Приложение 2. Профессиональные навыки специалистов, осуществляющих лабораторную диагностику холеры

Приложение 2
к МУК 4.2.3746-22

Профессиональные навыки специалистов, осуществляющих лабораторную диагностику холеры

1. Знания и умения специалистов МО, ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора и их филиалов, выполняющих бактериологические исследования на холеру в лабораториях, имеющих разрешение на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей III-IV групп патогенности (опасности)

1. Сотрудникам с высшим специальным образованием необходимо знать:

- основные положения эпидемиологического надзора за холерой, в том числе в части, касающейся сроков, объемов и контингентов, подлежащих обследованию на холеру, сроков, объемов и вида исследуемых проб из объектов окружающей среды;

- нормативные документы, регламентирующие проведение исследований, связанных с выделением возбудителя холеры;

- требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности, а также требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителем холеры;

- этапы подготовительной работы (подготовка питательных сред, диагностических препаратов, реактивов);

- требования к доставке клинического материала и проб из объектов внешней среды, регистрации, хранению, уничтожению;

- порядок исследования материала в условиях односменной и круглосуточной работы лаборатории;

- порядок исследования материала в зависимости от времени отбора и доставки его в лабораторию;

- этапы лабораторного исследования на холеру;

- методы ускоренной диагностики холеры;

- культуральные, морфологические, серологические и биохимические свойства холерных вибрионов;

- сроки выдачи предварительного положительного результата исследования;

- правила и сроки передачи выделенных (подозрительных) культур.

2. Сотрудникам с высшим специальным образованием необходимо уметь выполнять диагностическое исследование клинического материала на холеру:

- отбирать колонии со щелочного агара и среды TCBS с характерным для вибрионов ростом;

- выполнять микроскопию мазков, окрашенных по Граму на всех этапах исследования;

- определять индофенолоксидазу;

- ставить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации с холерными сыворотками О1, Огава, Инаба, RO и О139;

- выполнять микроскопию и оценку результатов мазков, обработанных флюоресцирующими иммуноглобулинами (МФА);

- выполнять реакцию иммобилизации вибрионов (РИВ) с использованием сывороток холерных специфических;

- вести необходимую документацию.

3. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны знать:

- правила работы с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;

- этапы подготовительной работы (подготовку посуды, питательных сред, диагностических препаратов, реактивов;

- этапы лабораторного исследования на холеру;

- культуральные, морфологические свойства холерных вибрионов, отношение вибрионов к углеводам в полиуглеводных средах.

4. Лаборанты, медицинские лабораторные техники и медицинские технологи должны уметь:

- осуществлять отбор проб воды из поверхностных водоёмов, сточных вод и других объектов окружающей среды (только для лабораторий ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора и их филиалов);

- готовить к работе необходимые питательные среды;

- готовить ингредиенты для окраски мазков по Граму;

- готовить разведения сывороток для постановки реакции слайд-агглютинации и иммунофлюоресценции (при наличии люминесцентного микроскопа);

- выполнять первичные посевы исследуемого материала и пересевы со сред обогащения;

- готовить мазки, зафиксировать их, окрашивать по Граму, а также флюоресцирующими иммуноглобулинами;

- ставить пробу на индофенолоксидазу;

- проводить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации с холерными сыворотками О1, Огава, Инаба, RО и О139;

- ставить реакцию иммобилизации с сыворотками холерными;

- готовить отработанный материал для автоклавирования.

2. Знания и умения специалистов, выполняющих бактериологические исследования на холеру в лабораториях, имеющих разрешение на работу с микроорганизмами II-IV групп патогенности (опасности)

1. Сотрудникам с высшим специальным образованием необходимо знать:

- основные положения эпидемиологического надзора за холерой, в том числе в части, касающейся обследования больных на холеру;

- нормативные документы, регламентирующие проведение исследований, связанных с выделением возбудителя холеры;

- требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями II-IV групп патогенности, а также требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителем холеры;

- этапы подготовительной работы (подготовка питательных сред, диагностических препаратов, реактивов);

- требования к доставке клинического материала, регистрации, его хранению, уничтожению;

- порядок исследования материала в условиях односменной и круглосуточной работы лаборатории;

- порядок исследования материала в зависимости от времени отбора и доставки его в лабораторию;

- этапы лабораторного исследования на холеру;

- методы ускоренной диагностики холеры;

- культуральные, морфологические, иммуносерологические и биохимические свойства холерных вибрионов;

- сроки выдачи предварительного положительного результата исследования;

- правила и сроки передачи выделенных (подозрительных) культур;

- методы контроля качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры;

- методы определения чувствительности к диагностическим фагам классическому и эльтор, к холерным эльтор фагам и ;

- методы оценки эпидемической значимости холерных вибрионов (ПЦР);

- методы определения антибиотикочувствительности холерных вибрионов.

2. Сотрудникам с высшим специальным образованием необходимо уметь выполнять диагностическое исследование материала на холеру:

- проводить исследование материала от больных и умерших с подозрением на холеру, от лиц, подлежащих бактериологическому обследованию на холеру, проб воды из стационарных и других точек отбора и других объектов окружающей среды, предусмотренных требованиями санитарно-эпидемиологических правил:

- идентифицировать выделенные культуры холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп по сокращенной и полной схеме с определением эпидзначимости холерных вибрионов по наличию генов ctxA и tcpA, гемолитической активности и чувствительности к фагам и ;

- определять антибиотикочувствительность выделенных культур;

- устанавливать таксономическую принадлежность холерных вибрионов не О1/не О139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae;

- вести необходимую документацию.

