Приложение А (справочное). Пример протокола гармонизации

Приложение А
(справочное)

Пример
протокола гармонизации

А.1 Введение

Следующий пример иллюстрирует принципы протокола гармонизации и представляет собой один из возможных подходов к реализации протокола гармонизации. Возможны также и другие подходы, которые, вероятно, будут разработаны для конкретных измеряемых величин МИ IVD. Этот пример не следует рассматривать как рекомендуемый подход.

Шаги, описанные в настоящем приложении, относятся к примерам расчетов, приведенным в таблице, на веб-сайте ИСО: https://standards.iso.org/iso/21151/ed-1/en/.

А.2 Описание измеряемой величины

Измеряемой величиной является пептид-R (условная мера, используемая для примера), измеряемая в сыворотке крови человека в произвольных единицах на литр [ед/см ³ (ед/л)]. Пептид-R имеет генетические варианты 68-98 аминокислот, которые присутствуют в плазме крови и сыворотке в виде комплекса не менее чем с одним иным пептидом, с переменным числом сайтов гликозилирования в каждом из них. Пептид-R присутствует в плазме крови в низких концентрациях, его содержание повышается при раке поджелудочной железы. Пептид-R стабилен в течение не менее 24 ч в крови, хранящейся при температуре 4 °С - 8 °С, и не менее одного года в сыворотке, хранящейся при температуре минус 70 °С (должна быть предоставлена ссылка на источник для реальной измеряемой величины).

А.3 Технические характеристики МИ IVD

Рекомендуемые подходы к определению аналитических технических характеристик должны преимущественно основываться на влиянии результатов измерений на клинический исход или на биологическую вариабельность измеряемой величины [12], [13].

Было оценено, что внутрииндивидуальная и внутригрупповая биологическая вариабельность пептида-R составляет 10 % и 30 % соответственно. Таким образом, модель биологической вариабельности предполагает технические характеристики МИ IVD:

- общая непрецизионность как коэффициент вариации (CV) < 5 %,

- смещение среднего в пределах  8 % от значений, присвоенных образцам биологического материала для всех МИ IVD.

Технические характеристики, приведенные в этом примере, предназначены только для иллюстрации, чтобы представить упрощенный пример того, как может быть разработан и реализован протокол гармонизации. Технические характеристики, которые должны быть выбраны при разработке протокола гармонизации для данной измеряемой величины, должны соответствовать этой конкретной измеряемой величине и определяться согласно руководствам [12], [13].

А.4 Квалификация МИ IVD, включенная в протокол гармонизации

МИ IVD, включенные в этот протокол гармонизации (для измеряемого количества вещества концентрации пептида-R в сыворотке крови), должны иметь следующие технические характеристики:

- внутрилабораторная общая прецизионность (в соответствии с руководством Института клинических и лабораторных стандартов ЕР05 [3]) как % CV составляет 5 % или менее верхнего предела референтного интервала концентраций;

- для панели образцов биологического материала, охватывающих значительную часть интервала измерений, значения, измеренные каждым МИ IVD, имеют пропорциональную и линейную связь по отношению к результатам измерений другими МИ IVD, рассматриваемыми для включения в протокол гармонизации. Критерием приемлемой взаимосвязи является максимальное 10 %-ное отклонение для отдельного результата от линии взвешенной регрессии Деминга для всех результатов от двух МИ IVD и оценка пересечения, 95 %-ный доверительный интервал для которой включает ноль.

Результаты для образцов со значениями выбросов могут быть исключены, если эти образцы составляют менее 10 % от общего числа образцов биологического материала от человека в данном сравнении.

Четыре МИ IVD, включенные в таблицу А.1, соответствуют техническим характеристикам и включены в пример протокола гармонизации.

