Приложение А (справочное). Результаты межлабораторных испытаний

Приложение А
(справочное)

Результаты межлабораторных испытаний

Метод был валидирован в 2002 году в ходе европейских межлабораторных испытаний, в которых принимало участие 13 лабораторий [5], [6]. Результаты, полученные в ходе этих межлабораторных испытаний, указывают на то, что методика работает хорошо, с пределом обнаружения не менее 2 % примеси ЭМК в МК, что соответствует 0,6 % ЭМК в шоколаде (при допущении, что содержание жиров в шоколаде 30 %), без ошибочно-положительных или ошибочно-отрицательных результатов.

В таблице А.1 приведены приемлемые газохроматографические условия ¹⁾. Пример профиля триацилглицеролов ЭМК масла какао приведен на рисунке А.1. Данные прецизионности приведены в таблицах А.2-А.5.

------------------------------

¹⁾ Эти типы колонок являются примерами подходящих коммерчески доступных изделий. Данная информация приведена для удобства применения настоящего стандарта, не является рекламной поддержкой ISO данных изделий и не исключает возможность использования других изделий с аналогичными свойствами.

------------------------------

Таблица А.1 - Приемлемые газохроматографические условия, используемые для анализа триацилглицеролов масла какао, эквивалентов масла какао, смесей масла какао/эквивалентов масла какао и шоколада

ГАРАНТ:

Начало таблицы. См. окончание

Возможный метод	1	2	3	4	5
Характеристики колонки:
- неподвижная фаза	DB-17HT	RTx-65TG	CB-TAP	RTx-65TG	CB-TAP
- длина, м	30	30	25	30	25
- внутренний диаметр, мм	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25
- толщина пленки, мкм	0,15	0,1	0,1	0,1	0,1
Температурный режим (термостат):
- начальная температура, °C/время поддержания, мин	80/2	340/1	280/0	100/0,5	340/0
- программируемая скорость 1, °C/мин	50	1	10	50	1
- температура 1, °C/время поддержания, мин	300/0		320/0	330/2
- программируемая скорость 2, °C/мин	30	-	2	1	-
- температура 2, °C/время поддержания, мин
- программируемая скорость 3, °C/мин	-	-	-	-	-
- конечная температура, °C/время поддержания, мин	350/30	360/3	360/6	350/5	360/10
- температура инжектора, °C	Термостат	390	370	Термостат	360
- температура детектора, °C	360	370	370	355	360
Режим введения	В колонку	С делением потока	С делением потока	В колонку	С делением потока
Газ-носитель:
- тип	H 2	H 2	H 2	He	He
- давление, кПа	-	120	100	-	150
- скорость потока, см 3/мин	0,8	-	-	0,8	-
Проба
- концентрация, мг/см 3	0,3	50	12,5	0,3	-
- вводимый объем, мм 3	0,5	0,1	0,6	0,5	1

ГАРАНТ:

Окончание таблицы. См. начало

Возможный метод	6	7	8	9	10	11
Характеристики колонки:
- неподвижная фаза	RTx-65TG	CB-TAP	DB-17HT	CB-TAP	CB-TAP	CB-TAP
- длина, м	30	25	30	25	25	25
- внутренний диаметр, мм	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25
- толщина пленки, мкм	0,1	0,1	0,15	0,1	0,1	0,1
Температурный режим (термостат):
- начальная температура, °C/время поддержания, мин	200/0	100/0,1	50/2	200/2	100/1	200/2
- программируемая скорость 1, °C/мин	15	70	50	20	30	12
- температура 1, °C/время поддержания, мин	360/0		300/1	320/0	300/2
- программируемая скорость 2, °C/мин	1		10	1	30
- температура 2, °C/время поддержания, мин			340/2
- программируемая скорость 3, °C/мин			0,5
- конечная температура, °C/время поддержания, мин	370/0	350/21	345/26	360/10	340/35	350/10
- температура инжектора, °C	390	Термостат	50	65-220-370	100	-
- температура детектора, °C	390	360	360	370	360	360
Режим введения	С делением потока	В колонку	В колонку	В колонку	В колонку	В колонку (горячий)
Газ-носитель:
- тип	H 2	H 2	H 2	He	H 2	H 2
- давление, кПа	150	-	120	90	150	-
- скорость потока, см 3/мин	-	1	-	-	-	2,4
Проба
- концентрация, мг/см 3	10	15	0,5	1-2	0,5	0,65
- вводимый объем, мм 3	0,5	0,5	0,5	0,1	0,4	0,3

