Методические указания МУК 4.1.1020-01 "Методика выполнения измерений массовой концентрации свободных альдегидов (в том числе формальдегида) в белковой оболочке фотометрическим методом" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 13 февраля 2001 г.)

Таблица 1

6.1. Калибровка стеклянных мер вместимости

Для уменьшения систематической составляющей погрешности следует выполнить калибровку мерной посуды, используемой для приготовления градуировочных растворов по ГОСТу 25794.1.

6.2. Подготовка к работе установки для отгонки альдегидов

Собирают установку для отгонки альдегидов в соответствии с рисунком (прилож. 1)

Парообразователь заполняют на 2/3 объема дистиллированной водой и нагревают ее до кипения.

6.3. Подготовка иономера к работе

Иономер и электроды готовят к измерению рН в соответствии с инструкцией по эксплуатации.

6.4. Подготовка фотоколориметра (спектрофотометра) к работе

Фотоколориметр (спектрофотометр) готовят к работе в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Устанавливают монохроматор на длину волны лямбда_max = (410+-10) нм.

6.5. Приготовление дистиллированной воды, не содержащей углекислоты

Дистиллированную воду, используемую для приготовления градуировочных растворов, кипятят по ГОСТу 4517.

6.6. Перегонка ацетилацетона

Ацетилацетон перегоняют при атмосферном давлении, собирая фракцию с Т_кип. - (134-138)°С. Используют в течение месяца после перегонки. Хранят в холодильнике в посуде из темного стекла.

6.7. Приготовление ацетилацетоноаммиачного реагента

В сухом стакане вместимостью 250 м3 взвешивают (75,0+-0,1) г ацетата аммония. Соль в стакане растворяют в 200 см3 свежей дистиллированной воды. Раствор из стакана фильтруют в мерную колбу вместимостью 500 см3; используя пипетку, вносят 1,5 см3 ледяной уксусной кислоты и 1 см3 свежеперегнанного ацетилацетона; объем раствора доводят до метки дистиллированной водой. Раствор тщательно перемешивают.

Хранят в холодильнике в посуде из темного стекла не свыше одного месяца. Не реже одного раза в неделю проверяют значение рН реагента, которое должно быть в пределах рН - 5,8 - 6,4. Если реагент не соответствует данному требованию, готовят свежий.

6.8. Построение градуированного графика

Градуировочную характеристику определяют в соответствии с прилож. 2.

6.9. Подготовка проб

Испытуемый образец оболочки тщательно расправляют и вырезают 10 двойных высечек размерами (25 х 50) мм (общая односторонняя поверхность 250 см2).

Высечки помещают в стакан вместимостью 500 см3; закрывают воронкой и промывают проточной водой с температурой (10-25)°С при расходе (0,5-1,0) дм3/мин в течение 20 мин. Затем воду из стакана сливают и промывают высечки дистиллированной водой - двумя порциями по 50 см3.

Подготовленные высечки сразу используют для выделения определяемого компонента.

7.1. Выделение определяемого компонента

Подготовленные по п.6.9 высечки переносят в коническую колбу вместимостью 500 см3. Наливают 500 см3 дистиллированной воды с температурой (20-25)°С и закрывают колбу пробкой.

Колбу помещают в сушильный шкаф, нагретый до температуры (80+-1)°С. Выдерживают в течение:

- для оболочек диаметром от 21 до 35 мм включительно - 30 мин;

- для оболочек диаметром свыше 35 мм - 3 ч.

По окончании выдержки колбу помещают в водяную баню с температурой (10-25)°С на (15-20) мин.

После охлаждения колбу оставляют настаиваться. Продолжительность настаивания:

- для оболочек диаметром от 21 до 35 мм включительно - 4 ч;

- для оболочек диаметром свыше 35 мм - 24 ч.

7.2. Измерение оптической плотности

              С = К х С [2 + С], где                          (3)

               i       дi     дi

     К  -  поправочный  коэффициент  (табл.  2),  зависящий  от  диаметра

           оболочки.

Таблица 2

Значения поправочных коэффициентов К

За результат измерения массовой концентрации свободных альдегидов в белковой оболочке принимают среднее арифметическое двух параллельных определений при удовлетворительных результатах контроля сходимости по п.10.1:

                     С = (С + С )/2, где

                           1   2

  С, С - результаты первого и второго определений, соответственно.

