Приложение 14. Инструкция по применению Цоликлона анти-Е моноклонального для определения антигена Е системы резус на эритроцитах человека (Цоликлон анти-Е Супер)

Приложение 14

Инструкция *(12)
по применению Цоликлона анти-Е моноклонального для определения
антигена Е системы резус на эритроцитах человека
(Цоликлон анти-Е Супер)
(утв. приказом Минздрава РФ от 9 января 1998 г. N 2)

1. Назначение

Цоликлон анти-Е Супер предназначен для выявления антигена Е системы резус на эритроцитах человека в реакции прямой гемагглютинации и может применяться взамен или параллельно с аллоиммунной анти-Е сывороткой.

2. Основные свойства

2.1. Моноклональные человеческие анти-Е антитела продуцируются бессмертной гетерогибридомой клеточной линией. Цоликлон анти-Е Супер изготавливается на основе культуральной жидкости, кондиционированной клетками-продуцентами антител. Технология производства реагента исключает возможность его контаминации патогенными для человека вирусами.

2.2. Цоликлон анти-Е Супер содержит IgМ антитела, которые вызывают прямую агглютинацию Е+ эритроцитов. Реагент не содержит антител других специфичностей и пригоден для выявления антигена Е в эритроцитах любой группы.

3. Определение антигена Е

Цоликлон анти-Е Супер может быть использован в реакции агглютинации на плоскости, в пробирках, в микроплате. Определение антигена Е производится в нативной крови с консервантом, в крови без консерванта, в том числе взятой из пальца.

3.1. Реакция агглютинации на плоскости

3.1. На пластинку нанести одну большую каплю реагента (примерно 0,1 мл), одну маленькую каплю исследуемой крови или эритроцитов (0,02 - 0,05 мл) и смешать.

3.1.2. Через 20 - 30 секунд после смешивания покачать пластинку.

3.1.3. Результат оценить визуально по наличию или отсутствию агглютинации. Четкая реакция наступает через 30 - 60 секунд после смешивания реагента с эритроцитами. Окончательный результат реакции следует учитывать через пять минут. Наиболее крупная и четкая агглютинация наблюдается при использовании эритроцитов в высокой концентрации.

3.2. Реакция агглютинации в пробирках

3.2.1. Приготовить из отмытых исследуемых эритроцитов 5% суспензию в физиологическом растворе.

3.2.2. Внести в круглодонную пробирку по одной капле Цоликлона анти-Е и эритроцитарной взвеси, тшательно перемешать.

3.2.3. Оставить пробирку на тридцать минут при температуре 37°С.

3.2.4. Центрифугировать пробирку при 1500 - 3000 оборотах в минуту в течение тридцати секунд.

3.2.5. Осторожно встряхивая пробирку, разбить осадок.

3.2.6. Результат оценить визуально. При отрицательном результате реакции осадок эритроцитов легко разбивается и образует гомогенную непрозрачную суспензию. При положительном результате осадок остается в виде одного или нескольких крупных агглютинатов на фоне прозрачной жидкости.

4. Контроль специфичности

Для контроля специфичности при каждом исследовании (независимо от применяемой методики) необходимо использовать стандартные Е+ и Е-эритроциты.

5. Хранение

Срок хранения Цоликлона анти-Е Супер - один год при температуре 2-8°С. Вскрытый флакон можно хранить при температуре 2-8°С в закрытом виде в течение одного месяца.

6. Рекламация

Основаниями для рекламации являются: отсутствие активности, неспецифичность, нарушение целостности флакона, наличие хлопьев, получение реагента с истекшим сроком годности или недостаточными сведениями.

При составлении рекламации необходимо указать дату получения, номер серии, претензии к реагенту. Необходимо приложить протокол с результатами тестирования и 2- 3 невскрытых флакона с Цоликлоном данной серии.

Рекламацию следует направить на предприятие-изготовитель.

Начальник Управления организации медицинской помощи населению

А.И.Вялков