Приложение F (справочное). Валидация аналитических методов, применяемых для исследования экстрагируемых/выщелачиваемых веществ

Приложение F
(справочное)

Валидация аналитических методов, применяемых для исследования экстрагируемых/выщелачиваемых веществ

Для подтверждения пригодности аналитического метода для целей конкретного исследования следует выполнить его валидацию. Для исследований экстрагируемых/выщелачиваемых веществ применяют аналитические методы, предназначенные для двух различных целей: скрининга образцов на предполагаемое наличие исследуемых веществ и определения содержания в образцах конкретных исследуемых веществ (специфические аналитические методы). В зависимости от цели исследования используют соответствующий способ валидации метода.

Результаты валидации аналитического метода регистрируют в протоколе валидации, в котором приводят следующую информацию:

- соответствующие параметры валидации;

- оборудование и средства измерений, используемые для оценки параметров валидации;

- установленное значение каждого параметра.

Параметры валидации методов скрининга:

- чувствительность, предположительно значение LOQ менее или равно значению ППДК (подробные сведения приведены в приложении E).

Примечание 1 - Следует учитывать, что при низких значениях ППДК получить значение LOQ, менее или равное значению ППДК, может быть невозможно. В этом случае следует применять минимальное значение LOQ, при этом данные о всех исследуемых веществах, содержание которых в образце более LOQ, необходимо регистрировать в протоколе. Если значение LOQ более значения ППДК, то в протоколе должны быть приведены соответствующие объяснения и обоснования;

- специфичность, т.е. пригодность метода для выявления в образце конкретного вещества среди других компонентов и его количественной оценки;

- точность, т.е. степень близости результата измерений к принятому опорному значению (например, значение концентрации вещества в экстракте приблизительно соответствует тому количеству вещества, которое добавили в экстракт); точность методов скрининга, как правило, обеспечивают применением модельных веществ, которые являются репрезентативными для экстрагируемых веществ;

- прецизионность, т.е. степень близости друг к другу результатов повторных измерений одного и того же экстракта или стандартного раствора, содержащего экстрагируемые или выщелачиваемые вещества;

- динамический диапазон, т.е. диапазон значений концентрации, в котором определены наличие и концентрация исследуемого вещества. Динамический диапазон может быть установлен путем анализа модельных или стандартных растворов различных концентраций.

Примечание 2 - Данный параметр валидации метода рекомендуется определять при установлении LOQ и подтверждении приемлемости результатов исследования.

Примечание 3 - Если исследуемое вещество содержится в экстракте и его количество находится вне пределов установленного динамического диапазона, то рекомендуется выполнить корректировку экстракта, например, путем разбавления.

Параметры валидации специфических аналитических методов:

- чувствительность, значимая при условии, что диапазон измеряемых значений в методе включает значение LOQ или приближается к нему;

- специфичность (см. параметры валидации методов скрининга);

- точность (см. параметры валидации методов скрининга); при этом в отличие от методов скрининга точность специфических аналитических методов обеспечивают применением конкретных веществ, выбранных для исследований.

Примечание 4 - Для определения высвобождаемых веществ специфическими аналитическими методами рекомендуется применять стандартные растворы;

- прецизионность (см. параметры валидации методов скрининга);

- динамический диапазон, т.е. диапазон значений концентраций, в котором определены наличие и концентрация исследуемого вещества. Динамический диапазон может быть установлен путем анализа стандартных растворов различных концентраций;

- степень соответствия, в которой взаимосвязь между концентрацией исследуемого вещества в стандартном растворе и откликом, полученными при анализе стандартного раствора, выражена простой математической функцией. Данная математическая функция, как правило, является линейной функцией, при этом допускается использовать простые нелинейные функции, если они соответствуют критериям соответствия.

Валидация метода является подтверждением надежности как для методов скрининга, так и для специфических методов.

