Приложение 3. Инструкция по забору и доставке материалов для лабораторного исследования от больных, подозрительных на особо опасные заболевания

Приложение 3
к приказу
Министерства здравоохранения
Челябинской области,
Управления Роспотребнадзора
по Челябинской области
от 22 апреля 2022 г. N 674/97

Инструкция
по забору и доставке материалов для лабораторного исследования от больных, подозрительных на особо опасные заболевания

Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник медицинской организации, прошедший обучение по организации работы в условиях регистрации особо опасных инфекций. Забор производят в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры, стерильными инструментами. Упаковка, маркирование, условия хранения и транспортирования материала для проведения лабораторной диагностики при подозрении на особо опасные инфекции должны соответствовать требованиям санитарно-эпидемиологических правил СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней" и методических указаний МУ 3.4.2552-09 "Организация и проведение первичных противоэпидемических мероприятий в случае выявления больного (трупа), подозрительного на заболевание инфекционными болезнями, вызывающими чрезвычайные ситуации в области санитарно-эпидемиологического благополучия населения".

Забор клинического материала, обученный медицинский персонал осуществляет в средствах индивидуальной защиты органов дыхания (респиратор типа ШБ-1 или РБ "Лепесток-200"), защитных очках или щитках для защиты лица, бахилах, двойных резиновых перчатках. После процедуры отбора материала перчатки обрабатываются растворами дезинфицирующих средств, руки после снятия перчаток обрабатываются антисептиками.

Перед забором материала необходимо заполнить бланк направления и поместить его в полиэтиленовый пакет.

1. Алгоритм забора крови:

При наличии у больного лихорадки неясного генеза отбирается 2 пробы крови из разных кровеносных сосудов.

1) На руку больного накладывают кровоостанавливающий венозный жгут.

2) Участок кожи над выбранным для пункции сосудом дезинфицируют тампоном, смоченным 70°-ным спиртом, затем другим тампоном (возможно использование 1-2% раствора йода или другого антисептика). Дождаться высыхания кожи. Не допускается пальпирование сосуда после обработки кожи перед введением иглы.

3) Для получения сыворотки крови забор производится вакуэт-системой для сыворотки (красная крышка). Для получения цельной крови используется вакуэт-система с EDTA (фиолетовая крышка).

4) Взять иглу вакуэт и снять защитный колпачок со стороны, закрытой резиновой мембраной.

5) Вставить иглу в держатель и завинтить до упора. Подготовить все необходимые пробирки.

6) Снять защитный колпачок со второй стороны иглы, вставить выбранную пробирку крышкой в держатель, не прокалывая резиновую заглушку в крышке пробирки, ввести систему держатель-игла в вену больного, как это делается при обычной процедуре взятия крови шприцем.

7) Вставить пробирку в держатель до упора. При этом игла прокалывает резиновую мембрану и резиновую заглушку в крышке пробирки. Кровь проходит в пробирку, пока не компенсируется созданный в пробирке вакуум.

8) Снимите жгут, как только кровь начнет поступать в пробирку.

9) После прекращения тока крови извлечь пробирку из держателя. Резиновая мембрана возвращается в исходное положение, перекрывая ток крови по игле.

10) Вынуть держатель с иглой из вены и погрузить в емкость с дезинфекционным раствором.

11) При необходимости первичного посева крови на питательный бульон забрать 10 мл крови. Закрыть иглу колпачком. Поместить шприц с кровью на стерильный лоток. Над пламенем спиртовки открыть флакон с питательным бульоном, внести кровь во флакон из шприца, предварительно сняв иглу и поместив ее в дезинфицирующий раствор. Шприц также поместить в дезинфицирующий раствор. Обжечь горлышко и пробку флакона в пламени спиртовки. Закрыть флакон пробкой, осторожно, чтобы не замочить пробку флакона, перемешать содержимое круговыми движениями.

При использовании готовых флаконов со средами (завальцованных) допускается внесение крови через прокол пробки. Место прокола необходимо продезинфицировать, после прокола загерметизировать.

12) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

2. Алгоритм приготовления мазка крови для экспресс-диагностики чумы.

1) Забор крови производится одноразовым шприцем.

2) Две капли из шприца наносят на предметное стекло, помещенное в одноразовую чашку Петри. Чашку закрывают. После того, как мазок подсохнет, его помещают в смесь Никифорова на 30 минут. Затем фиксированный мазок переносят в одноразовую чашку Петри, которую заклеивают лейкопластырем.

