Приложение В (обязательное). Метод имплантации в мышечную ткань

Приложение В
(обязательное)

Метод
имплантации в мышечную ткань

В.1 Область применения

Данный метод исследования используют для оценки биологической реакции мышечной ткани на имплантируемый биоматериал.

В.2 Сущность метода

Имплантируемый образец вводят в мышечную ткань лабораторных животных. Биологическую реакцию на имплантируемые исследуемые образцы сравнивают с биологической реакцией на имплантируемые контрольные образцы. Контрольными образцами являются материалы, применяемые в МИ, клиническая применимость и характеристики биосовместимости которых установлены.

В.3 Требования к образцам

Общие требования к подготовке исследуемых и контрольных образцов установлены в 4.2. Размеры имплантируемых образцов зависят от размеров выбранной группы мышц лабораторного животного.

Для паравертебральных мышц кролика, как правило, используют образцы шириной от 1 до 3 мм и длиной примерно 10 мм. В некоторых случаях допускается использовать более крупные имплантируемые образцы диаметром не более 10 мм и высотой не более 3 мм.

При проведении исследований методами имплантации в сочетании с исследованиями общей токсичности допускается использовать образцы других размеров, анатомически совместимых с клинически значимыми образцами.

Имплантируемые образцы должны иметь закругленные края и концы.

В.4 Лабораторные животные и место имплантации

Следует убедиться, что размер мышечной ткани достаточен для размещения имплантируемых образцов. Для каждого исследования используют животных только одного вида. Животным под анестезией имплантируемые образцы помещают в мышечную ткань.

Примечание - Имплантацию образцов рекомендуется выполнять кроликам в паравертебральные мышцы. Имплантацию образцов небольших размеров допускается выполнять крысам в ягодичные мышцы или кроликам в бедренные мышцы.

Для исследования каждого биоматериала используют не менее трех животных. Число участков имплантации должно быть достаточным для введения 10 исследуемых и 10 контрольных образцов каждого биоматериала в каждом исследовании.

Исследуемые и контрольные образцы имплантируют не менее чем трем разным животным.

Если предполагается, что контрольный образец может вызвать реакцию, превышающую минимальный ответ, то его следует имплантировать в место, противоположное нахождению исследуемого образца. В данном случае используют дополнительный контрольный образец с известным минимальным ответом.

Не резорбируемый (биостабильный) контрольный образец следует оценивать в каждой временной точке. Допускается использовать одну временную контрольную точку при наличии документально оформленного приемлемого обоснования, содержащего:

- сведения о контрольном образце;

- сведения о продолжительности наблюдений после имплантации;

- информацию о модели на экспериментальных животных;

- протокол исследования;

- имеющиеся данные о контрольном образце.

В.5 Процедура имплантации

Имплантацию проводят с помощью иглы для подкожных инъекций или трокара. Крупные образцы допускается имплантировать другими подходящими способами.

Исследуемые образцы имплантируют в мышцу так, чтобы направление длинной оси было параллельно мышечным волокнам.

Кролику в паравертебральную мышцу имплантируют достаточное число исследуемых образцов вдоль одной стороны позвоночника на расстоянии 25-50 мм от средней линии параллельно позвоночному столбу и приблизительно на расстоянии 25 мм друг от друга. Каждому животному имплантируют также достаточное число контрольных образцов в контралатеральную мышцу.

В.6 Продолжительность наблюдений после имплантации

Продолжительность исследования и наблюдений после имплантации, обеспечивающую стабильную фазу биологической реакции ткани, устанавливают в соответствии с 5.3.

В.7 Оценка биологической реакции

Биологическую реакцию оценивают в соответствии с требованиями, установленными в 5.5.

В.8 Отчет об исследовании

В отчет об исследовании включают полученные результаты и информацию в соответствии с разделом 6.