Таблица А.1 - Пример МИ IVD для измерения пептида-R в сыворотке крови человека

	А	В	С	D
Интервал измерения	10-500 ед/см 3 (ед/л)	2-225 ед/см 3 (ед/л)	10-500 ед/см 3 (ед/л)	20-700 ед/см 3 (ед/л)
Верхний предел опорного интервала для положительного результата	50 ед/см 3 (ед/л)	20 ед/см 3 (ед/л)	45 ед/см 3 (ед/л)	70 ед/см 3 (ед/л)
Внутрилабораторная непрецизионность на верхнем пределе референтного интервала (как CV)	3,7 %	3,9 %	3,4 %	3,6 %

А.5 Стандартные образцы гармонизации

А.5.1 Для использования в качестве стандартных образцов гармонизации настоящего протокола подготовлена группа из 120 отдельных образцов сыворотки крови человека. Для экспериментальной схемы гармонизации используют 80 образцов. Остальные 40 образцов используют для подтверждения эффективности протокола гармонизации.

А.5.2 Доноров выбирают следующим образом (в данном примере характеристики образцов биологического материала являются произвольными и предназначены только для примера):

- 25 % не имеют известных хронических заболеваний и скрининговые значения в пределах референтных интервалов для пептида-R, панкреатической амилазы, липазы, аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, -глутамилтрансферазы, общего билирубина и гемоглобина;

- 75 % имеют значения пептида-R, равномерно распределенные в пяти поддиапазонах, представляющих собой 20 %-ные интервалы между верхним пределом референтного интервала и верхним пределом измерительного интервала при использовании одного МИ IVD, включенного в протокол гармонизации.

А.5.3 Человеческую сыворотку собирают и обрабатывают в соответствии с руководством С37 [2] Института клинических и лабораторных стандартов без стадий пулирония или фильтрации. Донорскую сыворотку, при наличии гемолиза, иктеричности, хилеза или положительную на маркеры инфекционных заболеваний, отбрасывают. Для обеспечения однородности аликвот каждую единицу донорской сыворотки перемешивают при температуре 4 °С - 8 °С. Аликвоты по 0,5 см ³ (мл) готовят при температуре 4 °С - 8 °С и замораживают в полипропиленовых криовиалах с силиконовыми уплотнительными кольцами при температуре минус 70 °С или ниже в течение 24 ч после донации. Из каждого образца биологического материала получают приблизительно 360 аликвот. Аликвоты транспортируют участникам протокола гармонизации на сухом льду СO ₂.

А.5.4 Предполагается, что отдельные сыворотки человека, хранящиеся при температуре ниже минус 70 °С, могут быть заменены свежевзятыми образцами. Это предположение основано на руководстве Института клинических и лабораторных стандартов по процедуре взятия проб крови и подготовки сыворотки с учетом мер безопасности [2]. В опубликованных материалах было подтверждено, что один цикл замораживания - оттаивания не изменяет результатов измерения пептида-R и что аликвоты, замороженные при температуре минус 70 °С, были стабильны в течение одного года, при выполнении измерений пятью находящимися в обращении МИ IVD (должна быть предоставлена ссылка на источник для реальной измеряемой величины).

А.5.5 Стабильность хранящихся образцов после одного года должна быть подтверждена рассылкой два раза в год образцов четырех аликвот, включающих каждую из шести комбинаций доноров и поддиапазонов концентраций для измерения МИ IVD по исходному протоколу. Образцы будут считаться стабильными, если измеренные значения находятся в пределах  5 % от тех, которые были измерены во время первоначальной подготовки (см. пример А.10).

А.6 Присвоение значений величины стандартным образцам гармонизации

А.6.1 Произвольные значения величины пептида-R присваивают каждому образцу сыворотки в качестве среднего значения результатов измерений всеми МИ IVD, которые могут быть включены в протокол гармонизации. Выбор способа присвоения значения зависит от количества МИ IVD и распределения полученных данных. Ниже приведена схема процедуры по присвоению значения.

