Приложение. Методика определения противотуберкулезных препаратов в моче

Приложение

Методика
определения противотуберкулезных препаратов в моче

Для определения в моче препаратов ГИНК к 5 мл мочи добавляют 5 мл реактива следующего состава:

     Ванадиевокислый аммоний          - 0,1 г

     Уксусная кислота ледяная         - 4 мл

     Серная кислота концентрированная - 2,2 мл

     Дистиллированной воды            - до 100 мл

При наличии в моче препаратов ГИНК появляется коричневая окраска.

Для определения ПАСК в моче к 5 мл дистиллированной воды добавляют 5-10 капель мочи и 3-5 капель 3% раствора хлорного железа. Если в моче содержится ПАСК, раствор окрашивается в красно-фиолетовый цвет,

Указанные пробы позволяют обнаружить в моче препараты на протяжении 15-16 часов после общепринятых разовых доз:

Для определения в моче этамбутола в пробирку с притертой пробкой отмеряют 1 мл мочи + 1 мл 0,1% раствора бромтимолового синего. Содержимое пробирки перемешивают. При этом смесь окрашивается в зеленый цвет. В случае, если вместо зеленого возникает голубая окраска, следует к смеси прибавить по каплям разведенную соляную кислоту, при появлении желтой окраски добавляют по каплям раствор NaOH до перехода в зеленое окрашивание. Затем в пробирку добавляют 4 мл бензола. Пробирку плотно закрывают крышкой, встряхивают и оставляют на несколько минут для расслаивания содержащейся в ней смеси.

В случае, если в исследуемой моче присутствует этамбутол, слой бензола приобретает желтое окрашивание более интенсивное, чем окрашивание, которое дает раствор, содержащий 50 мкг этамбутола в 1 мл, обработанный таким образом, как и исследуемая моча. Результаты реакции можно оценивать только при сравнении со стандартным раствором этамбутола, т.к. большинство проб мочи, не содержащей этамбутола, дает желтое окрашивание различной интенсивности. Однако интенсивность ее всегда меньше таковой стандартного раствора этамбутола указанной выше концентрации.

Реактивы: 1) 0,1% водный раствор бромтимолового синего; 100 мг вещества растворяют в 100 мл 0,05 М фосфатного буфера. Раствор фильтруют и несколько раз промывают равными объемами бензола.

2) 0,05 М фосфатный буфер (рН=7) 6,81 однозамещенного фосфата калия (КН2РО4) растворяют в 500 мл дистиллированной Н2О, прибавляют 30 мл 1N едкого натра и доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 мл. Проверяют рН полученного раствора и при необходимости добавляют растворы 0,05 М однозамещенного фосфата калия или IN едкого натра до указанного рН.

3) Стандартный раствор этамбутола, содержащий 50 мкг химически чистого препарата в 1 мл дистиллированной воды. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

4) 15% водный раствор соляной кислоты.

5) 0,2% водный раствор едкого натра.

6) Бензол.

------------------------------

* Сведения о свойствах этого препарата и его эффективности см. журнал "Проблемы туберкулеза", 1974, N 3, стр.40.