   1  2

10.1. Контроль сходимости результатов параллельных определений

Для контроля качества выполненной процедуры измерений используют расхождение между результатами параллельно выполненных определений для двух проб от одного дистиллята, полученного по п.7.1. Измерения признают выполненными удовлетворительно, если абсолютное расхождение между ними не превышает значений, указанных в табл. 3. В противном случае оба измерения признают несостоятельными и выполняют повторные измерения, начиная с п.7.2.

10.2. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляют в соответствии с прилож. 2. Используют градуировочные растворы N 2 (C_гр2 = 1,25 мг/дм3) и N 9 (C_гр9 = 0,1 мг/дм3).

Результат признают удовлетворительным, если для обоих растворов выполняется условие:

                   |D* - D| х 100/D <= К, где

                     0    0             гр                            (4)

     D  - значение оптической плотности, найденное по градуировочной

      0

          характеристике;

     D* - значение оптической плотности, измеренное при контроле;

       0

     К  - норматив контроля градуировочной характеристики, К_гр = 4%.

      гр

Если указанное условие не выполняется, проводят полную градуировку в соответствии с прилож. 2.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в 6 мес.

10.3. Контроль погрешности измерений массовой концентрации свободных альдегидов в экстракте

Данная операция не предусматривает контроль составляющих погрешности измерений, которые возникают при выполнении п.7.1.

Контроль осуществляют методом добавок.

Отбирают 100 см3 экстракта, полученного по п.7.1, наливают его в круглодонную колбу вместимостью 500 см3, добавляют 100 см3 градуировочного раствора N 5 (С_гр = 0,6 мг/дм3), полученного по п.1.3 (прилож. 2). В колбу добавляют (25,0 +-0,5) г сульфата натрия, соединяют части подготовленной по п.8.2 перегонной установки, и отгоняют со скоростью (4-6) см3/мин в мерную колбу 100 см3 дистиллята. В ходе отгонки равномерно подают в колбу пар, следя за тем, чтобы степень заполнения парообразователя водой была в пределах 1/3-2/3 объема. Дистиллят тщательно перемешивают.

Выполняют измерения массовой концентрации альдегидов в пробах экстракта без добавки и с добавкой в соответствии с п.п.7.2-8.

Результат признают удовлетворительным, если выполняется условие:

                    |2С* - С - 0,6| <= К, где                         (5)

     С  - массовая концентрация альдегидов в исходном экстракте, мг/дм3;

     С* - массовая концентрация альдегидов  в  разбавленном   экстракте с

          добавкой, мг/дм3;

     К  - норматив оперативного контроля точности (Р = 0,90)

                                   2        2 1/2

                    К = 0,6 (дельта + дельта*), где

     Дельта, Дельта* - характеристики  абсолютной  погрешности  измерений

                       массовых   концентраций   альдегидов   в  исходном

                       экстракте  и  в  разбавленном экстракте с добавкой

                       (Дельта = дельта х С/100,   Дельта*  =   дельта  х

                       С*/100).

Если условие не выполняется, операцию повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

Контроль погрешности измерений проводят не реже 1 раза в 6 мес.

11.1. При выполнении анализов необходимо выполнять требования безопасности при работе с химическими реактивами.

В процессе анализа используются следующие пожароопасные и токсичные вещества.

Ацетилацетон. Подвижная прозрачная бесцветная жидкость со специфическим запахом. Плотность при 25°С - 972 кг/м3. Ограниченно смешивается с водой. Температура кипения - 139°С. Температура вспышки - 16,1°С. Выполнять все работы и хранить на расстоянии не менее 0,7 м от источников тепла.

Уксусная кислота. Подвижная прозрачная бесцветная жидкость со специфическим резким запахом. Неограниченно смешивается с водой. Температура кипения - 118,1°С. Температура вспышки - 38°С. Сильно токсична: оказывает раздражающее и прижигающее действие на кожу и слизистые оболочки глаз и носа. ПДК_сс - 0,015 мг/м3; класс опасности - II.

Все работы с указанными веществами выполнять в вытяжном шкафу, в очках и перчатках на расстоянии не менее 0,7 м от источников тепла.

При попадании на кожу и в глаза обильно промыть водой, затем 1%-ным раствором питьевой соды и вновь водой.

11.2. Электробезопасность при работе с электронагревательными и электроизмерительными приборами - по ГОСТу 12.1.019.

11.3. Организация обучения работающих правилам безопасного ведения работ - по ГОСТу 12.4.009.

11.4. Требования экологической безопасности. Отходы ацетилацетона и уксусной кислоты собирают и отправляют на уничтожение в установленном порядке.