Приложение Б (обязательное). Методика приготовления аттестованных смесей углеводородов АС4-УВ, АС5-УВ и смолистых компонентов АС1-СК, АС2-СК, АС3-СК для установления градуировочных характеристик приборов и контроля точности измерений нефтяных компонентов люминесцентным методом

Приложение Б
(обязательное)

Методика приготовления
аттестованных смесей углеводородов АС4-УВ, АС5-УВ и смолистых компонентов АС1-СК, АС2-СК, АС3-СК для установления градуировочных характеристик приборов и контроля точности измерений нефтяных компонентов люминесцентным методом

Б.1 Назначение и область применения

Настоящая методика регламентирует процедуру приготовления аттестованных смесей углеводородов и смолистых компонентов, предназначенных для установления градуировочных характеристик приборов и контроля точности измерений массовой концентрации углеводородов и смолистых компонентов в природных и очищенных сточных водах люминесцентным методом с использованием тонкослойной хроматографии.

Б.2 Метрологические характеристики

Метрологические характеристики аттестованных смесей приведены в таблице Б.1.

Таблица Б.1 - Метрологические характеристики аттестованных смесей углеводородов и смолистых компонентов

Наименование характеристики	Значение характеристики для аттестованной смеси
	АС4-УВ	АС5-УВ	АС1-СК	АС2-СК	АС3-СК
Аттестованное значение массовой концентрации углеводородов и смолистых компонентов,	1,00	0,100	1,00	0,100	0,030
Границы погрешности аттестованного значения концентрации углеводородов и смолистых компонентов, (Р = 0,95)

Б.3 Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы

Б.3.1 Флуориметр лабораторный "Квант-5", или флуориметр "Квант-7", или анализатор жидкости типа "Флюорат-02", или аналогичные по характеристикам средства измерений.

Б.3.2 Весы неавтоматического действия (лабораторные) специального (I) класса точности по ГОСТ Р 53228 или ГОСТ OIML R 76-1, действительная цена деления (шкалы) 0,0001 г.

Б.3.3 Колбы мерные 2-го класса точности, исполнения 2 по ГОСТ 1770, вместимостью: 25 - 2 шт.

Б.3.4 Пипетки градуированные 2-го класса точности, исполнения 1, 2 по ГОСТ 29227, вместимостью: 1 - 1 шт., 5 - 4 шт.

Б.3.5 Цилиндры мерные 2-го класса точности, исполнения 1 или 3 по ГОСТ 1770, вместимостью: 25 - 2 шт., 1000 - 1 шт.

Б.3.6 Цилиндр мерный 2-го класса точности, исполнения 2 по ГОСТ 1770, вместимостью 50 .

Б.3.7 Пробирки градуированные исполнения 2, с взаимозаменяемым конусом 14/23, с притёртыми стеклянными пробками по ГОСТ 1770, вместимостью 10 - 10 шт., 15 - 1 шт., 20 - 1 шт., 25 - 1 шт.

Б.3.8 Стаканчик для взвешивания (бюкс) СВ-19/9 по ГОСТ 25336 - 2 шт.

Б.3.9 Стаканы типа Н исполнения 2, из стекла группы ТХС по ГОСТ 25336, вместимостью: 5 или 10 - 2 шт., 50 - 2 шт.

Б.3.10 Колбы конические типа Кн исполнения 1 со взаимозаменяемыми конусами 14/23, 29/32, из стекла группы ТС, с притёртыми стеклянными пробками по ГОСТ 25336, вместимостью 50 - 2 шт.

Б.3.11 Воронки делительные типа ВД исполнения 1 или 3, из стекла группы ХС по ГОСТ 25336, вместимостью 1000 - 2 шт.

Б.3.12 Воронки лабораторные типа В по ГОСТ 25336, диаметром 25 или 36 мм - 2 шт.

Б.3.13 Пластинки стеклянные длиной 18 см, шириной 12 см - 2 шт.

Б.3.14 Пипетки Пастера по [2] - 2 шт.

Б.3.15 Шпатель.

Б.3.16 Облучатель хроматографический УФС-254/365 по [1].

Б.3.17 Шкаф сушильный общелабораторного назначения.

Б.3.18 Углерод четырёххлористый по ГОСТ 20288, х.ч.

Б.3.19 Хлороформ по ГОСТ 20015, очищенный.

Б.3.20 н-Гексан (далее - гексан) по [4], х.ч.

Б.3.21 Натрий сернокислый, безводный (натрия сульфат) по ГОСТ 4166, ч.

Б.3.22 Оксид алюминия для хроматографии по [5] или оксид алюминия активный по ГОСТ 8136, ч.д.а.

Б.3.23 Кислота уксусная, ледяная по ГОСТ 61, ч.д.а.

Б.3.24 Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента" по [6].

Б.4 Процедура приготовления аттестованных смесей углеводородов и смолистых компонентов

Б.4.1 Приготовление аттестованных смесей углеводородов АС4-УВ и смолистых компонентов АС1-СК

Б.4.1.1 Аттестованные смеси углеводородов и смолистых компонентов готовят из препарата, полученного выделением их из льяльных или сточных вод или же из нефтепродуктов, в отношении которых известен источник поступления и которые преобладают в загрязнении данного водного объекта.

