Методические указания МУК 4.1.3842-23 "Методика измерений массовой концентрации пентадекафтороктановой кислоты (перфтороктановая кислота, перфторкаприловая кислота, ПФОК) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 18 января 2023 г.)

Методические указания МУК 4.1.3842-23
"Методика измерений массовой концентрации пентадекафтороктановой кислоты (перфтороктановая кислота, перфторкаприловая кислота, ПФОК) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 18 января 2023 г.)

Свидетельство о государственной метрологической аттестации N 0198/POCC.RU 0001.310430 от 31.03.2021.

I. Общие положения и область применения

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации пентадекафтороктановой кислоты (далее - ПФОК) в диапазоне 0,0024 - 0,06 мг/м ³.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими исследования в области качества и безопасности воздуха рабочей зоны по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

II. Физико-химические и токсикологические свойства

2.1. Физико-химические свойства ПФОК.

Эмпирическая формула: C ₈HF ₁₅O ₂.

Молекулярная масса: 414,07.

Регистрационный номер CAS: 335-67-1.

ПФОК - белый порошок с едким запахом. Плотность 1,79 г/см ³. Температура плавления: плюс 52 - 55 °C. Температура кипения: плюс 189 °C. Давление паров при плюс 25 °C: 4,2 х 10 ³ мПа. Растворима в полярных органических растворителях. Растворимость в воде (в мг/дм ³ при плюс 25 °C): 2290 - 4340. Коэффициент распределения октанол/вода: K _owlogP = 3,36 - 6,3 (расчет.) Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - преимущественно аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика ПФОК:

- острая внутрижелудочная токсичность (LD ₅₀) для крыс более 250 - 1000 мг/кг;

- острая дермальная токсичность (LD ₅₀) для кролика более 2000 мг/кг;

- острая ингаляционная токсичность для крысы, 4 часа (LC ₅₀) 980 мг/м ³.

III. Метрологические характеристики

3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Диапазон измерении концентрации пентадекафтороктановой кислоты, значение показателя точности измерений

Анализируемый объект	Диапазон определяемых концентраций, мг/м 3	Показатель точности (граница относительной погрешности),  %, Р = 0,95
Воздух рабочей зоны	0,0024 - 0,06	25

IV. Метод измерений

4.1. Измерения концентраций ПФОК выполняют методом ВЭЖХ с масс-селективным детектированием.

Концентрирование вещества из воздушной среды осуществляют на универсальный стеклянный пробоотборник для одновременного отбора паров и аэрозолей.

Пробоотборник, заполненный двумя порциями специально очищенного низкофонового пористого полимерного сорбента, порции сорбента разделены прокладками из пенополиуретана, на верхний слой сорбента поставлен кварцевый фильтр, который прижат к сорбентам пластиковым кольцом.

Экстракцию с элементов пробоотборника проводят метанолом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,05 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 102,7 %.

Нижний предел измерения массовой концентрации ПФОК в воздухе рабочей зоны 0,0024 мг/м ³ (при отборе 50 дм ³ воздуха).

Селективность метода в условиях его применения обеспечивается режимом хроматографирования и масс-селективного детектирования.

V. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

5.1. Средства измерений

Хроматограф жидкостной с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки
Весы аналитические с пределом допустимой погрешности 0,0005 г	ГОСТ Р 53228
Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха
Колбы мерные 2 класса точности 2-50-2, 2-500-2	ГОСТ 1770
Колбы мерные полипропиленовые, 10 см 3, класс В, погрешность 0,08 см 3
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см 3	ГОСТ 29227
Пробоотборное устройство двухканальное, с диапазонами расхода 0,2 - 1,0 дм 3/мин и 5,0 - 20,0 дм 3/мин, максимальная погрешность 5 %
Автоматические дозаторы одноканальные, переменного объема, 10 - 100 мм 3; 100 - 1000 мм 3, максимальная погрешность 3 %
Меры массы	ГОСТ OIML R 111-1

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

5.2. Реактивы

Пентадекафтороктановая кислота, аналитический стандарт с содержанием основного компонента не менее 95 %
Аммоний уксуснокислый (аммоний ацетат) химически чистый	ГОСТ 3117
Метанол для ВЭЖХ, чистота не менее 99,9 %
Вода для лабораторного анализа (деионизованная)	ГОСТ Р 52501
Азот 7 газообразный высокой чистоты, в баллонах	ГОСТ 9293

ГАРАНТ:

Нумерация сноски приводится в соответствии с источником

------------------------------

⁷ Подбор газа для ячейки соударения масс-селективного детектора зависит от его производителя и модели.

------------------------------

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

5.3. Вспомогательные устройства и материалы

Пробирки центрифужные полипропиленовые, вместимостью 50 см 3, с коническим дном и юбкой устойчивости Универсальный стеклянный пробоотборник, внешний диаметр 13 и 8 мм, длина 75 мм, заполнен двумя порциями специально очищенного низкофонового пористого полимерного сорбента (270 и 140 мг), порции сорбента разделены прокладками из пенополиуретана, на верхний слой сорбента поставлен кварцевый фильтр, который прижат к сорбентам пластиковым кольцом Виалы сцинтилляционные полиэтиленовые, вместимостью 20 см 3, диаметром 28 мм, высотой 60 мм, с винтовой крышкой и уплотнением Виалы хроматографические, стеклянные, с винтовой крышкой и прокладкой, вместимостью 2 см 3 Вставки в виалы из полипропилена, вместимостью 400 мм 3 Наконечники для пипет-дозаторов Установка для фильтрации элюентов Установка для получения деионизованной воды Смеситель тип шейкер, диапазон регулировки оборотов 50 - 200 об/мин, орбита до 10 мм Груша резиновая Хроматографическая колонка для ВЭЖХ стальная, длиной 100 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, зернением 3 мкм

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

VI. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007, ГОСТ 12.1.005.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф и тандемный масс-селективный детектор.

6.4. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см ²), необходимо соблюдать правила ⁸. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.

------------------------------

⁸Приказ Ростехнадзора от 15.12.2020 N 536 "Об утверждении федеральных норм и правил в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением" (зарегистрировано Минюстом России 31.12.2020, регистрационный N 61998).

------------------------------

6.5. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать гигиенических нормативов ⁹.

------------------------------

⁹Таблицы 2.1 и 2.2 СанПин 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и/или безвредности для человека факторов среды обитания", утвержденных постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 N 2 (зарегистрировано в Минюсте России 29.01.2021 регистрационный N 62296).

------------------------------

VII. Квалификация оператора

7.1. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе с тандемным масс-селективным детектором (ВЭЖХ-МС/МС), освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

VIII. Условия измерений

8.1. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

- температура воздуха плюс	(20 5) °C;
- относительная влажность воздуха не более	80 %;
- атмосферное давление	84 - 106 кПа.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на приборы.

IX. Подготовка к выполнению измерений

9.1. Выполнению измерений предшествуют следующие операции: подготовка подвижной фазы, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

Подготовка элюентов для ВЭЖХ

9.2. Приготовление раствора аммония уксуснокислого, с концентрацией 1 моль/дм ³ (1 М раствор): в мерную колбу вместимостью 50 см ³ взвешивают (3,855 0,0005) г аммония уксуснокислого. Растворяют в 30 - 40 см ³ воды, доводят до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят в герметично закрытой упаковке при температуре не выше плюс 25 °C. Срок хранения - 3 месяца.

9.3. Приготовление Компонента А подвижной фазы для ВЭЖХ - раствора аммония уксуснокислого с концентрацией 2 ммоль/дм ³ (2 мМ раствор): в мерную колбу вместимостью 500 см ³ вносят 1 см ³ 1 М раствора аммония уксуснокислого (п. 9.2). Доводят до метки водой. Тщательно перемешивают. При необходимости фильтруют и дегазируют. Срок использования раствора - 14 дней.

9.4. Компонент В - метанол.

Кондиционирование хроматографической колонки

9.5. Колонку промывают со скоростью 0,3 см ³/мин не менее 30 минут с начальным соотношением компонентов элюента (90 % компонент А, 10 % компонент В). Перед началом серии анализов сделать не менее двух вводов растворителя (метанола) в режиме полного градиента анализа (табл. 4).

Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

9.6. Приготовление исходного раствора ПФОК для калибровки (концентрация 5000 мкг/см ³): в пластиковую мерную колбу вместимостью 10 см ³ помещают (0,05 0,0005) г ПФОК, растворяют в 5 - 6 см ³ метанола, доводят метанолом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранят при температуре минус 15 °C не более 6 месяцев.

9.7. Приготовление рабочего раствора N 1 ПФОК для градуировки и внесения (концентрация 10,0 мкг/см ³): в пластиковую мерную колбу вместимостью 10 см ³ помещают 20 мм ³ исходного раствора с концентрацией 5000,0 мкг/см ³ (п. 9.6), доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 1 с концентрацией ПФОК 10,0 мкг/см ³. Раствор хранят в холодильнике при температуре плюс 2 - 6 °C не более 3 месяцев.

Этот раствор используют для приготовления градуировочных растворов и проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено - найдено" и контроля качества результатов измерений методом добавок.

Подготовка хроматографа

9.8. Подготовку хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

Установление градуировочной характеристики

9.9. Градуировочную характеристику, выражающую линейную зависимость площади пика от концентрации ПФОК в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 6 растворам для градуировки N 1 - 6.

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении ПФОК

N град. раствора	Объем раб. раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/см 3, мм 3	Количество добавляемого метанола, мм 3	Конечный объем градуировочного раствора, мм 3 (см 3)	Массовая концентрация ПФОК в градуировочном растворе, мкг/см 3	Содержание ПФОК в анализируемом объеме градуировочном раствора, нг
1	10	9 990	10 000 (10)	0,01	0,05
2	25	9 975	10 000 (10)	0,025	0,125
3	50	9 950	10 000 (10)	0,05	0,25
4	100	9 900	10 000 (10)	0,1	0,5
5	200	9 800	10 000 (10)	0,2	1
6	250	9 750	10 000 (10)	0,25	1,25
Примечание. Растворы хранят в холодильнике при температуре плюс (2 - 6) °C не более 14 дней.

В хроматограф вводят по 5 мм ³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.10. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пика ПФОК, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Условия хроматографирования

9.10. Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:

- жидкостной хроматограф с масс-селективным детектором;

- хроматографическая колонка, С18, 100 х 2,1 мм, зернение 3 мкм;

- температура термостата колонок - плюс 30 °C;

- поток элюента - 0,3 см ³/мин;

- компонент А - раствор 2 мМ ацетата аммония в воде;

- компонент В - метанол;

- режим элюирования - бинарный, градиентный (табл. 3);

- хроматографируемый объем: 5 мм;

- тип ионизации - электроспрей (англ. electrospray ionization, ESI);

- полярность - отрицательная (англ. negative);

- режим работы масс-спектрометрического детектора - мониторинг множественных реакций (англ. multiple reaction monitoring, MRM, далее - MRM)(табл. 4).

Таблица 3

Режим элюирования

Время, мин	Содержание растворителя в подвижной фазе, % (по объему)
	Компонент А: 0,2 мМ аммония уксуснокислого в воде	Компонент В: метанол
0	90	10
5	10	90
9	10	90
10	90	10
16	90	10

Таблица 4

Режим работы детектора

Материнский ион, масса/заряд	Дочерние ионы, масса/заряд	Напряжение на фрагментаторе, В	Энергия соударения, В	Время сбора информации (англ. dwell time), мсек
413	369 *	80	1	100
	169	80	12	100
Примечание: * ион, используемый для количественного расчета (англ. Quantification ion).

Примечание. Оператор может подобрать другую энергию соударения в процессе оптимизации. В зависимости от модели и производителя параметры оптимизации MRM переходов могут различаться.

- время удерживания ПФОК - (6,4 1,0) мин;

- линейный диапазон детектирования: 0,01 - 0,25 мкг/см ³.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор ПФОК с концентрацией 0,25 мкг/см ³, разбавляют метанолом, но не более чем в 50 раз.

Контроль стабильности градуировочной характеристики

9.11. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание ПФОК в которых должно входить в диапазон линейности градуировочной характеристики - от 0,01 до 0,25 мкг/см ³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

, где

(1)

X - концентрация ПФОК в пробе при контрольном измерении, мкг/см ³;

С - известная концентрация градуировочного раствора ПФОК, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см ³;

В - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (В = 15 % при Р = 0,95).

Если величина расхождения (А) превышает 15 %, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуирово