Приложение 8. Основные требования (стандарты) к консервированной крови и ее компонентам

Приложение 8
к приказу Минздрава СССР
от 12 апреля 1990 г. N 155

Основные требования (стандарты)
к консервированной крови и ее компонентам

Основные требования (стандарты) должны соблюдаться учреждениями службы крови с целью заготовки консервированной крови и ее компонентов, гарантирующей их качество и безопасность при лечебном применении.

Невыполнение или снижение этих требований приводит к заготовке некачественной продукции и серьезным осложнениям при трансфузионной терапии.

Методика заготовки консервированной крови и ее компонентов изложена в действующих инструктивных документах.

1.0. Консервированная кровь - это донорская кровь, заготовленная на утвержденных консервирующих растворах от обследованных доноров. Каждая доза консервированной крови маркируется. Консервированная кровь должна храниться при температуре 2-6° С. Сроки хранения крови определяются консервирующими растворами.

Консервированная кровь должна отвечать следующим требованиям: сохранение целостности и герметичности упаковки; наличие оформленной этикетки с указаниями срока годности и групповой принадлежности; иметь четко выраженную границу разделения на плазму и глобулярную массу; плазма должна быть прозрачной, без мути, хлопьев, нитей фибрина, без выраженного гемолиза; глобулярный слой крови не должен иметь видимых сгустков, должен быть равномерным, без неровностей на поверхности.

Стерильность заготавливаемой крови и ее компонентов обеспечивается применением при их заготовке строгих правил асептики, с использованием стерильной замкнутой системы. При этом достигаются максимальные сроки их хранения при температуре 2-6° С. Использование (в исключительных случаях) системы, замкнутость которой была нарушена или система была смонтирована при заготовке консервированной крови и ее компонентов, ограничивает сроки их хранения до 24-х часов при температуре 2-6° С.

2.0. Эритроцитная масса (ЭМ) - это эритроциты, остающиеся после удаления большей части плазмы из седиментированной или центрифугированной консервированной крови. Отделение ЭМ из цельной крови может быть осуществлено в любое время до истечения срока годности крови. Гематокрит ЭМ должен быть не выше 0,8. Сроки хранения ЭМ такие же, как и консервированной крови, из которой она получена. ЭМ с максимальным удалением путем центрифугирования плазмы и тромбоцитарно-лейкоцитарного слоя, имеющая гематокрит 0,85-0,95 называется эритроконцентратом (ЭК), ЭК в день заготовки ресуспендируется в специальном консервирующем растворе или в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия; сроки хранения полученной таким образом эритроцитной взвеси в изотоническом растворе хлорида натрия - 24 часа, а в консервирующем-ресуспендирующем растворе - в соответствии с действующими инструктивными документами.

2.1. ЭМ или ЭК, обедненные лейкоцитами и тромбоцитами - это трансфузионная среда, содержащая не более 25-30% лейкоцитов, 10% тромбоцитов и не менее 70-75% эритроцитов от их исходного содержания в дозе консервированной крови. Такие ЭМ и ЭК могут быть получены методом повторного отмывания и центрифугирования, фильтрацией, отмыванием после криоконсервирования или другими утвержденными методами.

2.2. Восстановленная ("омоложенная") ЭМ - Эм, подвергшаяся биохимической модификации путем инкубации в специальном растворе, восстанавливающем ее морфо-функциональную полноценность, в том числе кислородтранспортную функцию, утраченную в процессе длительного хранения. Такая ЭМ может быть подвергнута криоконсервированию с последующим длительным хранением.

ЭМ, эритроцитная взвесь, ЭМ и ЭК, обедненные лейкоцитами и тромбоцитами, восстановленная ("омоложенная") ЭМ должны отвечать следующим требованиям: сохранение целостности и герметичности упаковки; наличие оформленной этикетки с указаниями срока годности и групповой принадлежности; прозрачность надстоя; отсутствие резко выраженного гемолиза (красного окрашивания надстоя); равномерность эритроцитарного слоя, отсутствие видимых сгустков.

2.3 Эритроцитная масса замороженная - взвесь эритроцитов, сохраняемая непрерывно в замороженном состоянии при заданных температурных режимах в присутствии ограждающего раствора, который перед переливанием обязательно удаляется после размораживания с помощью процедуры отмывания.