Идентификация пиков: 1, PPP; 2, MOP; 3, PPS; 4, POP; 5, PLP; 6, не идентифицирован; 7, PSS; 8, POS; 9, POO; 10, PLS; 11, PLO; 12, не идентифицирован; 13, SSS; 14, SOS; 15, SOO; 16, SLS+OOO; 17, SLO; 18, не идентифицирован; 19, не идентифицирован; 20, SOA; 21, AOO

Рисунок А.1 - Профиль триацилглицеролов сертифицированного стандартного образца масла какао

Экспериментальные условия

Газохроматографическая колонка:	кварцевая капиллярная колонка 25 м  0,25 мм с 0,1 мкм Chrompack TAP.
Температура термостата колонки:	100 °C поддерживается в течение 1 мин; от 30 °C/мин до 340 °C поддерживается в течение 35 мин.
Ввод пробы:	холодный в колонку.
Детектор (ПИД):	360 °C.
Газ-носитель:	H, 1,6 бар.
Вводимое количество:	0,5 мкл раствора концентрацией 0,5 мг/см 3.

Сокращения

PPP	-	трипальмитин.	SSS	-	тристеарин.
MOP	-	1-маргароил-2-олеоил-3-пальмитоилглицерол.	SOS	-	1,3-дистеароил-2-олеоилглицерол.
PPS	-	1,2-дипальмитоил-3-стеароилглицерол.	SOO	-	1-стеароил-2,3-диолеоилглицерол.
POP	-	1,3-дипальмитоил-2-олеоилглицерол.	SLS	-	1,3-дистеароил-2-линолеоилглицерол.
PLP	-	1,3-дипальмитоил-2-линолеоилглицерол.	OOO	-	триолеин.
PSS	-	1-пальмитоил-2,3-дистеароилглицерол.	SLO	-	1-стеароил-2-линолеоил-3-олеоилглицерол.
POS	-	1-пальмитоил-2-олеоил-3-стеароилглицерол.	SOA	-	1-стеароил-2-олеоил-3-арахидоилглицерол.
POO	-	1-пальмитоил-2,3-диолеоилглицерол.	AOO	-	1-арахидоил-2,3-диолеоилглицерол.
PLS	-	1-пальмитоил-2-линолеоил-3-стеароилглицерол.
PLO	-	1-пальмитоил-2-линолеоил-3-олеоилглицерол

Таблица А.2 - Данные прецизионности для образцов чистого масла какао

	Чистое МК a)			Чистое МК b)			Чистое МК c)
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий	13	13	13	13	13	13	13	13	13

Количество выбросов	1	1	1	1	1	1	1	1	1
Количество приемлемых результатов	12	12	12	12	12	12	12	12	12
Среднее значение, г/100 г	20,396	47,731	31,873	19,491	47,421	33,089	18,991	47,210	33,799
Стандартное отклонение повторяемости s r, г/100 г	0,057	0,056	0,093	0,069	0,095	0,097	0,092	0,084	0,154
Относительное стандартное отклонение повторяемости, %	0,28	0,12	0,29	0,36	0,20	0,29	0,49	0,18	0,45
Предел повторяемости R [= 2,83  s r], г/100 г	0,160	0,157	0,261	0,194	0,265	0,271	0,258	0,236	0,430
Стандартное отклонение воспроизводимости s R, г/100 г	0,142	0,108	0,169	0,081	0,148	0,166	0,120	0,090	0,168
Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %	0,70	0,23	0,53	0,42	0,31	0,50	0,63	0,19	0,50
Предел воспроизводимости R [= 2,83  S r], г/100 г	0,397	0,302	0,473	0,227	0,413	0,464	0,337	0,253	0,471
a) Страна происхождения Гренада. b) Страна происхождения Гана. c) Страна происхождения Кот-д'Ивуар.

