Приложение А (обязательное). Химические исследования

Приложение А
(обязательное)

Химические исследования

А.1 Общая информация

Материалы для исследований, контактирующие с кровью и с производными крови, берут из готовых, стерилизованных и, при необходимости, опустошенных пластиковых контейнеров, т.е. в том состоянии, в котором они будут использоваться для процедур переливания, сбора, отделения и введения, включая материал пластика, используемый для контейнера для сбора, и пластиковых трубок, используемых для сбора, переливания, а также любых частей, вступающих в контакт с кровью и ее компонентами.

А.2 Определение массы остатка при прокаливании

Навеску испытуемого материала от 1,00 до 2,00 г помещают в предварительно прокаленный до постоянной массы плавильный тигель, нагревают при температуре от 100 °С до 105 °С в течение 1 ч. Затем нагревают до обугливания при температуре (550  25) °С. Дают остыть в эксикаторе и взвешивают. Прокаливание повторяют, пока не будет достигнута постоянная масса. Вычисляют массу остатка при прокаливании на грамм исходного материала.

Могут быть использованы эквивалентные методы, описанные в фармакопеях.

А.3 Подготовка жидкости (вытяжки) для исследования

Заполняют пустой контейнер до номинального объема водой для инъекций, встряхивают в течение примерно 1 мин, а затем опустошают. Процедуру повторяют дважды. После слива воды для промывания заполняют пустой контейнер до номинального объема водой для инъекций. Затем сжимают контейнер так, чтобы оставшийся воздух вышел из него, а затем закрывают. Экстрагируют (делают вытяжку) контейнер в течение как минимум 30 мин в насыщенном паре под давлением при температуре (121  2) °С. Используют 250 см ³ (мл) воды для инъекций в качестве сравнительной жидкости (пустой образец). Время нагрева и охлаждения не входит в требование соблюдения времени цикла, составляющего 30 мин.

При необходимости экстрагирование/вытяжка может быть выполнено(а) на полимерной пленке или необработанном контейнере. Используют образцы с общей площадью поверхности 1500 см ², которая включает в себя обе стороны пластикового листа. Дважды промывают данный материал 100 см ³ водой для инъекций и утилизируют воду после использования. Высушивают образцы, заливают их 250 см ³ (мл) воды для инъекций и экстрагируют в течение 30 мин насыщенным паром под давлением при температуре (121  2) °С. В качестве жидкости для сравнения (пустой образец) обрабатывают воду для инъекций таким же образом.

Исследования на полимерной пленке возможны только в том случае, если пластиковый материал является однородным. Многокомпонентная полимерная пленка должна быть сначала трансформирована в эквивалентный контейнер для селективного испытания внутренней поверхности.

Если контейнер не предназначен для стерилизации при температуре свыше 121 °С, то в качестве альтернативы экстракцию можно проводить при температуре (100  2) °С в течение 2 ч или при температуре (70  2) °С в течение (24  2) ч, и в этом случае выбранная температура не должна быть ниже той, при которой проводят стерилизацию контейнера.

Если раствор, полученный в результате экстракции одного контейнера или одного его образца материала для изготовления, имеет недостаточный объем для проведения всех необходимых испытаний, растворы от двух или более экстракций могут быть объединены для получения смешанного раствора для проведения испытаний. Если к контейнеру применяют альтернативные методы стерилизации, отличные от термической стерилизации, например, -облучение, стерилизацию оксидом этилена или электронно-лучевую стерилизацию, то используют стерилизованные данным методом контейнеры для приготовления исследуемой жидкости.

А.4 Исследования

А.4.1 Определение окисляемых компонентов

К 20,0 см ³ (мл) экстракта (или холостой пробы) прибавляют 20,0 см ³ (мл) раствора перманганата калия [с (KMnO ₄) = 0,002 моль/см ³ (моль/л)] и 1,0 см ³ (мл) серной кислоты [с (H ₂SO ₄) = 1 моль/см ³ (моль/л)], кипятят в течение 3 мин. Добавляют 1,0 г йодида калия и титруют раствор тиосульфатом натрия [c (Na ₂S ₂O ₃) = 0,01 моль/см ³ (моль/л)] до светло-коричневого цвета. Затем добавляют пять капель раствора крахмала и титруют до получения бесцветной жидкости.