А.6.1.1 Аликвоты каждого образца измеряют в трех повторах и в три разных дня, ежедневно выполняя калибровку каждого МИ IVD. Внутренний контроль качества изготовителя и другие параметры качества проверяют на соответствие техническим требованиям до проведения измерений аликвот. Каждый день проведения измерений используют то же МИ IVD, партию реагентов и партию калибраторов ^*. Выбросы могут быть удалены из-за ошибок или явно отличающихся от других результатов для той же выборки значений. Один выброс может быть удален из набора результатов в трех повторах или все результаты образца могут быть удалены, если все результаты явно отличаются от результатов других дней измерений с данным МИ IVD. Среднее значение остальных результатов в выборке будет использоваться в качестве результата для данного МИ IVD (МИ в электронной таблице (см. А.1)). В рабочем примере файла электронной таблицы на вкладке "Data" отсутствуют значения выбросов среди реплик, поэтому все данные были использованы в последующем анализе.

------------------------------

^*_{В соответствии с ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 (пункты 3.26 и 3.28) используются термины "инструмент для диагностики in vitro" и "реагент для диагностики in vitro".}

------------------------------

Примечание - В этом примере определено, что следует провести исследования изменений от дня ко дню для уменьшения влияния данного компонента дисперсии на точность оценки среднего значения. Различные МИ IVD, партии реагентов и/или проведения калибровок могут быть отобраны при других схемах исследований.

А.6.1.2 Рабочий пример файла приведен на сайте ИСО (см. А.1 данного приложения) на вкладке "Analysis 1". Для каждой выборки вычисляют начальное среднее значение для всех МИ IVD (колонка AV). Для каждого МИ IVD строят график среднего значения для каждого образца МИ IVD против начального среднего. График проверяют визуально для выявления образцов со значениями выбросов, которые четко отделены от кластера других результатов. Статистический тест на выбросы может быть использован для подтверждения визуальных наблюдений. В этом примере использовалось только визуальное обнаружение выбросов. Например, для МИ IVD В - два значения выбросов и для МИ IVD С - один выброс. Данные для образцов с результатами, которые явно являются выбросами по крайней мере для одного МИ IVD, удаляют для всех МИ IVD. Такие выбросы, вероятно, обусловлены специфическими влияниями образца на данные МИ IVD, отражающими недостаточную селективность для измеряемой величины. Необходимо удалить все результаты для образца, результаты измерений которого идентифицированы как выброс для одного МИ IVD, чтобы избежать смещения расчета среднего значения всех МИ IVD при удалении данных этого МИ IVD. МИ IVD с результатами измерений более чем 10 % образцов, идентифицированными как выбросы, будет исключен из протокола гармонизации, а результаты для образцов с выбросами будут повторно оценены для остальных МИ IVD. В этом примере результаты для трех образцов (ID 42, 70 и 71 с выбросами, выделенными желтым цветом) удаляют из данных, и все МИ IVD включают в следующий шаг протокола гармонизации.

А.6.1.3 Рабочий пример файла приведен на сайте ИСО (см. А.1 данного приложения) на вкладке "Analysis 2". Все результаты для образцов, идентифицированных как имеющие выбросы на предыдущем шаге, удаляют из данных. Стандартные отклонения (SDs) повторов увеличиваются более чем в 10 раз от низких до высоких концентраций образцов (колонки BT-BW). Следовательно, взвешенная регрессия Деминга, предполагающая, что вариабельность (SD) пропорциональна концентрации (как описано в руководстве EP09is Института клинических и лабораторных стандартов), применяется для среднего значения каждого оставшегося результата измерения образца каждым МИ IVD (колонки AQ-AT), в отличие от выбросов, удаливших все средние значения МИ IVD, колонка AU). Линии регрессии анализируют, и каждое МИ IVD, результаты измерений которого отклоняются более чем на 10 % от линейного отклика в интервале значений концентрации, будет исключено из протокола гармонизации. В данном примере все результаты для каждого МИ IVD имеют линейный отклик на интервале данных и сохраняются в протоколе гармонизации. Дополнительно CV для каждой выборки рассчитывают на основе девяти повторных измерений (см. колонки BE-ВН). Объединенный CV значений для всех образцов (колонки ВО-BR) составляет < 5 % для каждого МИ IVD. Исследование CVs для отдельных образцов в пределах принятия решения (колонки BE-ВН; идентификаторы образцов 13-24) подтверждает, что CV составляет < 5 % для каждого МИ IVD в тех концентрациях, которые указаны в критериях включения в протокол гармонизации. Все остальные данные для всех МИ IVD являются приемлемыми и сохраняются. Среднее значение для всех МИ IVD с удаленными выбросами (колонка AU) становится значением концентрации, присвоенным каждому образцу, который используют в качестве стандартного образца гармонизации.