Для валидации методов допускается использовать дополнительные параметры, при этом должно быть представлено соответствующее обоснование. К таким дополнительным параметрам валидации относят: надежность, эффективность (включая разрешение для методов хроматографии), матричные эффекты, стабильность образца и стандартного раствора.

Учитывая различные цели и функции указанных методов, процессы валидации методов скрининга и специфических аналитических методов будут отличаться друг от друга при похожих критериях валидации. Например, валидацию метода скрининга и специфического аналитического метода осуществляют по параметру "точность", при этом используют различные процессы валидации. Для валидации специфического аналитического метода параметр "точность" устанавливают для конкретного исследуемого вещества, а для валидации метода скрининга параметр "точность" устанавливают для группы модельных веществ. При валидации методов скрининга применяют менее строгие требования к параметру "точность", так как данными методами получают сведения о наличии исследуемого вещества в образце, в отличие от специфических аналитических методов, с помощью которых получают данные о количественном содержании исследуемого вещества в образце.

При валидации специфических аналитических методов применяют более строгие требования к параметру "прецизионность", чем при валидации методов скрининга.

Параметр "специфичность" применяют при валидации методов скрининга для упрощения процесса идентификации отдельных экстрагируемых веществ, например, хроматографический пик, связанный с экстрагируемым веществом, формируется только этим экстрагируемым веществом. Параметр "специфичность" применяют при валидации специфических аналитических методов для подтверждения чистоты хроматографического пика исследуемого вещества, что необходимо для обеспечения требуемых показателей точности и прецизионности. Так как исследуемое вещество выбирают до начала измерений, то параметр "специфичность" для специфического аналитического метода рекомендуется устанавливать до проведения валидации. Параметр "специфичность" для методов скрининга рекомендуется устанавливать в процессе валидации, так как невозможно заранее определить, какие вещества будут выявлены в образце. Таким образом, параметр валидации "специфичность" определяют и устанавливают по-разному для методов скрининга и специфических аналитических методов.

Результат валидации метода считают положительным, т.е. метод признан пригодным для исследований, если установлено его соответствие:

- параметрам валидации в соответствии с протоколом;

- требованиям по применению для исследования конкретных материалов МИ.

Аналитические методы, валидация которых выполнена, должны соответствовать следующим дополнительным требованиям (но не ограничиваясь таковыми):

- документирование метода должно осуществляться в форме стандартной операционной процедуры (СОП) в рамках системы управления документацией;

- объем исследований должен быть четко определен, утвержден и зафиксирован в СОП метода;

- должно быть приведено подробное научное описание и обоснование применения метода с подтверждением его пригодности для исследования конкретного материала МИ;

- персонал, выполняющий исследования, должен иметь соответствующие навыки и квалификацию;

- применяемое оборудование должно быть аттестовано/откалибровано в установленном порядке.

Валидацию аналитического метода также подтверждают в течение периода непосредственного применения путем оценки его соответствия трем следующим критериям:

a) метод соответствующим образом утвержден и внедрен в установленном порядке;

b) внедренный метод обеспечивает выполнение процедур исследования на таком же уровне, как и при проведении его валидации;

c) метод обеспечивает получение приемлемых результатов на протяжении всего его применения.

В период применения метода его валидацию подтверждают оценкой по минимальному числу рабочих параметров, по каждому из которых отдельно и в совокупности устанавливают соответствие метода трем указанным критериям. Параметры и критерии, которые применяют для подтверждения валидации метода при его применении, должны быть достаточно точными, чтобы этим методом обеспечивалось получение данных установленного качества, но не настолько, чтобы происходило отклонение потенциально приемлемых результатов. По данным о валидации метода, собранным в период его применения и статистически обработанным, можно сделать окончательный вывод о пригодности или непригодности метода для исследования конкретного материала МИ.

Информация о планировании и проведении процедур валидации аналитических методов приведена в [23]. В приложении G приведены сведения о валидации аналитических методов, которые рекомендуется включать в отчет об исследовании химических свойств материалов МИ.