3. Алгоритм приготовления мазка крови для диагностики малярии и прочих паразитозов.

Кровь для паразитологических исследований берут капиллярную из пальца руки (у взрослых - безымянного, у детей - большого). Для прокола кожи используется стерильный одноразовый скарификатор.

1) Перед проколом кожу протирают ватным тампоном, смоченным 70-ным спиртом. Первую каплю крови вытирают сухим тампоном. Последующие капли непосредственно из пальца или с помощью гематологического капилляра переносят на стерильное предметное стекло (диаметр около 5 мм).

2) Кровь распределяют в равномерный диск или прямоугольник размером 1-1,5 см. толщина "толстой капли" должна быть такой, чтобы через нее просматривался печатный текст.

3) Мазок высушивается, укладывается в одноразовую чашку Петри.

4) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

4. Алгоритм забора материала из везикул:

Забор материала из везикул проводится двумя способами:

1) Аспират из везикул: Очаг обрабатывают стерильным физиологическим раствором. Аспирируют жидкость из везикул иглой N 26-27, присоединенной к туберкулиновому шприцу. Переносят материал в одноразовую транспортную пробирку и набирают этим же шприцем 1 -2 мл транспортной среды, промывая шприц. Сливают в ту же пробирку, закрывают и упаковывают.

2) Мазок на зонде-тампоне: обрабатывают везикулу стерильным физиологическим раствором. Разрушают везикулу стерильной иглой, собирают жидкость зондом-тампоном, стараясь собрать клетки основания везикулы. Помещают зонд-тампон в стерильную одноразовую микропробирку для ПЦР (эппендорф) с транспортной средой. Закрывают и упаковывают.

3) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

5. Алгоритм забора материала из бубона:

1) Кожу на участке, намеченном для прокола, обрабатывают 70°-ным спиртом, а затем смазывают 5%-ным раствором йода и вновь протирают 70°-ным спиртом.

2) Иглу шприца емкостью 5 мл вводят с таким расчетом, чтобы ее острие достигло центральной части бубона, после чего, оттянув до отказа поршень, медленно вытягивают иглу. В случае невозможности получить материал, в бубон вводят 0,3 - 0,5 мл стерильного изотонического раствора натрия хлорида или питательного бульона.

3) После извлечения иглы из бубона через нее набирают в шприц 0,5 мл стерильного питательного бульона (рН 7,2) из пробирки с 5 мл питательного бульона.

4) Содержимое выливают в одноразовую микробиологическую пробирку и плотно завинчивают крышку, заклеивают лейкопластырем.

5) Последние капли из шприца наносят на предметное стекло, помещенное в одноразовую чашку Петри. Чашку закрывают. После того, как мазок подсохнет, пинцетом его помещают в смесь Никифорова на 30 мин. Затем фиксированный мазок пинцетом переносят в одноразовую чашку Петри, которую заклеивают лейкопластырем.

6) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

6. Алгоритм забора материала из носоглотки: Забор проводят двумя тампонами свабами.

1) Тампоны свабы вводят легким движением по нижнему носовому ходу, прижимая крылья носа к тампону и носовой перегородке для более плотного контакта со слизистой оболочкой, на глубину 2-3 см до нижней раковины.

2) Рабочую часть одного зонда ватным тампоном помещают в стерильную микропробирку с транспортной средой. Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращают зонд не более 10-15 секунд, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и закрывают пробирку.

3) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

7. Алгоритм забора материала из зева (глотки):

Забор проводят тампоном свабом натощак или через 3-4 часа после приема пищи. Перед взятием пробы проводится полоскание полости рта кипяченой водой.

1) Мазок берут сухим стерильным ватным тампоном вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, прижимая язык одноразовым полимерным стерильным шпателем. Забор проводится поочередно: правая миндалина, правая небная дуга, левая миндалина, левая небная дуга, язычок, задняя стенка глотки. При взятии пробы не касаются тампоном слизистых щек, языка, губ, а также не собирают слюну.

2) После использования, шпатель сбрасывают в емкость с дезинфекционным раствором.

3) После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую микропробирку с транспортной средой (500 мкл стерильного 0,9% раствора натрия). При необходимости зонд обламывают. При отсутствии транспортной среды допускается забор материала в стерильную одноразовую микропробирку.

4) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

8. Алгоритм забора мокроты:

1) Перед сбором мокроты провести туалет ротовой полости.