А.7 Разработка специфического алгоритма гармонизации МИ IVD

МИ IVD, включенные в протокол гармонизации, являются характерными для процедуры измерения каждого изготовителя. Соотношение между присвоенными значениями стандартных образцов гармонизации и значениями, измеренными каждым МИ IVD, используют для получения специфического алгоритма гармонизации МИ IVD, применяемого к иерархии калибровки каждого соответствующего изготовителя таким образом, чтобы была достигнута гармонизация результатов для образцов биологического материала для всех МИ IVD. Подробное описание разработки алгоритма и его применения для присвоения значений образцам биологического материала является обязанностью каждого изготовителя и может включать в себя конфиденциальную информацию. Следовательно, протокол гармонизации определяет, что такой процесс происходит, но не содержит подробных математических или процедурных инструкций о том, как этот процесс реализуется изготовителями. В этом примере используется один из возможных подходов к разработке и применению калибровочной коррекции на основе алгоритма гармонизации для иллюстрации концепции, но он не предназначен для представления рекомендуемого подхода.

Примечание - Количество МИ IVD, количество партий калибратора и реагентов, повторность измерений и другие детали проекта эксперимента определяются каждым изготовителем на основе технических характеристик и внутренних процессов калибровки изготовителя МИ IVD, выполняемых при реализации этой методики измерения.

А.7.1 Рабочий пример файла приведен на сайте ИСО (см. А.1) на вкладке "Analysis 3". График относительной разности [как разность в (значение) в колонках J-M] между значениями, присвоенными референтным материалам гармонизации, и средними измеренными значениями по данному МИ IVD исследуется для определения того, является ли разброс приблизительно постоянным в течение интервала измерений. В этом примере разброс согласован для каждого МИ IVD на интервале измеренных значений, что подтверждает существование пропорциональной зависимости между результатами МИ IVD и то, что значения для образцов биологического материала могут быть согласованы между МИ IVD.

Примечание - В этом примере исследования некоторые относительные различия (в процентах) между МИ IVD велики при численно малых количественных значениях, поэтому график данных в виде процентных различий будет представлять искаженную картину их эффективности. Для предотвращения этого неуместного искажения используют разности In значений.

А.7.2 Рабочий пример файла приведен на сайте ИСО (см. А.1) на вкладке "Analysis 4". Взаимосвязь между присвоенными значениями стандартных образцов гармонизации и значениями, измеренными каждым МИ IVD, устанавливается на основе взвешенной линейной регрессии Деминга, выполненной на вкладке "Analysis 2". Параметры линейной регрессии показаны в колонке В и используются в качестве алгоритма гармонизации для присвоения значений калибраторам конечного пользователя. Когда оценка пересечения значительно отличается от нуля, как в МИ-В и МИ-D, изготовитель может разделить данные на более низкие и более высокие значения и разработать два алгоритма гармонизации для двух различных интервалов концентраций. В этом примере изготовитель В решил не разбивать данные, а изготовитель D решил разбить данные на две концентрации, представленные образцами IDs 1-25 и IDs 26-80. Можно было бы использовать другой подход к разделению данных или подгонке отношений, но выбранный пример иллюстрирует, что разные изготовители могут использовать разные подходы для алгоритма гармонизации.

