Приложение N 3. Инструкция по отбору проб клинического материала для проведения микробиологического (культурального) исследования

Приложение N 3
к приказу Министерства
здравоохранения Свердловской области
от 05.07.2023 N 1538-п

Инструкция
по отбору проб клинического материала для проведения микробиологического (культурального) исследования

1. Общие требования к направлению материала на микробиологическое исследование

1.1. Врач, направляющий материал на исследование, заполняет форму через лабораторную информационную систему медицинской организации и распечатывает ее. При отсутствии лабораторной информационной системы в медицинской организации заполняется бумажный вариант (приложение N 4 к настоящему приказу).

1.2. Расходные материалы для отбора проб необходимо получить в лаборатории по предварительному заказу (п. 2 настоящей инструкции).

1.3. Расходные материалы хранят при комнатной температуре в темноте.

1.4. Материал отбирают медицинские работники, допущенные к взятию и посеву материала, прошедшие инструктаж по отбору проб.

1.5. Все работы проводят с соблюдением требований биологической безопасности при работе с патогенными биологическими агентами III-IV групп патогенности в соответствии с СанПин 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней".

1.6. Утилизацию использованных расходных материалов производят в соответствии с требованиями СанПин 2.1.3684-21 "Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий".

1.7. Взятие пробы осуществляют с соблюдением правил асептики и антисептики в соответствии с инструкцией для данного вида материала (п. 3 настоящей инструкции).

1.8. В случае, если нет возможности собрать адекватный образец материала, соответствующий критериям пригодности, проба в лабораторию не направляется.

1.9. Обязательным является маркировка каждой пробы. На контейнере (транспортной системе) необходимо указать

"Ф.И.О. пациента__________________

Наименование медицинской организации_____________________

Отделение________________________

Дата________________________

Время отбора _________________________.".

1.10. Маркированные контейнеры, транспортные системы с биологическим материалом помещают в отдельные зип-пакеты, пробирки - в штативы. Для транспортировки в лабораторию используют термоконтейнер, дно, которого проложено салфеткой, смоченной дезинфицирующим средством.

1.11. Направления складывают в файл и помещают во внешний карман транспортировочного контейнера.

1.12. Условия доставки не должны допускать переохлаждения или перегрева проб. Время транспортировки материала в лабораторию определяется особенностями биоматериала и использованием транспортных систем.

2. Расходные материалы для микробиологического исследования

Расходные материалы получают в лаборатории по предварительной заявке с указанием

1. Название медицинской организации;

2. Дата;

3. Наименования транспортной системы и количества;

4. Ф.И.О. ответственного лица.

	Транспортная система	Назначение	Правила отбора	Условия хранения и доставки материала
2.1.	ГАРАНТ: Рисунок не приводится Среда Амиеса (AmiesSwab)	Исследование отделяемого любого локуса, включая исследование на анаэробную флору, дифтерию, коклюш, менингит	1. Откройте стерильную упаковку и извлеките комплект пробирка+аппликатор. 2. Произведите отбор материала при помощи аппликатора. 3. Открутите крышку пробирки, вставьте аппликатор и преломите его в точке, отмеченной цветом, утилизируйте как отходы класса А. 4. Закрутите крышку пробирки. 5. Промаркируйте пробирку (п. 1.9)	В холодильнике 5-7 С°; или при комнатной температуре до 48 ч.
2.2.	ГАРАНТ: Рисунок не приводится Система для отбора фекалий (FecalSwab)	Исследование фекалий на патогенную и потенциально патогенную флору
2.3	ГАРАНТ: Рисунок не приводится среда Амиес с углем	Исследование отделяемого любого локуса на аэробную и факультативно-анаэробную флору	1. Откройте стерильную упаковку и извлеките пробирку. 2. Открутите крышку пробирки, извлеките аппликатор. 3. Произведите отбор материала при помощи аппликатора. 4. Вставьте аппликатор в пробирку 5. Плотно закрыть. 6. Промаркируйте пробирку (п. 1.9)	В холодильнике 5-7 С°; или при комнатной температуре до 16-18 ч.
2.4	ГАРАНТ: Рисунок не приводится	Исследование мочи, мокроты, аспирата, эксудата, аутопсия	1. Открутите крышку контейнера. 2. Поместите материал в контейнер. 3. Плотно закрутите крышку. 4. Промаркируйте контейнер (п. 1.9)	Любой материал желательно доставить в течении 2 ч., При невозможности доставить допускается хранение в холодильнике моча - в холодильнике до 8 ч.; мокрота - до 24 ч.; эксудаты, аспираты - использовать транспортную систему (п. 2.1)
2.5	ГАРАНТ: Рисунок не приводится	Питательные среды для исследования крови	1. Снимите защитную пластмассовую крышечку. 2. Обработайте спиртосодержащим средством резиновую пробку. 3. Внесите пробу во флакон. 4. Повторно обработайте резиновую пробку. 5. Промаркируйте флаконы (п. 1.9)	Доставка проб в лабораторию осуществляется в течение 2-4 ч., При невозможности доставить поставить флаконы в термостат (35-37 С°); или при комнатной температуре в темноте доставка на следующий день с отметкой о способе культивирования
2.6	ГАРАНТ: Рисунок не приводится	Исследование ликвора	Материал отбирают в пробирку и флакон 1. Обработайте спиртосодержащим средством резиновую пробку. 2. Внесите 0,5 мл пробы во флакон. 3. Повторно обработайте резиновую пробку. 4. Внести оставшуюся часть пробы в пробирку. 5. Промаркировать флакон и пробирку (п. 1.9)	Доставку материала осуществляют максимально быстро не допуская переохлаждения пробы

3. Особенности отбора определенных видов клинического материала

3.1. Венозная кровь.

Биоматериал:

1) кровь из правой и левой локтевой вены;

2) кровь из катетера:

при подозрении на катетер ассоциированную инфекцию;

существование объективных причин, затрудняющих венопункцию;

3) кровь новорожденных: из периферической вены (при венепункции, первичной установке венозного катетера) или центральной вены (например, пупочный катетер).

Техника отбора

Все манипуляции осуществляют в стерильных перчатках, соблюдая правила асептики.

Категорически запрещается делать записи на штрих-кодировании.

1. Подготовьте набор флаконов в соответствии со следующими указаниями:

	Кол-во флаконов/Набор	Объем на 1 флакон	Промежуток между отбором проб
Взрослые	1 проба 1 аэробный флакон 1 анаэробный флакон	8-10 мл 8-10 мл	Нет, Пробы отбирают сразу
Взрослые Эндокардит Лихорадка неясной этиологии (38 С° около 3 нед.)	1 проба 1 аэробный флакон 1 анаэробный флакон 2 проба 1 аэробный флакон	8-10 мл 8-10 мл	1 час (в некоторых случаях допускается введение антибиотиков после отбора первой пробы)
Дети до 4 лет	1 проба 1 педиатрический флакон 2 проба 1 педиатрический флакон	0,5-3 мл 0,5-3 мл	Нет, Пробы отбирают сразу
Обследование на грибки или кандидемию	1 аэробный флакон	10 мл

2. Снимите с флакона цветную пластмассовую крышечку, не нарушая завальцованную часть.

3. Протрите резиновую пробку салфеткой (ватным шариком), смоченной спиртосодержащим средством и оставьте салфетку (ватный шарик) на пробке.

4. Обработайте место венопункции двукратно стерильной салфеткой, смоченной спиртсодержащим кожным антисептиком или способом орошения антисептиком (аэрозольным методом) в соответствии с СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезни" и МУ 3.5.1.3674-20 "Обеззараживание рук медицинских работников и кожных покровов пациентов при оказании медицинской помощи".

5. Осуществите отбор крови из правой локтевой вены в объеме, указанном выше в таблице.

6. Если первая венопункция была неуспешной, перед второй попыткой необходимо сменить иглу.

7. Смените иглу и внесите во флакон для анаэробов (флакон с СИРЕНЕВОЙ КРЫШЕЧКОЙ), исключая попадание крови на поверхность флакона.

8. Протрите резиновую пробку спиртосодержащим средством.

9. Для перемешивания наклоните флакон несколько раз на 90 градусов.

10. Повторите пункты со 2 по 8 для отбора образца во флакон для аэробов (СИНЯЯ КРЫШЕЧКА).

11. Промаркируйте флаконы на этикетке (ФИО пациента, название медицинской организации, отделение, время и дата отбора пробы).

12. Приклейте отрывную часть штрих-кода с флакона на направление.

