Приложение В (справочное). Условия хроматографирования для метода прямого детектирования

Приложение В
(справочное)

Условия хроматографирования для метода прямого детектирования

В.1 Общие положения

Поскольку инструментальное оснащение лабораторий может различаться, предоставление каких-либо конкретных указаний по анализу не представляется возможным. Следующие рабочие характеристики были успешно опробованы и применялись.

Используемый метод должен быть проверен путем определения степени извлечения (см. 7.5), и наблюдаемые результаты должны находиться в диапазоне, указанном в приложении А.

В.2 Пример условий для ионной хроматографии

В.2.1 Реактивы подвижной фазы

Все реактивы должны быть не ниже аналитической степени чистоты.

В.2.1.1 Безводный сульфат аммония (NH ₄) ₂SO ₄ (CAS: 7783-20-2).

В.2.1.2 Гидроксид натрия NaOH (CAS: 1310-73-2).

В.2.1.3 Исходный раствор подвижной фазы

Растворяют 33,00 г безводного сульфата аммония и 0,40 г гидроксида натрия в мерной колбе вместимостью 1000 см ³ и доводят объем раствора до метки водой (см. 5.7). Данный раствор содержит 250 ммоль сульфата аммония и 10 ммоль гидроксида натрия. рН раствора составляет 8,2. Из данного раствора готовят еженедельный элюент для хроматографии (см. В.2.1.4). Срок хранения раствора - до четырех месяцев при температуре 4 °С.

В.2.1.4 Подвижная фаза

Переносят 100 см ³ исходного раствора элюента (см. В.2.1.3) в мерную колбу вместимостью 1000 см ³ и доводят объем раствора до метки водой (см. 5.7). Данный раствор содержит 25 ммоль сульфата аммония и 1 ммоль гидроксида натрия. Проверяют, чтобы рН раствора составлял 8,0 0,2. Фильтруют раствор через мембранный фильтр. Срок хранения раствора - до одной недели при комнатной температуре.

В.2.2 Параметры оборудования

Колоночный термостат - 30 °С.

Подвижная фаза - 25 ммоль сульфата аммония и 1 ммоль гидроксида натрия (см. В.2.1.4).

Колонка: анионообменная колонка (полиметакрилатная смола с функциональными группами четвертичного аммония) - 4,6 х 75 мм, внутренний диаметр предколонки - 1 мм.

Диапазон длин волн (только для детектора DAD): регистрируют УФ-спектр в диапазоне от 200 до 550 нм.

Длина волны, соответствующая хроматограмме экстракта, - 372 нм.

Скорость потока - 0,9 см ³/мин.

Объем вводимой пробы - 50 мкл.

Время записи хроматограммы - 5 мин.

Время уравновешивания колонки между введениями - 6 мин.

Детектор с фотодиодной матрицей (DAD) позволяет достоверно идентифицировать хромат за счет сравнения UV-спектра обнаруженного пика со стандартным спектром хромата. На рисунке В.1 показана хроматограмма, полученная для одного образца, содержащего 3,9 мг/кг Cr (VI). На рисунке В.2 показан УФ-спектр аниона хромата, обнаруженного в образце.

В.3 Примеры хроматограммы и УФ-спектра, полученных при анализе образца, имеющегося в продаже

X - мин; Y - AU

Примечание - Пик: хромат, 3,755 мин.

Рисунок В.1 - Хроматограмма, полученная для одного образца, содержащего 3,9 мг/кг Cr(VI)

X - нм; Y - AU

Рисунок В.2 - Ультрафиолетовый спектр хромат-иона, зафиксированного на хроматограмме образца с рисунка В.1 на 3,757 мин детектором с фотодиодной матрицей (DAD)