3. Лаборантам, медицинским лабораторным техникам и медицинским технологам необходимо знать:

- правила работы с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;

- этапы подготовительной работы (подготовку посуды, питательных сред, диагностических препаратов, реактивов;

- этапы лабораторного исследования на холеру;

- культуральные, морфологические и антигенные свойства холерных вибрионов, отношение вибрионов к углеводам в полиуглеводных средах;

- методы полной и сокращенной идентификации холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп;

- методы идентификации культур холерных вибрионов не O1/не О139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae;

- методы определения качества питательных сред и ингибиторов роста посторонней микрофлоры.

4. Лаборантам, медицинским лабораторным техникам и медицинским технологам необходимо уметь:

- готовить ингредиенты для окраски мазков по Граму;

- готовить разведения сывороток для постановки реакции слайд-агглютинации и иммунофлюоресценции (при наличии люминесцентного микроскопа);

- выполнять первичные посевы исследуемого материала и пересевы со сред обогащения;

- готовить мазки, зафиксировать их, окрашивать по Граму, а также флюоресцирующими иммуноглобулинами;

- ставить пробу на индофенолоксидазу;

- проводить с подозрительными на холерный вибрион колониями реакцию слайд-агглютинации и объемную реакцию агглютинации с холерными сыворотками О1, Огава, Инаба, RO и О139;

- ставить реакцию иммобилизации с сыворотками холерными;

- готовить отработанный материал для автоклавирования.

3. Знания и умения специалистов Центров индикации, Референс-центра и Центров верификации, выполняющих бактериологические исследования, связанные с выделением возбудителя холеры в лабораториях, имеющих разрешение на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей I-II групп патогенности (опасности)

1. Сотрудникам с высшим специальным образованием необходимо знать:

- основные положения эпидемиологического надзора за холерой;

- вопросы организации лабораторных исследований на холеру;

- требования биологической безопасности при работе с зараженным и подозрительным на заражение микроорганизмами II группы патогенности материалом;

- таксономию и классификацию представителей семейства Vibrionaceae;

- морфологические, культуральные, биохимические свойства холерных вибрионов;

- серологические методы изучения свойств холерных вибрионов;

- определение чувствительности к диагностическим фагам классическому и эльтор;

- методы определения эпидемической значимости холерных вибрионов;

- определение чувствительности к антибиотикам, химиопрепаратам и дезинфектантам;

- этапы лабораторного исследования на холеру, сроки выдачи ответов, правила и сроки передачи выделенных культур;

- требования к доставке материала, его хранению, регистрации, уничтожению, подготовке к передаче и транспортированию;

- этапы подготовительной работы (подготовку питательных сред для выделения и идентификации холерных вибрионов, диагностических препаратов, реактивов);

- методы серологической диагностики холеры;

- критерии оценки качества питательных сред, используемых для диагностики холеры, ингибиторов посторонней микрофлоры;

- нормативные документы, используемые при проведении лабораторных исследований на холеру.

2. Сотрудникам с высшим специальным образованием необходимо уметь:

- провести полное исследование по схеме лабораторной диагностики холеры материала от больных и умерших с подозрением на холеру, проб из объектов окружающей среды;

- идентифицировать выделенные культуры холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп по сокращенной и полной схеме;

- определить эпидемическую значимость культур;

- определить чувствительность к антибиотикам выделенных культур;

- провести серологическую диагностику материала от больных холерой, вибриононосителей и других контингентов - по эпидпоказаниям;

- установить таксономическую принадлежность холерных вибрионов не О1/не О139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae;

- осуществлять контроль качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры;

- вести необходимую документацию.

3. Лаборантам, медицинским лабораторным техникам и медицинским технологам необходимо знать:

- морфологические, культуральные и основные биохимические свойства холерных вибрионов;

- этапы лабораторного исследования на холеру;

- методы полной и сокращенной идентификации холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп;

- методы идентификации культур холерных вибрионов не О1/не О139 серогрупп и других представителей рода Vibrio и семейства Vibrionaceae;

- методы серологической диагностики холеры;

- правила работы с материалом, зараженным или подозрительным на заражение возбудителем холеры;

- этапы подготовительной работы (подготовку посуды, красок, питательных сред для выделения и идентификации холерных вибрионов, диагностических препаратов, реактивов);

- методы определения качества питательных сред и ингибиторов посторонней микрофлоры.

4. Лаборантам, медицинским лабораторным техникам и медицинским технологам необходимо уметь:

- приготовить основные ингредиенты для окраски мазков по Граму;

- приготовить реактивы для постановки пробы на оксидазу, выявления образования ацетилметилкарбинола, индола, сероводорода, нитратредуктазы, ;

- подготовить разведения сывороток для постановки слайд- и развернутой реакции агглютинации и иммунофлуоресценции;

- произвести первичные посевы и пересевы поступившего материала;

- сделать мазки, зафиксировать их и окрасить;

- поставить пробу на индофенолоксидазу;

- поставить слайд- и развернутую реакцию агглютинации с холерными сыворотками;

- поставить реакцию иммобилизации с холерными сыворотками;

- провести определение качества питательных сред и теллурита калия;

- подготовить отработанный материал для автоклавирования;

- участвовать в идентификации выделенной культуры; определении эпидемической значимости выделенной культуры по регламентированным для этих лабораторий тестам; определении антибиотикочувствительности выделенных культур; исследовании сывороток крови больных холерой и вибриононосителей в системе серологических реакций.