Метод замораживания (криоконсервирования) эритроцитов может быть любым из разрешенных к клиническому применению, но при этом должен соответствовать следующим основным критериям:

а) обеспечивать адекватное удаление в процессе отмывания криопроекторов и продуктов клеточного разрушения, содержание остаточного глицерина во взвеси размороженных отмытых эритроцитов должно быть ниже 1 г%, уровень свободного гемоглобина перед трансфузией не должен превышать 2 г/л при гематокритной величине не менее 0,30 л/л.

б) обеспечивать сохранность после размораживания и отмывания не менее 80% клеток и 24-х часовую посттрансфузионную приживаемость не менее 70%.

Эритроциты подвергают замораживанию не позднее 6 дней после заготовки крови от донора.

Для удобства проведения изосерологических исследований после отмывания эритроцитов и их ресуспендирования в плазмозамещающем растворе, часть трубки полимерной емкости, в которой находится конечный продукт - размороженные отмытые эритроциты, следует заполнить этим компонентом и герметизировать, создав таким образом 2-3 сегмента.

Для замороженных эритроцитов установлены следующие предельные сроки хранения:

а) в жидком азоте - до 5 лет;

б) в электрических рефрижераторах - до трех лет при условии постоянного поддержания температуры ниже - 65° С; при температуре хранения - 40° С - до двух лет, при температуре - 30° С - 1 год.

Размороженные отмытые эритроциты, как и другие эритроцитарные среды, должны храниться до трансфузии при температуре 2-6° С.

Предельные сроки хранения размороженных отмытых эритроцитов при 2-6° С составляют 24 часа после их оттаивания.

3.0. Концентрат тромбоцитов (КТ), выделенный из донорской крови - это суспензия жизнеспособных и гемостатически активных тромбоцитов в плазме, приготовленная методом серийного центрифугирования консервированной крови или методом тромбоцитафереза крови одного донора.

КТ, приготовленный из обогащенной тромбоцитами плазмы (ОТП) - это КТ, полученный из одной дозы цельной крови методом, который предусматривает на I этапе - мягкое центрифугирование цельной крови для выделения ОТП, а на II - жесткое центрифугирование ОТП для осаждения тромбоцитов. Такой КТ содержит в среднем 0,7 x 10 в 11 степени тромбоцитов в 50-60 мл плазмы и имеет примесь эритроцитов (до 1,0 x 10 в девятой степени) и лейкоцитов (до 0,2 x 10 в девятой степени).

КТ, приготовленный из лейкотромбослоя (ЛТС) - это КТ, полученный из одной дозы цельной крови методом, который предусматривает на I этапе - жесткое центрифугирование цельной крови для выделения ЛТС с частью плазмы (около 70 мл), на II - мягкое центрифугирование, позволяющее отделить суспензию тромбоцитов от осадка лейкоцитов и эритроцитов. Такой КТ содержит в среднем 0,65 x 10 в одиннадцатой степени тромбоцитов в 50-75 мл плазмы и имеет примесь лейкоцитов (до 0,05 х 10 в девятой степени).

КТ, полученный тромбоцитаферезом - это КТ, заготовленный не менее, чем из 1,5 литров крови одного донора. Такой КТ содержит не менее 2,0 х 10 в одиннадцатой степени тромбоцитов в 200-300 мл плазмы и имеет примесь эритроцитов (менее 1 х 10 в десятой степени) и лейкоцитов (до 0,6 х 10 в девятой степени).

Концентраты тромбоцитов должны отвечать следующим требованиям при выборочном контроле:

- они не должны содержать макроскопических агрегатов, видимых сгустков, нитей фибрина;

- в конце разрешенного срока хранения их рН должен быть не ниже 6,0;

- до конца срока хранения содержание тромбоцитов в КТ, выделенных из отдельных доз консервированной крови, должно оставаться не менее 0,5 х 10 в одиннадцатой степени; в аферезных КТ - не менее 2,0 х 10 в одиннадцатой степени;

- объем плазмы в КТ, выделенных из ОТП, 45-60 мл; в КТ, выделенных из ЛТС, - 45-75 мл; в КТ, выделенных методом афереза, - 200-300 мл;

- примесь лейкоцитов не должна превышать 0,2 х 10 в девятой степени в дозе КТ, выделенных из ОТП; 0,05 х 10 в девятой степени в дозе КТ, выделенного из ЛТС; 1,0 х 10 в девятой степени в КТ, полученных методом афереза;

- примесь эритроцитов не должна превышать 1 х 10 в девятой степени в одной дозе КТ;

- КТ должен иметь сохранную упаковку без нарушений герметизации и правильную маркировку.

