Приложение 3. Исследование биологического действия ЭМП в эксперименте

Приложение 3
к МУ 4.3.3939-23

Исследование биологического действия ЭМП в эксперименте

1. Физиологические исследования.

1.1. Физиологические исследования включают комплекс методов, позволяющих оценить функциональное состояние центральной нервной системы в соответствии с современными методическими разработками.

1.2. Состояние центральной нервной системы оценивается по поведенческим тестам, основанным на изучении ориентировочно-исследовательских реакций, и по оценке условно-рефлекторной деятельности на положительном подкреплении.

1.3. Исследование двигательного компонента ориентировочной реакции и эмоциональной реактивности животных проводится, например, с использованием методик "открытое поле", "крестообразный лабиринт".

2. Биохимические и эндокринологические исследования.

2.1. Оценка функционального состояния нейроэндокринной системы осуществляется путем применения современных сертифицированных методов исследования.

2.2. Биохимические исследования включают показатели, характеризующие развитие окислительного стресса в организме животных. Например, содержание SS- и SH-групп в белковой и небелковой фракциях крови, активность антиоксидантных ферментов, таких как глютатионредуктаза, супероксиддисмутаза, каталаза, глютатионпероксидаза; содержание некоторых низкомолекулярных веществ: мочевая, аскорбиновая (витамин С), липоевая кислоты, глутатион, убихинол, токоферол (витамин Е), флавоноиды.

2.3. К биохимическим показателям, характеризующим развитие метаболических механизмов ответных реакций организма, относится активность ферментов энергетического обмена - гликолиза, цикла Кребса и дыхательной цепи.

2.4. При исследовании состояния эндокринной системы проводится определение в сыворотке крови прогестерона, тестостерона, лютеинизирующего и фолликулостимулирующих гормонов.

2.5. Исследование липидного обмена веществ включает определение холестерина, холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), холестерина липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), триглицеридов, общих липидов в сыворотке крови, а также определение индекса атерогенности.

2.6. В исследованиях электролитного обмена веществ определяется содержание калия, натрия, ионизированного кальция, магния, железа.

3. Исследование иммунной системы и состояния крови.

3.1. Для характеристики состояния иммунной системы проводятся исследования показателей: реакции завершения фагоцитоза, реакции связывания комплемента на холоде, реакции дегрануляции базофилов периферической крови или показателей повреждения нейтрофилов, реакции бластной трансформации лимфоцитов.

3.2. В иммунологических исследованиях рекомендуется применять комплекс следующих показателей: общее количество лейкоцитов, абсолютный и относительный уровень лимфоцитов и нейтрофилов, относительное и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов, фагоцитарную активность нейтрофилов, комплементарную активность сыворотки крови, реакции дегрануляции базофилов в периферической крови.

3.3. Для оценки системы крови, в особенности структурно-функциональных характеристик форменных элементов крови и кроветворных органов, рекомендуется исследовать следующие показатели: общее количество лейкоцитов, общее количество эритроцитов, содержание гемоглобина, дифференциальный морфологический анализ клеток периферической крови и костного мозга, тимуса, селезенки.

4. Исследования гонадотропных, тератогенных и цитогенетических эффектов.

4.1. Для изучения влияния на андрогенную функцию и другие показатели репродуктивной системы используются морфологические, биохимические, молекулярные, генетические показатели.

4.2. Функциональное состояние семенников, других органов репродуктивной системы самцов (эпидидимис, простата, семенные пузырьки) оценивается по их массе и весовым индексам (относительная масса органов).

4.3. Используются показатели, характеризующие процесс воспроизводства клеточных популяций сперматогенных клеток, эндокринной регуляции функции семенников, изменения свойств эпидидимальных сперматозоидов.

4.4. При гистологических исследованиях семенников проводится количественный анализ сперматогенных клеток различных стадий дифференцировки.

4.5. При изучении репродуктивной функции самок определяются способности к зачатию и плодовитости с дальнейшим анализом микроструктуры яичников и матки, эмбрионального развития потомства.

4.6. Тератогенный эффект при воздействии микроволн в период беременности учитывается на внутриутробных плодах незадолго до рождения (у крыс на 20-й день, у мышей на 19-й день беременности). Определяется пред-, постимплантационная и общая эмбриональная смертность.

4.7. Для оценки изменений в постнатальном развитии у животных регистрируются время и характер течения родов, количество живых и мертвых плодов, наличие уродств у новорожденных.

4.8. Развитие потомства прослеживается до 21-го дня после рождения или вплоть до полового созревания. Контролируются вес, линейные размеры животных, время открытия ушей и глаз, отрастание шерсти, развитие центральной нервной и сердечно-сосудистой систем, органов зрения.

4.9. Проводятся определение частоты хромосомных аббераций в лимфоцитах периферической крови, исследование хромосомного набора клеток костного мозга, определение доминантных леталей, указывающее на поражение клеток генеративных тканей.