А.7.3 На вкладке примера "Analysis 4" каждый изготовитель присвоил значение (колонка Н) своему(им) калибратору(ам) конечного пользователя с использованием своей установленной процедуры измерения, калиброванной с использованием существующего(их) рабочего(их) калибратора(ов) в соответствии со стандартной рабочей процедурой каждого изготовителя. В этом примере каждый изготовитель использует регрессионные параметры для МИ IVD из вкладки "Analysis 2", показанные на вкладке "Analysis 4", в качестве алгоритма гармонизации (колонка I) для присвоения нового значения каждому калибратору конечного пользователя (колонка J), что позволит достичь гармонизации результатов между МИ IVD.

А.7.4 На рисунке А.1 показано, как этот процесс изменяет иерархию калибровки. Калибратор(ы) конечного пользователя с новым алгоритмом гармонизации присвоенных значений будет(ут) использоваться для калибровки МИ IVD конечного пользователя, базируясь на каждой из процедур измерения. Неопределенность этого этапа гармонизации определяется с использованием валидации эффективности протокола гармонизации, описанной в А.9.5.

Рисунок А.1 - Иерархия калибровки до и после применения алгоритма гармонизации к калибратору конечного пользователя

Примечание - В данном примере алгоритм гармонизации применяется на уровне калибратора конечного пользователя. Как указано в 5.7.3, алгоритм гармонизации мог бы быть разработан и применен на внутреннем стандартном образце изготовителя или на уровне рабочего калибратора изготовителя.

А.8 Присвоение значений контрольным материалам калибровки

Если изготовитель предоставляет конечному пользователю материалы для контроля калибровки, предназначенные для использования с МИ IVD этого изготовителя для проверки правильности выполненной калибровки, то такие значения таким контрольным материалам присваиваются в соответствии с процедурой изготовителя, аналогичной той, которая используется для калибраторов конечного пользователя, описанных в А.7. Для этой ситуации не приводят никакого примера.

А.9 Подтверждение эффективности протокола гармонизации

А.9.1 Эффективность протокола гармонизации проверяют в данном примере путем измерения набора для валидации из 40 отдельных образцов биологического материала с использованием каждого из МИ IVD в протоколе гармонизации, которые откалиброваны с использованием калибратора(ов) конечного пользователя с новым скорректированным значением(ями), присвоенными на основе протокола гармонизации. Набор образцов биологического материала для валидации был подготовлен вместе с теми, которые использовались в качестве стандартных материалов гармонизации в протоколе гармонизации, но не были использованы в протоколе гармонизации для присвоения новых значений калибраторам конечного пользователя.

А.9.2 В соответствии с критериями, установленными в начале работ по гармонизации, среднее смещение по отношению ко всем назначенным значениям МИ IVD должно находиться в пределах  8 % от всех назначенных значений МИ IVD для образцов биологического материала.

А.9.3 Схема испытаний, подобная описанной в А.6, может быть использована для подтверждения эффективности протокола гармонизации. Валидация представляет собой набор новых измерений, при этом каждый МИ IVD калибруется с использованием калибратора(ров) конечного пользователя с новым(и) скорректированным(и) значением(ями), назначенным в соответствии с алгоритмом гармонизации, определенным в А.7.

А.9.4 Рабочий пример файла приведен на сайте ИСО (см. А.1) на вкладке "Analysis 5". Резервный набор образцов биологического материала ID 81-120 первоначально измерялся каждым МИ IVD одновременно с измерениями для образцов ID 1-80. Значение, присвоенное каждому из резервных образцов, представляет собой среднее значение всех МИ IVD (колонка С) с использованием тех же критериев для выявления и удаления образцов со значениями выбросов, которые были использованы для 80 стандартных материалов гармонизации. Полный набор данных для этих 40 образцов не показан в примере электронной таблицы.