КТ должны храниться в условиях, которые гарантируют сохранность их жизнеспособности и гемостатической активности в соответствии с инструктивно-методическими материалами, утвержденными МЗ СССР.

Для концентратов тромбоцитов, хранящихся при 20-24° С более 24 часов, должно быть обеспечено непрерывное, нетравматизирующее клетки автоматическое перемешивание на протяжении всего срока хранения в полимерных контейнерах.

3.1. Концентрат тромбоцитов замороженный - КТ сохраняется при ультранизких температурах (в жидком азоте) в присутствии ограждающего раствора "Тромбокриодмац". После размораживания КТ пригоден для переливания больным.

Для замораживания может быть использован КТ, полученный любым методом в соответствии с ныне действующими инструкциями, сохраняемый не более 2-4 часов после заготовки крови от донора или тромбоцитафереза.

Лечебная доза размороженного КТ должна содержать не менее 2,0 х 10 в одиннадцатой степени клеток.

Для тромбоцитов, сохраняемых в замороженном состоянии с раствором "Тромбокриодмац", предельные сроки хранения в жидком азоте составляют 2 года.

4.0. Плазма свежезамороженная - это плазма, полученная от одного донора методом плазмафереза или из консервированной крови посредством ее центрифугирования и замороженная при температуре -45° С и ниже в течение первых четырех часов с момента пункции вены. При получении плазмы используют полимерные контейнеры или стеклянные бутылки с гемоконсервантами, применяемыми в службе крови.

Применение гепарина недопустимо.

Замораживание плазмы проводят в спиртовой ванне замораживателя при температуре -45° С и ниже или в холодильнике с принудительным обдувом рабочей камеры воздухом при той же температуре.

Перед замораживанием в спиртовой ванне каждый полимерный контейнер с плазмой должен быть помещен в полиэтиленовый пакет во избежание химического взаимодействия со спиртом и затекания его в выходящие из контейнера трубки.

Свежезамороженная плазма может храниться в холодильнике при температуре -30° С и ниже в течение 12 месяцев с момента пункции вены при условии сохранения герметичности упаковки.

Перед переливанием свежезамороженную плазму оттаивают на водяной бане или под струей теплой воды при температуре 35-37° C (не выше) при периодическом покачивании контейнера. Оттаявшая плазма должна быть прозрачной, соломенно-желтого цвета, без мути, хлопьев, нитей фибрина и признаков гемолиза и перелита немедленно или не позднее 24 часов при условии ее хранения при температуре 2-6° С.

5.0. Криопреципитат. Криопреципитированный антигемофильный фактор представляет собой нерастворимую при охлаждении часть плазмы, полученную из свежезаморженной плазмы.

Перед получением криопреципитата производится оттаивание свежезамороженной плазмы при температуре 0 - +4° С до консистенции подтаявшего снега, после чего проводится центрифугирование оттаявшей плазмы в рефрижераторной центрифуге при температуре О - +2° С.

Отделение плазмы от осадка криопреципитата производят немедленно после окончания центрифугирования, оставляя в контейнере или бутылке 20-25 мл жидкости.

Замораживание криопреципитата проводят немедленно после его получения при температуре -45° С и ниже.

Срок годности криопреципитата, при условии его хранения при температуре -30° С и ниже, составляет три месяца.

Активность фактора VIII в одной дозе криопреципитата должна быть не менее 90 международных единиц (МЕ).

Перед переливанием криопреципитат оттаивают на водяной бане или под струей теплой воды при температуре 35-37° С (не выше). Оттаявший криопреципитат должен быть прозрачным, желтоватого цвета, без сгустков и хлопьев, и перелит немедленно или не позднее 4-х часов при условии его хранения при комнатной температуре.

Криопреципитат может быть лиофильно высушен в соответствии с действующей нормативно-технической документацией.

Срок годности лиофилизированного криопреципитата, при условии его хранения при температуре 2-6° С, составляет 12 месяцев.

Начальник Главного управления организации медицинской помощи

В.И. Калинин