ГАРАНТ:

Нумерация разделов приводится в соответствии с источником

3.1.1. Исследование венозного катетера

1) Соблюдая правила асептики обработать кожу вокруг катетера двукратно двумя стерильными ватными тампонами/салфетками, смоченными спиртсодержащим кожным антисептиком (для детей в возрасте 7 лет рекомендуется использовать кожные антисептики на основе этилового спирта без добавления других действующих веществ) или стерильными одноразовыми спиртовыми салфетками и наружную часть самого ЦБК (центральный венозный катетер) 70% этиловым спиртом, потом 1-2% настойкой йода. После высыхания, повторно обработать этиловым спиртом (возможно использование кожных антисептиков). Обрабатывать следует от места локализации катетера к периферии;

2) удалите центральный венозный катетер стерильным пинцетом;

3) отрежьте стерильными ножницами дистальную часть длинной 5-7 см;

4) поместите отрезок в стерильный транспортный контейнер.

Лабораторная посуда, транспортные системы для отбора материала	Условия доставки	Допустимое время доставки
Стерильный контейнер	комнатная температура	не более 2 часов

3.2. Моча

Взятие мочи на посев проводят одноразовым стерильным мочевым катетером с соблюдением правил асептики и антисептики. Для получения материала на исследование необходимо проводить специальную катетеризацию мочевого пузыря с использованием нового стерильного одноразового мочевого катетера.

Лабораторная посуда, транспортные системы для отбора материала	Объем	Условия хранения и доставки	Допустимое время доставки
Стерильный контейнер (Форма 2, п. 2.3)	Не менее 3-5 мл	2-8°С	до 8 ч.; в крайнем случае - 24 ч.

3.3. Желудочное содержимое

Отбор проводят при установке или замене желудочного зонда с соблюдением правил асептики и антисептики. Для получения материала на исследование необходимо использовать новый одноразовый стерильный зонд.

Лабораторная посуда, транспортные системы для отбора материала	Объем	Условия хранения и доставки	Допустимое время доставки
Стерильный контейнер (Форма 2, п. 2.3)	Не менее 3-5 мл	2 - 8°С	до 2 ч.

3.4. Эндотрахеальный аспират

Аспират отбирают с утра, до проведения санирующих мероприятий.

Объем пробы должен быть не менее 1 мл.

1) проведите через интубационную трубку в дистальный отдел бронхов одноразовый стерильный катетер до "заклинивания";

2) введите с помощью шприца 10-20 мл стерильного физ. раствора;

3) спустя несколько минут аспирируйте смыв;

4) поместите аспират в стерильный контейнер.

Лаб.посуда, транспортные системы для отбора материала	Условия хранения и доставки	Допустимое время доставки
Стерильный контейнер (Форма 2, п. 2.3)	комнатная температура 2 - 8°С	не более 2 часов до 24 ч.

3.5. Раневое отделяемое

Материал: ткани, аспират, мазок с открытой раневой поверхности.

Исследованию подлежит материал, взятый во время операции или инвазивной процедуры. Для адекватного проведения микробиологического исследования необходимо направлять на исследования ткани, аспират, эксудат. Мазки с раневой поверхности являются наименее предпочтительным материалом и его используют в исключительных случаях, например, когда нет возможности доставить пробу в лабораторию в течение двух часов.

Хирургический материал (ткани).

После предварительной хирургической обработки соблюдая правила асептики отбираете маленькие кусочки ткани и гнойный экссудат.

Аспират.

1) обработайте место взятия материала салфеткой, смоченной спиртосодержащим раствором или стерильным физиологическим раствором;

2) соберите материал шприцем из центра очага. Для получения достаточного количества аспирата можно предварительно ввести в очаг воспаления небольшое количество стерильного физиологического раствора;

3) поместите аспират в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой.

Мазок с открытой раневой поверхности.

1) чистите раневую поверхность с использованием стерильного физиологического раствора;

2) соберите аппликатором материал из глубины очага поражения или со стенок абсцесса, производя вращательные движения от центра к периферии.

3) поместите аппликатор в транспортную среду.

Расходные материалы и условия доставки:

Лабораторная посуда, транспортные системы для отбора материала	Условия доставки	Допустимое время доставки
Транспортная система AmiesSwab (Форма 2, п. 2.1)	2 - 8°С или комнатная температура 2 - 8°С или комнатная температура	до 48 ч.
Транспортная система с агаризированной средой Амиес с углем (Форма 2, п. 2.2)		до 16-18 ч.
Стерильный контейнер	комнатная температура	не более 2 часов