Резервный набор образцов биологического материала повторно измеряют с каждым из МИ IVD после применения алгоритма гармонизации и отображения среднего значения трехкратных измерений (колонки D-G). Оценки наклонов, пересечений и малый разброс результатов для взвешенной регрессии Деминга против присвоенных значений для резервного набора образцов биологического материала теперь являются однородными (регрессионные графики в колонке K). Средние отклонения, показанные на разностных графиках (в колонке W), соответствуют критериям гармонизации. Для сравнения также показаны разностные графики для исходных данных (в колонке AD) перед разработкой алгоритмов гармонизации каждым изготовителем МИ IVD. Эти данные для резервных образцов подтверждают, что протокол гармонизации был эффективен при разработке алгоритмов гармонизации и достиг желаемой эквивалентности результатов четырех МИ IVD.

А.9.5 Повторно обращаются к примеру файла на вкладке "Analysis 5". Расчет неопределенности дополнительного шага гармонизации в иерархии калибровки проводят с использованием резервного набора образцов. Резервный набор можно считать набором для валидации выборок в отличие от исходного пробного набора, который использовался для разработки алгоритмов гармонизации. Поскольку набор для валидации является самостоятельным набором измерений небольшой выборки, то он обеспечивает более консервативную оценку неопределенности. Основополагающие предположения заключаются в том, что:

- изменчивость пропорциональна концентрации и таким образом относительная неопределенность постоянна во всем диапазоне измерений каждого МИ IVD;

- процесс гармонизации эффективно обеспечивает пропорциональную корректировку, приводящую к нулевому пересечению;

- любое оставшееся смещение после корректировки не играет никакой роли в оценке неопределенности до тех пор, пока оставшееся смещение соответствует требованиям протокола гармонизации.

В соответствии с этими предположениями стандартная ошибка смещения для МИ IVD использует распределение в процентах разностных результатов для образца (среднее значение трех повторов на выборку) для определения стандартной неопределенности шага гармонизации для этого МИ IVD, как показано на вкладке "Analysis 5" в примере колонки Р-S в строке 47 (желтое выделение). Стандартная неопределенность этапа гармонизации объединяется с неопределенностями других этапов иерархии калибровки для оценки комбинированной стандартной неопределенности, назначенной калибратору конечного пользователя. Если вышеуказанные допущения не могут быть сделаны, следует использовать альтернативный подход для оценки неопределенности.

А.10 Устойчивость протокола гармонизации

В данном примере приведена достаточно подробная информация для иллюстрации концепций, касающихся устойчивости протокола гармонизации, но подробные схемы экспериментов, проекты и примеры анализа данных не приведены. Разработка схемы эксперимента требует учета таких деталей, как количество репрезентативных МИ IVD, количество партий калибраторов и реагентов, повторность и других деталей, обеспечивающих надлежащую статистическую достоверность выводов.

А.10.1 Подготовка стандартных образцов гармонизации и образцов для валидации, описанных в А.5, позволила получить примерно 360 аликвот каждого образца биологического материала. Примерно 300 аликвот остаются доступными после завершения первоначального протокола гармонизации и подтверждения эффективности гармонизации для МИ IVD, включенных в протокол. Организация X подготовила исходные стандартные образцы по гармонизации и будет хранить их для последующего использования.