2) Мокроту забирают в одноразовые контейнеры с завинчивающимися крышками.

3) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

Одновременно с пробой мокроты в лабораторию отправляются смывы из зева.

9. Алгоритм забора мочи:

Не допускается собирать мочу с постельного белья, из мочеприемника. Перед сбором промыть наружные половые органы кипяченой водой. Не допускается использование дезинфектантов.

1) Мочу в объеме 100 мл забирают в одноразовые контейнеры с завинчивающимися крышками. При необходимости забор осуществить с помощью стерильного одноразового катетера, который вводят в мочевыводящие пути.

2) Упаковывается в соответствие с алгоритмом.

10. Алгоритм забора рвотных масс:

Рвотные массы для лабораторного исследования необходимо брать немедленно при выявлении больного и обязательно до начала лечения антибиотиками.

1) Рвотные массы в количестве 20,0 мл забирают с помощью ложки, вмонтированной в крышку контейнера, либо стеклянной трубки с грушей, не перенося материал на расстояние, в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой.

2) Протирают руки, затем контейнер салфеткой, смоченной дезинфекционным раствором.

3) Контейнер упаковывают в соответствие с алгоритмом.

11. Алгоритм забора фекалий:

Испражнения для лабораторного исследования необходимо брать немедленно при выявлении больного и обязательно до начала лечения антибиотиками.

1) Испражнения в количестве 20,0 мл забирают с помощью ложки, вмонтированной в крышку контейнера, либо стеклянной трубки с грушей, не перенося материал на расстояние, в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой.

2) Протирают руки, затем контейнер салфеткой, смоченной дезинфекционным раствором.

3) Контейнер упаковывают в соответствие с алгоритмом.

При отсутствии испражнений материал забирают ректальными полимерными петлями.

1) Петлю смачивают стерильным физиологическим раствором и вводят в прямую кишку на глубину 5 -6 см.

2) Содержимое переносят в флакон с 1%-ной пептонной водой, погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращают петлю не более 10-15 секунд, избегая разбрызгивания раствора

3) Петлю сбрасывают в емкость с дезинфекционным раствором.

4) Контейнер упаковывают в соответствие с алгоритмом.

12. Алгоритм забора проб материала для исследования на вирус Зика:

1) Процедуру по забору материала осуществляют в средствах защиты, соответствующих противочумному костюму II типа.

2) Для исследования забирают кровь. Забор материала производят стерильными инструментами в стерильные одноразовые пробирки.

3) Забор крови производят натощак или не менее чем через 3 часа после приема пищи из вены с помощью вакуумной системы для забора крови или одноразовым шприцем с иглой диаметром 0,8-1,1 мм в 2 пробирки с антикоагулянтом (6% ЭДТА в соотношении с кровью 1:20, или 3,8% раствором натрия цитрата в соотношении с кровью 1:9) и в 2 пробирки с активатором сгустка или стерильные без реагента (для изучения сыворотки). Пробирки с реагентом и кровью аккуратно переворачивают несколько раз вверх дном, чтобы кровь перемешалась с реагентом. Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя!

4) Пробирки герметично закрывают, маркируют - указывают порядковый номер пробы, Ф.И.О. больного, дату взятия образца, допускается маркировка только номером.

5) Вся дополнительная информация заносится в сопроводительный документ. В сопроводительном документе указывается: наименование направляющего материал учреждения, Ф.И.О., возраст больного, предполагаемый диагноз, даты начала заболевания и взятия материала, время забора, вид материала, данные эпидемиологического анамнеза, использованные в лечении больного антибактериальные, противовирусные или иммунологические препараты (дата и доза), цель исследования, фамилию и должность медицинского работника, забравшего материал. Сопроводительный документ составляется в 2 экземплярах: один направляется вместе с пробами в лабораторию, второй остается у лица, направляющего пробы на исследование.

6) Пробирки обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают, перекладывая адсорбирующим материалом, в полиэтиленовый пакет с застежкой, и помещают вертикально внутрь дополнительного пластикового контейнера с завинчивающейся крышкой, в котором также находится некоторое количество адсорбирующего влагу материала. Строго дважды упакованные образцы материала от разных пациентов могут быть транспортированы в одном дополнительном контейнере.

