профилактика мукозита включает гигиену полости рта, стоматологическое пособие на этапе подготовки пациента к ТГСК, медикаментозное подавление желудочной секреции и антацидов. Терапия мукозита носит симптоматический характер, центральной задачей является адекватное обезболивание и обработка антисептическими и дезинфицирующими средствами.

d. Синдром задней обратимой энцефалопатии (PRES) [102]

Синдром задней обратимой энцефалопатии (posterior reversible encephalopathy syndrome). Специфическое неврологическое осложнение ТГСК, в основе которого лежит локальный субкортикальный обратимый вазогенный отек вещества головного мозга. Характерна ассоциация с терапией ингибиторами кальциневрина, артериальной гипертензией. Клиническая картина включает головную боль, судороги, нарушение зрения, энцефалопатию, фокальный неврологический дефицит. Диагноз верифицируется характерными изменениями на МРТ головного мозга. Терапия включает отмену препаратов, ассоциированных с развитием PRES, контроль артериальной гипертензии.

е. Респираторный дистресс-синдром [103]

Острый респираторный дистресс-синдром (РДС) является частым осложнением после ТГСК и может развиваться в рамках септического процесса, синдрома приживления трансплантата, синдрома выброса цитокинов, поражения легких, ассоциированного с трансфузиями (TRALI). РДС у реципиентов ТГСК обусловлен повышенной проницаемостью капиллярного русла легких и развитием некардиогенного отека легких. Клинически проявляется дыхательной недостаточностью, гипоксемией, крепитирующими хрипами при аускультации. При визуализации характерно диффузное снижение прозрачности легочной ткани. Специфической профилактики РДС не разработано. Терапия включает респираторную поддержку, от дотации кислорода до искусственной вентиляции легких, высокие дозы кортикостероидов, строгое соблюдение баланса жидкости.

f. Тромботическая микроангиопатия [104]

Тромботическая микроангиопатия, ассоциированная с ТГСК (ТА-ТМА) - это гетерогенная группа заболеваний, характеризующаяся микроангиопатической гемолитической анемией и тромбоцитопенией потребления вследствие образования сгустков в микроциркуляторном русле, что является причиной ишемического поражения органов.

При развитии ТА-ТМА повреждение эндотелия приводит к активации воспалительного и прокоагулянтного каскадов, что в результате приводит к окклюзии капилляров. Однако, в отличие от других эндотелиальных синдромов, в развитии ТА-ТМА может играть роль дисрегуляция системы комплемента. Это в свою очередь способствует продукции С4d фракции комплемента и мембран-атакующего комплекса С5b-9. Клинические и лабораторные проявления представлены в таблице 7. К факторам риска развития ТА-ТМА относят применение ингибиторов кальциневрина, вирусные инфекции (ЦМВ, аденовирус, ВK-вирус и некоторые другие), грибковые инфекции и РТПХ. Терапия ТА-ТМА включает снижение дозы или отмену ингибиторов кальциневрина, посиндромную сопроводительную терапию и специфическую лекарственную терапию (см. ниже).

15. Нутритивная поддержка [105]

Реципиенты ТГСК сталкиваются с существенным дефицитом питания, обусловленным комплексом факторов: стоматит, эзофагит, гастроэнтероколит, разрушение микробиома кишечника, потеря аппетита, тошнота/рвота, термическая обработка пищи. Коррекция нутритивной недостаточности основана на технологиях клинического питания, включая энтеральное и парентеральное питание. Препараты энтерального и парентерального#, применяемые в клиническом питании реципиентов ТГСК приведены ниже.

16. Гемотрансфузионная терапия [106]

В процессе ТГСК происходит замена гемопоэза реципиента на гемопоэз донора. В процессе ТГСК формируется транзиторная аплазия кроветворения, длительность которой составляет от нескольких дней до нескольких недель. Аплазия кроветворения по определению развивается в первые 2-3 недели после кондиционирования, однако может развиваться и на более поздних сроках после ТГСК в результате дисфункции трансплантата различной этиологии. В заместительной трансфузионной терапии используются следующие гемокомпоненты:

1. Эритроцитная взвесь

2. Тромбоконцентрат

3. Концентрат гранулоцитов

4. Свежезамороженная плазма

Донор и реципиент могут быть несовместимы по различным системам антигенов группы крови. В зависимости от характера несовместимости по системе АВ0 выделяют большая (major), малая (minor) и смешанная (major + minor). Под большой (major) несовместимостью по АВ0-системе подразумевают наличие в плазме у реципиента агглютининов, активных в отношении донорских эритроцитов, например при проведении ТГСК от донора с А(II) группой крови пациенту с 0(I) группой. Малая (minor) несовместимость по АВ0-системе обусловлена обратной ситуацией, то есть наличием в плазме донора ГСК агглютининов, активных в отношении эритроцитов реципиента, например при ТГСК от донора с 0(I) группой крови реципиенту с А(II) группой. О смешанной (major + minor) несовместимости говорят в том случае, когда и у донора, и у реципиента присутствуют агглютинины, активные в отношении эритроцитов реципиента и донора соответственно. В связи с вероятностью развития тяжелых осложнений, связанных с групповой АВ0-несовместимостью донора и реципиента ГСК, сформулированы правила проведения трансфузионной терапии после трансплантации (начиная с дня миелоинфузии), таблица 5.

Таблица 5. Правила проведения трансфузионной терапии у пациентов после ТГСК

AB0-несовместимость	Реципиент	Донор	Эритромасса	Тромбоконцентрат и СЗП
Большая	0	А	0	А, АВ
	0	В	0	В, АВ
	0	АВ	0	АВ
	А	АВ	А, 0	АВ
	В	АВ	В, 0	АВ
Малая	А	0	0	А, АВ
	В	0	0	В, АВ
	АВ	0	0	АВ
	АВ	А	А, 0	АВ
	АВ	B	В, 0	АВ
Смешанная	А	В	0	АВ
	В	А	0	АВ

Профилактика посттрансфузионной реакции трансплантат-против-хозяина.

Посттрансфузионная (ассоциированная с трансфузией компонентов крови) реакция трансплантат-против-хозяина (ПТ-РТПХ) - одно из наиболее тяжелых и в большинстве случаев фатальных осложнений у иммунокомпрометированных пациентов. В основе патогенеза развития ПТ-РТПХ лежит приживление трансфузированных вместе с компонентами крови Т-лимфоцитов, их дальнейшая активация, пролиферация и цитотоксическое поражение различных органов-мишеней реципиента, таких как кожа, печень, кишечник и костный мозг. В редких случаях ПТ-РТПХ иногда может развиваться и у иммунокомпетентных пациентов, например, когда донор и реципиент имеют схожие HLA-гаплотипы.

Стандартная процедура профилактики ПТ-РТПХ - гамма-облучение компонентов крови в дозе 25 Гр [107].