Приложение А (справочное). Другие нейтрализующие разбавители

Приложение А
(справочное)

Другие нейтрализующие разбавители

А.1 Общие положения

Любой нейтрализующий разбавитель может использоваться для приготовления исходной суспензии, если он будет проверен и будет подтверждена его пригодность. Нижеприведенные нейтрализующие разбавители являются примерами соответствующих составов. Общая информация по нейтрализации приведена в приложении D.

А.2 Жидкий бульон Eugon LT 100

А.2.1 Общие положения

Данная среда содержит компоненты, которые нейтрализуют ингибирующие вещества, присутствующие в пробе (лецитин и полисорбат 80), а также диспергирующий агент (октоксинол 9).

А.2.2 Состав

- панкреатический гидролизат казеина	15,0 г;
- папаиновый гидролизат соевой муки	5,0 г;
- L-цистин	0,7 г;
- натрия хлорид	4,0 г;
- натрия сульфит	0,2 г;
- глюкоза	5,5 г;
- яичный лецитин	1,0 г;
- полисорбат 80	5,0 г;
- октоксинол 9	1,0 г;
- вода	1 000 см 3

А.2.3 Приготовление

Растворяют последовательно в горячей воде: полисорбат 80, октоксинол 9 и яичный лецитин до их полного растворения. Растворяют другие компоненты, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации рН среды должен быть равен 7,0 0,2 при измерении при комнатной температуре.

А.3 Лецитин-полисорбатный разбавитель (LP)

А.3.1 Состав

- полипептон	1,0 г;
- яичный лецитин	0,7 г;
- полисорбат-80	20,0 г;
- вода	980 см 3.

А.3.2 Приготовление

Смешивают и растворяют компоненты при нагревании. Охлаждают до температуры 25 °С перед розливом раствора в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. После стерилизации рН среды должен быть равен 7,2 0,2 при измерении при комнатной температуре.