7) Упакованные, как указано выше образцы биологического материала помещают в переносной термоизолирующий контейнер (кейс) с хладоагентами, на котором должен быть особый знак "Опасно! Не открывать во время перевозки", кейс опечатывают, прикладывают сопроводительный документ и транспортируют в лабораторию 2 человека, информированных о правилах транспортирования материала. Перед транспортировкой извещают специализированную лабораторию, в которую направляется материал.

8) Отправку материала в лабораторию особо опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Челябинской области" необходимо обеспечить в течение 2-х часов после момента забора. До отправки материал необходимо сохранять при температуре от +4°С до +8°С. Не допускается повторное замораживание - оттаивание материала.

12. Алгоритм забора материала на новую коронавирусную инфекцию Мазок с носоглотки и зева - в пластиковые пробирки и тампоны для мазков в одну пробирку, транспортировка при 4° С, бронхоальвеолярный лаваж, эндотрахеальный аспират, аспират носоглотки или смыв из носа, мокрота - в стерильный контейнер, доставка при температуре 4° С в течение 48 часов. Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет работник медицинской организации, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность микроорганизмами II группы патогенности. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость.

13. Алгоритм забора материала от трупа:

1) Забор материала от трупа для лабораторного исследования производят стерильными инструментами.

2) Вырезанный для исследования кусочек органа, помещают в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой, после чего инструменты каждый раз вытирают увлажненным тампоном, смачивают в спирте и обжигают над пламенем горелки.

При подозрении на чуму.

Берут кусочки печени, селезенки, легких, лимфатических узлов, костного мозга из трубчатой кости и грудины, а также кровь, или сгустки ее из полости сердца и крупных сосудов.

Кровь берут из полости сердца шприцем с длинной иглой достаточно широкого диаметра и переносят в стерильную пробирку с резиновой пробкой. Прокол сердечной мышцы производят через участок ее, простерилизованный прикосновением раскаленного металлического шпателя. Если полость желудочка пуста, можно взять кровь из предсердия, крупного сосуда.

При подозрении на холеру.

Берут отрезки (длиной около 10 см) верхней, средней и нижней частей тонкой кишки, разрез производят между двойными лигатурами, предварительно наложенными на оба конца изымаемого участка кишечника. Желчный пузырь после перевязки протока извлекают целиком. Содержимое кишечника и желчь от трупа можно взять стерильным шприцем с толстой иглой в объеме до 10 мл и перенести в емкость с 1%-й пептонной водой.

При подозрении на SARS.

Берут ткани легких, сегментарные бронхи, кровь, образцы фекалий Взятые образцы органов трупов укладывают отдельно в полимерные контейнеры для сбора и транспортировки, плотно завинчивают крышки, протирают салфеткой, смоченной дезинфекционным раствором. Заклеивают лейкопластырем. Подписывают маркером.

При подозрении на COVID-19:

Берут ткани биопсии или аутопсии, включая легкие, упаковывают в стерильный контейнер с транспортной средой, доставляют при температуре 4° С в течение 24 часов.

13. Алгоритм упаковки материала:

Все материалы, доставляемые в лабораторию, должны быть герметично упакованы в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности" в следующем порядке:

1) транспортная емкость с отобранными образцами (плотно закрывающиеся пластмассовые пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками); плотно закрывается, верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой герметизируется, с использованием пластыря или пластилина;

2) в плотный полиэтиленовый пакет подходящего размера с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки, помещают транспортную емкость; полиэтиленовый пакет следует герметично заклеить или запаять;

3) в отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают бланк направления с указанием: наименование направляющего учреждения, Ф.И.О. больного, возраст, место жительства, предварительный диагноз, эпидемиологический анамнез, вид материала, дата и время взятия материала, данные об использовании антибиотиков, о вакцинации (в зависимости от нозологической формы);

4) пакеты с образцами от одного пациента вместе с направлением упаковывают во второй плотный полиэтиленовый пакет. Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же пакет;

5) герметично закрытые полиэтиленовые пакеты помещают в термоизолирующий, плотно закрывающийся контейнер (термос), приспособленный для транспортирования биологических материалов;

В термоконтейнеры и термосы помещают охлаждающие элементы или пакеты со льдом.

Доставка материала производится специальным транспортом в сопровождении 2 человек, один из которых медицинский работник, в контейнере при температуре от +4°С до +8°С в течение 1-2 часов в ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Челябинской области" г. Челябинск, ул. Свободы, д. 147. Материал на холеру должен храниться при комнатной температуре или в термостате.