А.10.2 Организация Y организовала и управляла разработкой протокола гармонизации и несет ответственность за координацию с изготовителями и организацией Х для проверки стабильности хранящихся стандартных образцов гармонизации и дальнейшей гармонизации результатов между МИ IVD. В этом примере каждые два года организуется обмен образцами, включающий 24 образца биологического материала, соответствующих 4 образцам из каждых первоначальных шести комбинаций доноров и поддиапазонов концентраций, вновь подготовленных в соответствии с характеристиками, описанными в А.5, которые охватывают интервал концентраций стандартных образцов гармонизации. Замороженные аликвоты этих 24 новых подготовленных образцов биологического материала и замороженные аликвоты 24 хранящихся стандартных образцов гармонизации, которые охватывают одни и те же комбинации доноров и поддиапазонов концентраций, измеряют с помощью МИ IVD, представляющего каждую из процедур измерения, которые были гармонизированы в соответствии с протоколом. Можно использовать схему эксперимента аналогичную той, что приведена в А.6. Анализ данных, например А.10.2, состоит из трех частей.

А.10.2.1 Первая часть анализа данных определяет, подтверждают ли результаты, полученные МИ IVD, устойчивость гармонизации. Средние значения и их неопределенность рассчитывают для результатов 24 новых подготовленных образцов биологического материала, измеренных с использованием каждого МИ IVD. Смещение для каждой выборки по отношению к среднему значению для всех МИ IVD вычисляют для каждого МИ IVD. Устойчивость гармонизации для МИ IVD считают приемлемой, если смещение находится в пределах исходного критерия среднего смещения в пределах  8 % от всех значений МИ IVD, присвоенных выборкам пациентов (А.3). Статус гармонизации МИ IVD является приемлемым, если смещение для всех или большинства МИ IVD соответствует этому критерию. Если статус гармонизации не является приемлемым, то протокол гармонизации может быть повторен после подтверждения того, что референтные материалы гармонизации остались стабильными (А.10.2.2).

А.10.2.2 Во второй части анализа данных оценивают, остались ли стандартные образцы для гармонизации стабильными по отношению к вновь подготовленным образцам. Средние значения вновь измеренных результатов для 24 новых образцов биологического материала и 24 сохраненных стандартных образцов гармонизации рассчитывают для каждого МИ IVD. Среднее смещение между типами образцов для каждого МИ IVD вычисляют и сравнивают с критерием среднего смещения в пределах  8 % от всех значений МИ IVD, присвоенных образцам биологического материала (пример A.3). Вывод о том, что стандартные образцы гармонизации остаются стабильными, подтверждается, если этот критерий удовлетворяется для всех или большинства МИ IVD.

А.10.2.3 Третья часть анализа данных оценивает, остались ли значения, присвоенные стандартным образцам гармонизации, стабильными. Смещение и его неопределенность между средними значениями недавно измеренных результатов для 24 сохраненных стандартных образцов гармонизации и их присвоенными значениями рассчитывают для каждого МИ IVD. Присвоенные значения считают стабильными, если смещение, включая его неопределенность, удовлетворяет критерию среднего смещения в пределах  8 % от всех присвоенных значений МИ IVD для образцов биологического материала (см. A.3). Если смещение и присвоенные значения приемлемы для всех МИ IVD, обоснованным выводом является то, что значения, присвоенные референтным материалам гармонизации, остались стабильными.

А.10.2.4 В А.10.2.2 и А.10.2.3 недопустимое смещение не является окончательным доказательством того, что стандартные образцы гармонизации ухудшились из-за того, что калибровка одного или нескольких МИ IVD могла измениться с момента выполнения первоначального протокола гармонизации; результаты А.10.2.1 могут предоставлять информацию об этой возможности. Поскольку существуют различные возможности, для вынесения наиболее обоснованного вывода относительно ухудшения качества стандартных образцов гармонизации или изменения калибровки МИ IVD необходимо изучить данные из А.10.2. В случае если эти данные неубедительны, следует провести второй, более масштабный эксперимент.

А.10.3 Если стандартные образцы гармонизации стабильны, но статус гармонизации не подтвержден, то набор стандартных образцов гармонизации используют для повторения протокола гармонизации с целью восстановления алгоритмов гармонизации для каждого МИ IVD, отличающегося от других, или для всех МИ IVD, если это необходимо.

