Приложение 13. Определение отношения бактерий к окраске по методу Грама

Приложение 13
к МУК 4.2.3963-23

Определение
отношения бактерий к окраске по методу Грама

1. На обезжиренное спиртом предметное стекло наносят петлей 1 каплю дистиллированной воды.

2. Вносят небольшое количество культуры из анализируемой колонии и распределяют по поверхности стекла.

3. Мазок высушивают при комнатной температуре и фиксируют трехкратным проведением через пламя горелки.

4. На препарат накладывают полоску фильтровальной бумаги и на нее наливают карболовый раствор генциана фиолетового на 0,5 - 1 мин, снимают бумагу.

5. Наливают раствор Люголя на 0,5 - 1 мин, сливают раствор Люголя.

6. Стекло промывают в этиловом спирте в течение 0,5 - 1 мин, пока не перестанет отходить краситель.

7. Затем стекло тщательно промывают водой и докрашивают в течение 1 - 2 мин фуксином Циля, разведенным 1:10 дистиллированной водой.

8. После промывания и просушивания препарата мазок микроскопируют: грамотрицательные микроорганизмы имеют розовую окраску; грамположительные микроорганизмы окрашиваются в синий цвет.

Отношение бактерий к окраске по методу Грама можно определять прибором для автоматического окрашивания мазков по Граму.

Можно использовать промышленные наборы для окраски согласно инструкции производителя.