Таблица А.3 - Данные прецизионности для реальных образцов шоколада

	Шоколад с ЭМК			Шоколад без ЭМК
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий	13	13	13	13	13	13
Количество выбросов	2	2	2	1	1	1
Количество приемлемых результатов	11	11	11	12	12	12
Среднее значение, г/100 г	25,375	43,757	30,868	19,740	47,401	32,859
Стандартное отклонение повторяемости s r, г/100 г	0,128	0,101	0,180	0,089	0,070	0,074
Относительное стандартное отклонение повторяемости, %	0,50	0,23	0,58	0,45	0,15	0,23
Предел повторяемости r [= 2,83  s r], г/100 г	0,358	0,282	0,503	0,250	0,195	0,208
Стандартное отклонение воспроизводимости s R, г/100 г	0,265	0,210	0,198	0,120	0,106	0,111
Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %	1,04	0,48	0,64	0,61	0,22	0,34
Предел воспроизводимости R [= 2,83  S r], г/100 г	0,741	0,588	0,553	0,335	0,298	0,310

Таблица А.4 - Данные прецизионности для масла какао с 2 % примеси эквивалентов масла какао

	2,06 % ЭМК/МК a)			1,98 % ЭМК/МК b)			2,04 % ЭМК/КМ c)			2,09 % ЭМК/КМ d)
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13
Количество выбросов	0	0	0	1	1	1	2	2	2	1	1	1
Количество приемлемых результатов	13	13	13	12	12	12	11	11	11	12	12	12
Среднее значение, г/100 г	20,611	47,082	32,307	19,938	46,795	33,267	19,698	46,619	33,682	19,859	46,646	33,495
Стандартное отклонение повторяемости s r, г/100 г	0,184	0,095	0,222	0,050	0,070	0,082	0,093	0,063	0,137	0,029	0,083	0,077
Относительное стандартное отклонение повторяемости, %	0,89	0,20	0,69	0,25	0,15	0,25	0,47	0,14	0,41	0,14	0,18	0,23
Предел повторяемости г [=2,83  s r], г/100 г	0,514	0,267	0,621	0,140	0,196	0,230	0,261	0,177	0,383	0,080	0,233	0,217
Стандартное отклонение воспроизводимости s R, г/100 г	0,193	0,132	0,250	0,118	0,091	0,181	0,113	0,142	0,149	0,094	0,118	0,185
Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %	0,94	0,28	0,77	0,59	0,19	0,54	0,57	0,31	0,44	0,47	0,25	0,55
Предел воспроизводимости R [= 2,83  s R], г/100 г	0,540	0,368	0,701	0,331	0,254	0,506	0,317	0,399	0,417	0,262	0,330	0,517
a) МК из Гренады смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/(ши + иллипе) [35/65]. b) МК из Ганы смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/ши [50/50]. c) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/сал/манго [50/25/25]. d) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/ши/иллипе [50/25/25].

Таблица А.5 - Данные прецизионности для масла какао с 4 % примеси эквивалентов масла какао

	4,0 % ЭМК/МК a)			3,96 % ЭМК/МК b)			4,04 % ЭМК/КМ c)			4,00 % ЗМК/КМ d)
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13
Количество выбросов	0	0	0	1	1	1	1	1	1	1	1	1
Количество приемлемых результатов	13	13	13	12	12	12	12	12	12	12	12	12
Среднее значение, г/100 г	20,747	46,341	32,912	20,348	46,176	33,475	20,421	46,075	33,504	20,765	46,100	33,135
Стандартное отклонение повторяемости s r, г/100 г	0,141	0,077	0,171	0,075	0,053	0,075	0,115	0,105	0,134	0,109	0,079	0,126
Относительное стандартное отклонение повторяемости, %	0,68	0,17	0,52	0,37	0,11	0,22	0,56	0,23	0,40	0,53	0,17	0,38
Предел повторяемости R [= 2,83  s r,], г/100 г	0,395	0,215	0,478	0,209	0,148	0,209	0,322	0,293	0,377	0,306	0,221	0,354
Стандартное отклонение воспроизводимости s R, г/100 г	0,156	0,182	0,279	0,214	0,066	0,213	0,157	0,148	0,196	0,164	0,125	0,226
Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %	0,75	0,39	0,85	1,05	0,14	0,64	0,77	0,32	0,59	0,79	0,27	0,68
Предел воспроизводимости R 2,83  s R], г/100 г	0,437	0,510	0,782	0,601	0,183	0,596	0,441	0,414	0,549	0,459	0,351	0,633
a) МК из Гренады смешано с ЭМК вида "средняя фракция пальмового масла/(ши + иллипе)" [35/65]. b) МК из Ганы смешано с ЭМК вида "средняя фракция пальмового масла/ши" [50/50]. c) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида "средняя фракция пальмового масла/сал/манго" [50/25/25]. d) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида "средняя фракция пальмового масла/ши/иллипе" [50/25/25].