Вычисляют расход раствора перманганата калия [с (KMnO ₄) = 0,002 моль/см ³ (моль/л)] для исследуемой жидкости и воды, используемой в качестве сравнительной жидкости. Разница между двумя значениями не должна превышать 1,5 см ³ (мл).

А.4.2 Обнаружение ионов аммония

10 см ³ (мл) экстракта подщелачивают 2 см ³ (мл) раствора гидроксида натрия [с (NaOH) = 1 моль/см ³ (моль/л)], разбавляют дистиллированной водой до 15 см ³ (мл), затем добавляют 0,3 см ³ (мл) реагента Несслера ^*.

------------------------------

^*_{См. например, Европейская фармакопея.}

------------------------------

Одновременно готовят раствор сравнения: в 8 см ³ (мл) стандартного раствора аммония [ (NH) = 1 мг/дм ³ (мг/л)], добавляют 2 см ³ (мл) гидроксида натрия [с (NaOH) = 1 моль/см ³ (моль/л)], разбавляют дистиллированной водой до 15 см ³ (мл), а затем добавляют 0,3 см ³ (мл) реагента Несслера.

Через 30 с исследуют раствор, который не должен быть более насыщенного желтого цвета, чем раствор сравнения.

А.4.3 Определение хлорид-ионов

Смешивают 0,3 см ³ (мл) раствора нитрата серебра [с (AgNO ₃) = 0,1 моль/см ³ (моль/л)] и 0,15 см ³ (мл) разбавленной азотной кислоты. В полученный раствор добавляют 15 см ³ (мл) экстракта.

Подготавливают раствор сравнения тем же способом, используя вместо экстракта 12 см ³ (мл) стандартного раствора хлорид-ионов (5 мг Cl ^- на литр) и 3 см ³ (мл) воды.

Смесь встряхивают. Через 2 мин раствор, приготовленный с использованием экстракта, не должен быть более мутным, чем раствор сравнения. Избегают воздействия прямых солнечных лучей на раствор.

А.4.4 Определение содержания металлов

А.4.4.1 Свинец и родственные ему тяжелые металлы

Металлы Ва, Cd, Cr, Cu, Pb, Sn и Al определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ААС). Предел обнаружения с использованием ААС может быть повышен путем концентрирования выпариванием исследуемой жидкости в соответствии с А.3, и в этом случае добавляют 2,5 см ³ (мл) раствора соляной кислоты [ (HCl) = 10 г/дм ³ (г/л)] к 250 см ³ (мл) исследуемой жидкости.

А.4.4.2 Альтернативные методы определения тяжелых металлов

Химическое определение общего содержания тяжелых металлов может быть использовано вместо атомно-спектрометрического метода определения металлов в исследуемой жидкости согласно А.3.

1,2 см ³ (мл) тиоацетамидного реагента добавляют к 12 см ³ (мл) экстракта и 2 см ³ (мл) буферного раствора ацетата аммония (рН = 3,5) и сразу перемешивают.

Подготавливают раствор сравнения тем же способом, используя 10 см ³ (мл) раствора свинца [ (Рb ²⁺) = 2 мг/дм ³ (мг/л)], и добавляют 2 см ³ (мл) исследуемой жидкости. Через 2 мин исследуют раствор; он не должен быть более глубокого коричневого оттенка, чем сравнительный раствор.

А.4.5 Определение кислотности или щелочности

После добавления двух капель раствора фенолфталеина 10 см ³ (мл) исследуемой жидкости не должны окрашиваться в красный цвет. Однако при добавлении менее 0,4 см ³ (мл) гидроксида натрия [с (NaOH) = 0,01 моль/см ³ (моль/л)] жидкость должна иметь красный цвет. После добавления 0,8 см ³ (мл) соляной кислоты [с (HCl) = 0,01 моль/см ³ (моль/л)] окраска должна исчезнуть. При добавлении пяти капель раствора метилового красного она должна приобрести красно-оранжевый цвет.

А.4.6 Определение (сухого) остатка при испарении

Выпаривают 100 см ³ (мл) экстракта на водяной бане и высушивают при температуре 105 °С до стабилизации массы.

А.4.7 Определение мутности и степени опалесценции

А.4.7.1 Общая информация

Используют идентичные пробирки из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с плоским основанием и внутренним диаметром от 15 до 25 мм, сравнивают исследуемую жидкость со свежеприготовленной суспензией, как описано ниже. Глубина слоя составляет 40 мм. Сравнивают растворы при рассеянном дневном свете через 5 мин после приготовления контрольной суспензии, рассматривают их вертикально на черном фоне. Рассеяние света должно быть таким, чтобы контрольную суспензию 1 можно было легко отличить от воды, а контрольную суспензию 2 легко отличить от контрольной суспензии 1.

А.4.7.2 Реагенты

А.4.7.2.1 Раствор сульфата гидразина

Растворяют 1 г сульфата гидразина в воде и доводят до 100 см ³ (мл). Дают настояться в течение 4-6 ч.

А.4.7.2.2 Раствор гексаметилентетрамина

Растворяют 2,5 г гексаметилентетрамина в 25 см ³ (мл) воды в стеклянной колбе вместимостью 100 см ³ (мл).

А.4.7.2.3 Первичная опалесцирующая суспензия

Добавляют к раствору гексаметилентетрамина (см. А.4.7.2.2) 25 см ³ (мл) раствора сульфата гидразина (см. А.4.7.2.1). Смешивают и оставляют на 24 ч.

Данная суспензия стабильна в течение 2 мес при условии хранения в стеклянной упаковке без дефектов поверхности. Суспензия не должна прилипать к стеклу и должна быть хорошо перемешана перед использованием.

А.4.7.2.4 Образец опалесценции

Разбавляют 15 см ³ (мл) первичной опалесцирующей суспензии (см. А.4.7.2.3) водой до 1000 см ³ (мл).

Данная суспензия должна быть свежеприготовленной и должна храниться не более 24 ч.

А.4.7.2.5 Образцы суспензии сравнения

Подготавливают суспензии сравнения в соответствии с таблицей А.1. Смешивают и встряхивают перед использованием.

Таблица А.1 - Образцы суспензии сравнения

Образец суспензии	1	2	3	4
Объем образца опалесценции, см 3 (мл)	5	10	30	50
Объем воды, см 3 (мл)	95	90	70	50

А.4.7.3 Обработка результатов

А.4.7.3.1 Жидкость считается прозрачной, если ее чистота такая же, как у воды или используемого растворителя, при исследовании в условиях, описанных выше, или если ее опалесценция не более выражена, чем у образца суспензии 1.

А.4.7.3.2 Жидкость считается слегка опалесцирующей, если ее опалесценция является более выраженной, чем описано в А.4.7.3.1, но не более выраженной, чем у образца суспензии 2.

А.4.7.3.3 Жидкость считается опалесцирующей, если ее опалесценция является более выраженной, чем описано в А.4.7.3.2, но не более выраженной, чем у образца суспензии 3.

А.4.7.3.4 Жидкость является высоко опалесцирующей, если ее опалесценция более выражена, чем описано в А.4.7.3.3, но не более выраженной, чем у образца суспензии 4.

А.4.8 Определение цветности раствора

А.4.8.1 Общая информация

Проверку цветности раствора в диапазоне коричнево-желто-красного проводят одним из двух методов, указанных в А.4.8.2 и А.4.8.3.

А.4.8.2 Метод 1

Используют две пробирки из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла, имеющие внутренний диаметр 12 мм, сравнивают 2 см ³ (мл) исследуемой жидкости, в качестве раствора сравнения используют 2 см ³ (мл) воды. Сравнивают интенсивность окраски при рассеянном дневном свете, рассматривая их горизонтально на белом фоне.

А.4.8.3 Метод 2

Используют пробирки из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла, имеющие внутренний диаметр 16 мм, сравнивают 10 см ³ (мл) исследуемой жидкости с 10 см ³ (мл) воды. Осматривают столбик жидкости вниз по вертикальной оси пробирки при рассеянном дневном свете на белом фоне.

А.4.8.4 Обработка результатов

Жидкость считается бесцветной, если она выдерживает сравнение с водой при исследовании в условиях, указанных в методе 1 или 2.

А.4.9 Определение УФ-поглощения

Определяют степень УФ-поглощения экстракта в кювете с внутренним световым путем на расстоянии 1 см от заготовки. Поглощение определяют в диапазоне от 230 до 360 нм.

А.4.10 Определение ди(2-этилгексил)фталата (ДЭГФ) пластификатора в экстракте

Примечание - Данное определение применяют только к гибкому ПВХ, содержащему ДЭГФ.

А.4.10.1 Реагенты

А.4.10.1.1 Этанол, объемная доля в диапазоне от 95,1 % до 96,6 %, плотность в диапазоне от 0,8050 до 0,8123 г/см ³ (г/мл).

А.4.10.1.2 Экстракционный растворитель, этанол: смесь воды, плотностью от 0,9373 до 0,9378 г/см ³ (г/мл), при определении пикнометром.

А.4.10.1.3 Ди(2-этилгексил)фталат (С ₂₄Н ₃₈O ₄), бесцветная маслянистая жидкость, нерастворимая в воде, растворимая в органических растворителях; плотность в диапазоне от 0,982 до 0,986 г/см ³ (г/мл), показатель преломления при температуре 20 °С для D-линии спектра натрия (589 нм) в диапазоне от 1,486 до 1,487.

А.4.10.2 Приготовление стандартных растворов

А.4.10.2.1 Раствор 1

Растворяют 1 г ДЭГФ (см. А.4.10.1.3) в этаноле (см. А.4.10.1.1) и объем доводят этанолом до 100 см ³ (мл).

А.4.10.2.2 Раствор 2

Разбавляют 10 см ³ (мл) раствора 1 (см. А.4.10.2.1) и объем доводят этанолом до 100 см ³ (мл).

А.4.10.2.3 Контрольные растворы от А до Е

a) Раствор А: Разбавляют 20 см ³ (мл) раствора 2 (см. А.4.10.2.2) и доводят до 100 см ³ (мл) растворителем для экстракции (см. А.4.10.1.2) [содержание ДЭГФ: 20 мг/100 см ³ (20 мг/100 мл)].

b) Раствор В. Разбавляют 10 см ³ (мл) раствора 2 и доводят до 100 см ³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 10 мг/100 см ³ (10 мг/100 мл)].

c) Раствор С: Разбавляют 5 см ³ (мл) раствора 2 и доводят до 100 см ³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 5 мг/100 см ³ (5 мг/100 мл)].

d) Раствор D: Разбавляют 2 см ³ (мл) раствора 2 и доводят до 100 см ³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 2 мг/100 см ³ (2 мг/100 мл)].

e) Раствор Е: Разбавляют 1 см ³ (мл) раствора 2 и доводят до 100 см ³ (мл) растворителем для экстракции [содержание ДЭГФ: 1 мг/100 см ³ (1 мг/100 мл)].

А.4.10.3 Калибровочный график

Измеряют оптическую плотность растворов (см. А.4.10.2.3) при 272 нм, используя экстракционный растворитель в качестве раствора сравнения, и строят график абсорбции в зависимости от концентрации ДЭГФ.

А.4.10.4 Процедура экстракции

Заполняют пустой пластиковый контейнер до половины номинальной емкости через трубку для сбора объемом экстракционного растворителя, нагретого до температуры 37 °С. Полностью удаляют воздух из пластикового контейнера и запаивают трубку для сбора. Размещают наполненный пластиковый контейнер в горизонтальном положении на водяную баню, поддерживаемую при температуре (37  1) °С, на (60  1) мин, не встряхивая. Снимают пластиковый контейнер с водяной бани, осторожно переворачивают его 10 раз и переносят содержимое в стеклянную колбу.

Измеряют максимальное поглощение при 272 нм, используя экстракционный растворитель в качестве эталонного раствора.

А.4.10.5 Описание результатов

Определяют количество экстрагируемого ДЭГФ, сравнивая результат, полученный для пластикового контейнера (см. А.4.10.4) с калибровочным графиком поглощения для стандартных растворов (см. А.4.10.3).