Б.4.1.2 Выделение из льяльных и сточных вод осуществляют следующим образом. В делительную воронку вместимостью 1 помещают от 700 до 800 льяльной (сточной) воды и выполняют процедуры в соответствии с 10.2 и 10.3.1-10.3.4. Для экстракции используют порции растворителя по 25 .

Б.4.1.3 После проведения хроматографического разделения и выделения зоны углеводородов, её счищают скальпелем в воронку с бумажным фильтром и элюируют в стакан вместимостью 50 с помощью 20 четырёххлористого углерода (порциями по 2 ). Элюат упаривают при комнатной температуре до объёма от 1 до 2 .

Зоны смол и асфальтенов объединяют и счищают скальпелем в одну воронку с бумажным фильтром и элюируют 20 хлороформа таким же образом, как и углеводороды. Элюат упаривают при комнатной температуре в стаканах вместимостью 50 до объёма от 1 до 2 .

На весах специального класса точности взвешивают бюкс или стакан вместимостью от 5 до 10 , массу которого записывают. Переносят сконцентрированный элюат в предварительно взвешенный стакан.

Б.4.1.4 Аналогичным образом, минуя стадию экстракции, проводят выделение углеводородов, смол и асфальтенов из нефтей или нефтепродуктов, являющихся вероятным источником загрязнения водного объекта. Для этого не менее 25 мг нефти растворяют в 0,4 хлороформа, наносят полученный раствор сплошной полосой на две пластинки с оксидом алюминия и хроматографируют в соответствии с 10.3.1-10.3.4. Одни и те же зоны с обеих пластинок объединяют и поступают в соответствии с Б.4.1.3.

Б.4.1.5 Концентраты во взвешенных стаканах упаривают при комнатной температуре до постоянной массы (разница между последовательными взвешиваниями - не более 0,2 мг), которую записывают. Рассчитывают по разнице массу полученных навесок нефтяных компонентов. Значения полученных навесок должны быть не менее 10 мг. Если навеска не достигает 10 мг, то следует повторить процедуру по Б.4.1.1-Б.4.1.4 и поместить вновь полученный концентрат в тот же стаканчик. Массовая доля углеводородов и смолистых компонентов в полученном препарате составляет не менее 98%.

Б.4.1.6 Навеску углеводородов растворяют в четырёххлористом углероде объёмом от 7 до 8 , смолистых компонентов - в таком же количестве хлороформа. Смеси количественно переносят в градуированные пробирки с притёртыми пробками подходящей вместимости, ополаскивая стаканчик соответствующим растворителем не менее 3 раз, и переносят смесь после ополаскивания в ту же пробирку. Доводят объём смеси в пробирке до такого значения, при котором массовая концентрация компонента будет равна 1 . Конкретное значение объёма растворителя в кубических сантиметрах должно быть равно массе навески углеводородов или смолистых компонентов в миллиграммах для получения массовой концентрации 1 . Например, при растворении навески массой 10,0 мг в 10,0 полученным смесям углеводородов АС4-УВ и смолистых компонентов АС1-СК приписывают массовую концентрацию 1,00 . Аттестованное значение массовой концентрации рассчитывают по формуле Б.1.

Б.4.2 Приготовление аттестованных смесей углеводородов АС5-УВ и смолистых компонентов АС2-СК

Отбирают 2,5 смеси АС4-УВ или АС1-СК градуированной пипеткой вместимостью 5,0 , помещают его в мерную колбу вместимостью 25 , доводят объём раствора до метки четырёххлористым углеродом или хлороформом, соответственно. Раствор перемешивают.

Полученным смесям углеводородов АС5-УВ, смолистых компонентов АС2-СК приписывают массовую концентрацию 0,100 .

Б.4.3 Приготовление аттестованной смеси смолистых компонентов АС3-СК

Для приготовления смеси АС3-СК используемой в дальнейшем для установления градуировочной характеристики и контроля точности измерений смолистых компонентов отбирают 4,5 аттестованной смеси 0,100 градуированной пипеткой вместимостью 5 в градуированную пробирку вместимостью 15 , доводят объём раствора до 10 хлороформом и перемешивают.

Полученной смеси приписывают массовую концентрацию смолистых компонентов 0,03 .

Б.5 Приготовление градуировочного раствора

При высокой концентрации люминесцирующих соединений может наблюдаться явление, называемое концентрационное "тушение" или "гашение" люминесценции. В этих случаях измеряемая интенсивность люминесценции имеет гораздо более низкое значение, чем должно быть при имеющейся концентрации люминесцирующих веществ.

Для проверки возможного наличия тушения люминесценции в полученных смесях АС5-УВ и АС3-СК измеряют на флуориметре интенсивность их люминесценции. Затем отбирают 2 или 5 указанных смесей, разбавляют до 10 , и снова проводят измерение люминесценции. Если она увеличивается или остаётся такой же, в этом случае проводят следующее разбавление аналогичным образом и вновь измеряют интенсивность люминесценции. При уменьшении интенсивности люминесценции согласно кратности разбавления, в качестве градуировочного раствора принимают именно этот раствор. Массовую концентрацию углеводородов или смолистых компонентов в этом растворе рассчитывают в соответствии с проведёнными разбавлениями.

Если пропорциональное изменение интенсивности люминесценции получается при разбавлении исходных смесей АС5-УВ и АС3-СК, то в качестве градуировочных растворов используют их.

Б.6 Расчёт погрешности приготовления аттестованных смесей

Б.6.1 Расчёт погрешности приготовления аттестованных сме