Методические указания МУК 4.1.3837-23 "Методика измерений массовой концентрации 3,7-дигидро-1,3-диметил-1Н-пурин-2,6-диона (теофиллин) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 18 января 2023 г.)

Методические указания МУК 4.1.3837-23
"Методика измерений массовой концентрации 3,7-дигидро-1,3-диметил-1Н-пурин-2,6-диона (теофиллин) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 18 января 2023 г.)

Введены впервые

I. Общие положения и область применения

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения спектрофотометрического метода для измерений массовой концентрации теофиллина в воздухе рабочей зоны в диапазоне массовых концентраций 0,25 - 2,0 мг/м ³.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими исследования в области качества и безопасности воздуха рабочей зоны по измерению массовых концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

II. Физико-химические и токсикологические свойства

2.1. Физико-химические свойства теофиллина.

Эмпирическая формула: C ₇H ₈N ₄O ₂.

Молекулярная масса: 180,16.

Регистрационный номер CAS: 58-55-9.

Теофиллин - бесцветный, белый или слегка желтоватый кристаллический порошок с температурой плавления плюс 270 - 274 °C, мало растворим в воде (8,3 мг/см ³), растворим в этаноле, диметилсульфоксиде, разбавленных щелочах, разбавленной соляной и азотной кислотах. Теофиллин предохраняют от действия света.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика теофиллина:

- производное пурина, относится к группе метилксантинов;

- обладает общетоксическим и кожно-резорбтивным действием;

- оказывает местное раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки глаза.

III. Метрологические характеристики

3.1. При соблюдении всех регламентированных условий и проведении в точном соответствии с данной методикой при выполнении измерений массовой концентрации теофиллина метрологические характеристики не превышают значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности р = 0,95).

Таблица 1

Метрологические характеристики методики

Диапазон измерений массовой концентрации теофиллина, мг/м 3	Показатель точности (границы относительной погрешности), , % при Р = 0,95	Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости),  r, %	Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости),  R, %	Предел повторяемости, r, %, Р = 0,95, n = 2	Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, CD 0,95, % (n 1 = n 2 = 2)
От 0,25 до 2,0 вкл.	16	3	6	8	16

IV. Метод измерений

4.1. Измерение массовой концентрации теофиллина выполняют методом спектрофотометрии. Метод основан на способности растворов теофиллина в 0,1 н растворе соляной кислоты поглощать УФ-излучение и измерении относительной оптической плотности полученных растворов.

Измерение проводят при длине волны 270 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на аналитические аэрозольные фильтры.

Минимально определяемое содержание теофиллина в анализируемом объеме пробы - 20,0 мкг.

Нижний предел измерений массовой концентрации теофиллина в воздухе - 0,25 мг/м ³ (при отборе 80 дм ³ воздуха).

Метод специфичен в условиях производства лекарственных препаратов, содержащих теофиллин. Измерению не мешают вспомогательные вещества: кальция стеарат, натрия лаурилсульфат, целлюлоза микрокристаллическая, поливинилацетат, повидон, кремния диоксид, коллидон SR.

V. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

5.1. Средства измерений

Спектрофотометр. Диапазон измерений (54000 - 11000) см -1, воспроизводимость волновых чисел (1,5) %
Весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 200 г, диапазон взвешивания по шкале 1 - 100 мг, цена деления шкалы 1 мг, погрешность взвешивания по шкале 0,2 мг	ГОСТ OIML R 76-1
Аспирационное устройство двухканальное с диапазоном расхода 2,0 - 20 дм 3/мин и пределом допустимой погрешности 5 %	ТУ 4215-000-11696625
Колбы мерные, 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2	ГОСТ 1770
Пипетки 1-1-2-1, 1-1-2-5, 1-2-2-10	ГОСТ 29227
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, П-2-10-14/23 ХС	ГОСТ 1770

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

5.2. Реактивы

Теофиллин с содержанием основного вещества не менее 99 %	НД П N 015242/01-270409
Кислота соляная, 0,1 н водный раствор, фиксанал	ТУ 6-09-2540
Вода дистиллированная	ГОСТ Р 58144

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

5.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитические аэрозольные фильтры гидрофильные на основе ацетилцеллюлозы с площадью рабочей поверхности 10 см 2	ТУ 95-1892
Фильтродержатели	ТУ 95-1021
Фильтры бумажные обеззоленные средней плотности	ТУ 6-09-1678
Бюксы стеклянные, СН-50/30	ГОСТ 25336
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336
Воронки химические	ГОСТ 25336
Кюветы кварцевые с толщиной оптического слоя 10 мм
Шкаф сушильный	ТУ 61-1-721

Примечание. Допускается использование оборудования, вспомогательных устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

VI. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007, ГОСТ 12.1.005.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать гигиенических нормативов ².

------------------------------

²Таблицы 2.1, 2.2 СанПиН 1.2.3685-21 "Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и/или безвредности для человека факторов среды обитания", утвержденных постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 N 2 (зарегистрировано в Минюсте России 29.01.2021, регистрационный N 62296).

