Приложение С (обязательное). Метод имплантации в костную ткань

Приложение С
(обязательное)

Метод
имплантации в костную ткань

С.1 Область применения

Данный метод исследования используют для оценки биологической реакции костной ткани на имплантируемый биоматериал. Выбор места имплантации в решетчатую ("губчатую") или плотную часть компактной кости зависит от конечного использования исследуемого биоматериала.

Метод используют для сравнения биологического действия одного и того же биоматериала с разной текстурой и состоянием поверхности, а также полученных с применением различных видов обработки или способов модифицирования.

С.2 Сущность метода

Имплантируемый образец вводят в костную ткань лабораторных животных. Биологическую реакцию на имплантируемый исследуемый образец сравнивают с биологической реакцией на имплантируемый контрольный образец. Контрольными образцами являются материалы, применяемые в МИ, клиническая применимость и характеристики биосовместимости которых установлены.

С.3 Требования к образцам

С.3.1 Общие положения

Общие требования к подготовке исследуемых и контрольных образцов установлены в 4.2.

С.3.2 Форма образцов

Для исследования применяют твердые образцы в форме винта с резьбой для обеспечения первоначального стабильного положения в костной ткани. Если изготовление образца в форме винта непрактично, то допускается использовать образец в форме цилиндра.

В зависимости от биоматериала и цели исследования допускается использовать образцы другой формы (например, стержни, пасты).

С.3.3 Размеры образцов

Размеры имплантируемого образца зависят от размеров лабораторного животного и выбранной кости. Требования к размерам образцов, имплантируемых животным в среднюю часть кортикальной кости:

- размеры образцов в форме цилиндра для кроликов - диаметр 2 мм, длина 6 мм;

- размеры образцов в форме цилиндра для собак, овец и коз - диаметр 4 мм, длина 12 мм;

- размеры образцов в форме винта для кроликов, собак, овец, коз, свиней - от 2 до 4,5 мм.

При проведении исследований методами имплантации в сочетании с исследованиями общей токсичности допускается использовать образцы других размеров, анатомически совместимых с клинически значимыми образцами.

С.4 Лабораторные животные и место имплантации

С.4.1 Лабораторные животные

Имплантируемые образцы помещают в костную ткань мелких грызунов, собак, овец, коз, свиней или кроликов. Выбирают один из указанных видов животных в соответствии с ISO 10993-2. При этом следует учитывать видовые отличия в физиологии костной ткани у различных животных. Качество костной ткани может варьировать среди нецеленаправленно выведенных животных одного вида, поэтому при выборе подходящего лабораторного животного и для интерпретации результатов исследования может потребоваться дополнительно выполнить костную денситометрию. Выбор лабораторного животного для исследования должен быть обоснован и задокументирован.

С.4.2 Место имплантации

Исследуемые и контрольные образцы имплантируют животным в эквивалентные анатомические участки. Участки имплантации выбирают с учетом минимизации риска смещения образца. Число участков имплантации должно быть достаточным для введения 10 исследуемых и 10 контрольных образцов каждого биоматериала в каждом исследовании. Забор образцов ткани осуществляют от трех разных животных.

Нерезорбируемый (биостабильный) контрольный образец следует оценивать в каждой временной точке. Допускается использовать одну временную контрольную точку при наличии документально оформленного приемлемого обоснования, содержащего:

- сведения о контрольном образце;

- сведения о продолжительности наблюдений после имплантации;

- информацию о модели на экспериментальных животных;

- протокол исследования;

- дополнительные данные о контрольном образце.

Как правило, образцы имплантируют животным в бедра и область большой берцовой кости. Допускается выполнять имплантацию в другие участки костной ткани животных. Число участков имплантации:

a) Для одного кролика - не более 6 участков имплантации:

- три участка для исследуемых образцов,

- три участка для контрольных образцов;

b) Для одной собаки, овцы, козы или свиньи - не более 12 участков имплантации:

- шесть участков для исследуемых образцов,

- шесть участков для контрольных образцов.

На одном животном следует размещать не более 12 образцов.

Размеры, масса и возраст животного, а также выбранный участок имплантации должны гарантировать, что размещение образца не вызовет значительного риска патологического перелома в данном месте. При использовании для исследования молодых животных не допускается выполнять имплантацию в участки, относящиеся к эпифизу или другой незрелой костной ткани.

С.5 Процедура имплантации

При подготовке костной ткани используют дрель с низкой скоростью сверления. Сверление прерывают для обильного увлажнения участка имплантации физиологическим раствором и отсасывания, так как чрезмерное нагревание может привести к некрозу местной ткани.

Диаметры имплантируемого образца и имплантационного ложа в костной ткани должны точно соответствовать друг другу во избежание фиброза.

Обнажают кортикальный слой каждой бедренной или большой берцовой кости и просверливают соответствующее число отверстий для образцов. У кроликов делают не менее трех отверстий, у более крупных животных - не менее шести отверстий. Перед введением образца отверстие рассверливают до получения нужного диаметра или постукивают по головке винта. Образцы в форме цилиндра вставляют в подготовленное отверстие, нажимая на них пальцем для плотного расположения. Образцы в форме винта вкручивают в подготовленное отверстие с помощью инструмента с регулированием крутящего момента. Крутящий момент регистрируют в отчете.

С.6 Продолжительность наблюдений после имплантации

Продолжительность исследования и наблюдений после имплантации, обеспечивающую стабильную фазу биологической реакции ткани, выбирают в соответствии с 5.3.

С.7 Оценка биологической реакции

Биологическую реакцию оценивают в соответствии с требованиями, установленными в 5.5.

С.8 Отчет об исследовании

В отчет об исследовании включают полученные результаты и информацию в соответствии с разделом 6.