А.10.4 Новая партия стандартных образцов гармонизации должна быть подготовлена, если будет установлено, что стандартные образцы гармонизации не являются стабильными или если прежняя партия близка к истощению. В данном примере новая партия будет подготовлена в соответствии с инструкциями в А.5 и значением, присвоенным в соответствии с инструкциями в А.6.

А.10.4.1 Когда стандартные образцы гармонизации стабильны при хранении, подготовка новой партии будет организована таким образом, чтобы использовать оставшиеся образцы из предыдущей партии для проверки значений, присвоенных новой партии. Репрезентативные образцы всех шести комбинаций типов доноров и поддиапазонов концентраций предыдущей партии будут включены в схему эксперимента проекта для подтверждения того, что калибровка МИ IVD не изменилась по сравнению с калибровкой, установленной первоначальной гармонизацией, проверенной в соответствии с А.10.2. В этом примере, основанном на критериях A.3, среднее смещение в пределах  8 % от всех значений МИ IVD, присвоенных репрезентативным образцам из предыдущей партии, согласуется со стабильной гармонизацией между МИ IVD и приемлемым назначением значений для новой партии стандартных образцов гармонизации.

А.10.4.2 Если стандартные образцы гармонизации не являются стабильными при хранении, новой партии будут присвоены значения, описанные в А.6. В этом случае описание отбора образцов в А.5 предназначено для получения набора стандартных образцов гармонизации, которые имеют характеристики, максимально близкие к характеристикам исходной или предыдущей партии. Следовательно, предполагается, что характеристики выборки и присвоение значений будут согласованными. Это предположение может быть проверено путем сравнения результатов для свежеприготовленной панели образцов биологического материала с измерениями, выполненными каждым МИ IVD, который был откалиброван с использованием текущей гармонизированной калибровки конечного пользователя каждого изготовителя, и калибровки конечного пользователя со значением(ями), присвоенными с использованием новой партии стандартных образцов гармонизации. Исходя из критериев, приведенных в A.3, среднее смещение в пределах  8 % для вновь подготовленных образцов биологического материала между текущей калибровкой и калибровкой на основе новой партии стандартных образцов гармонизации согласуется с приемлемой новой партией стандартных образцов гармонизации. Если эти критерии не будут соблюдены, организация Y в консультации с изготовителями и конечными пользователями, включая представителей клинических обществ, определит, следует ли отказаться от новой партии стандартных образцов гармонизации и подготовить замену, или же изменение статуса гармонизации может быть допущено для использования пептида-R в клинических решениях и необходимо ли скорректировать пороговые значения принятия решений относительно медицинского состояния, основанного на результатах измерений пептида-R.

А.11 Применение протокола гармонизации к новым МИ IVD

А.11.1 Организация Y будет продолжать поддерживать применение протокола гармонизации для новых МИ IVD и для МИ IVD, которые не были включены в первоначальный протокол гармонизации, для которых изготовитель впоследствии изменил свое МИ IVD в соответствии с квалификационными критериями. Для такого МИ IVD будет предоставлен набор стандартных образцов гармонизации с присвоенными значениями, и изготовитель может реализовать А.7 примерного протокола для присвоения новых значений своему(им) калибратору(ам) конечного пользователя. После завершения изготовителем назначения нового(ых) значения(й) для калибратора(ов) конечного пользователя, изготовителю будет предоставлен набор образцов для валидации с ослепленными назначенными значениями для подтверждения того, что калибровка его МИ IVD с помощью нового(ых) калибратора(ов) конечного пользователя успешно извлекает назначенные значения. Оценка извлечения производится организацией Y.

А.11.2 Если стандартные образцы гармонизации не являются стабильными при хранении, гармонизацию для новых МИ IVD необходимо будет координировать с подготовкой новой партии стандартных образцов гармонизации, как описано в примере А.10.4.