------------------------------

VII. Квалификация оператора

7.1. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на спектрофотометре, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

VIII. Условия измерений

8.1. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

- температура воздуха	(205) °C;
- атмосферное давление	84 - 106 кПа;
- относительная влажность воздуха, не более	80 %.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

IX. Подготовка к выполнению измерений

9.1. Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб воздуха.

Приготовление растворов

9.2. Приготовление основного раствора теофиллина с массовой концентрацией 500 мкг/см ³: основной раствор теофиллина с массовой концентрацией 500 мкг/см ³ готовят растворением (0,05000,0002) г теофиллина в 0,1 н растворе соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 см ³.

Срок хранения раствора в течение недели в защищенном от света месте при температуре от плюс 2 до плюс 8 °C.

9.3. Приготовление рабочего раствора теофиллина N 1 с массовой концентрацией 100 мкг/см ³: рабочий раствор теофиллина N 1 с массовой концентрацией 100 мкг/см ³ готовят разбавлением 10,0 см ³ основного раствора теофиллина в 0,1 н растворе соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 50 см ³. Срок хранения раствора трое суток в защищенном от света месте при температуре от плюс 2 до плюс 8 °C.

9.4. Приготовление 0,1 н водного раствора соляной кислоты из фиксанала: с ампулы, содержащей стандарт-титр соляной кислоты 0,1 н, удаляют надпись, ополаскивают дистиллированной водой. В химическую воронку помещают боек с крестовидным утолщением коротким острым концом вверх. Воронку с бойком вставляют в мерную колбу вместимостью 1000 см ³, затем дно ампулы разбивают осторожным ударом об острый конец бойка, после чего вторым бойком пробивают верхнее углубление ампулы. Содержимое ампулы тщательно вымывают в мерную колбу струей дистиллированной воды и доводят объем раствора дистиллированной воды до метки. Колбу закрывают пробкой и раствор хорошо перемешивают. При количественном перенесении содержимого ампулы в мерную колбу и разбавлении его до 1000 см ³ получают точно 0,1 н раствор соляной кислоты. Срок хранения раствора 1 месяц.

Подготовка спектрофотометра

9.5. Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

Установление градуировочной характеристики

9.6. Градуировочную характеристику, выражающую зависимость относительной оптической плотности раствора от содержания теофиллина в анализируемом объеме градуировочных растворов, устанавливают по шести сериям измерений по шести концентрациям вещества в каждой серии и контрольного раствора N 0 согласно табл. 2.

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении теофиллина

N градуировочного раствора	Объем основного раствора с концентрацией теофиллина 500 мкг/см 3, см 3	Объем рабочего раствора N 1 с концентрацией теофиллина 100 мкг/см 3, см 3	Содержание теофиллина на фильтре, мкг	Массовая концентрация теофиллина в градуировочном растворе, мкг/см 3	Содержание теофиллина в анализируемом объеме градуировочного раствора, мкг
0 *	0,00	0,0	0,0	0,0	0,00
1	0,00	0,2	20,0	2,0	20,0
2	0,00	0,3	30,0	3,0	30,0
3	0,10	0,0	50,0	5,0	50,0
4	0,16	0,0	80,0	8,0	80,0
5	0,24	0,0	120,0	12,0	120,0
6	0,32	0,0	160,0	16,0	160,0
Примечание: * - контрольный раствор. Градуировочные растворы используют свежеприготовленные.

На аэрозольные фильтры, помещенные в бюксы, пипеткой вместимостью 1 см ³ наносят основной раствор теофиллина с массовой концентрацией 500 мкг/см ³ и рабочий раствор теофиллина N 1 с массовой концентрацией 100 мкг/см ³ в соответствии с табл. 2. Фильтры подсушивают при комнатной температуре и с помощью пипетки вместимостью 5,0 см ³ приливают по 5,0 см ³ 0,1 н раствора соляной кислоты и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтры тщательно отжимают, растворы сливают в мерные пробирки вместимостью 10 см ³. Фильтры повторно обрабатывают 5,0 см ³ 0,1 н раствора соляной кислоты и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем фильтры тщательно отжимают и удаляют. Растворы сливают в те же пробирки и доводят объем до 10,0 см ³ 0,1 н раствором соляной кислоты. Аналогично обрабатывается чистый аналитический аэрозольный фильтр (контрольный раствор N 0, табл. 2).

Относительную оптическую плотность градуировочных растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 270 нм по отношению к контрольному раствору, не содержащему теофиллина (табл. 2, раствор N 0).

Строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят средние значения относительных оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания теофиллина в мкг.

Контроль стабильности градуировочной характеристики

9.7. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией теофиллина по п. 9.6 (соответствующие началу, середине и концу диапазона измерений) и анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

, где

(1)

D _изм, D _гр - значение относительной оптической плотности теофиллина в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике;

К _гр - норматив контроля:

К _гр=0,5·, где

- границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение относительной оптической плотности этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика не стабильна, условие (1) не выполняется для двух или более образцов градуировочных растворов, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцо