Вход
Методические указания МУК 4.1.1020-01 "Методика выполнения измерений массовой концентрации свободных альдегидов (в том числе формальдегида) в белковой оболочке фотометрическим методом" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 13 февраля 2001 г.)
-
Приложение 1. Установка для отгонки альдегидов
-
Приложение 2. Построение градуировочной характеристики
2. Приписанные характеристики погрешности измерений
Границы относительной погрешности результатов измерений (при Р = 0,95) дельта = +-(26-10 х С)%, где С - массовая концентрация свободных альдегидов, мг/дм3.
3. Метод измерений
Метод основан на измерении оптической плотности водного раствора окрашенного соединения 4-R-3,5-диацетил-дигидролутидинов, образующихся в реакции альдегидов с ацетилацетоновоаммиачным реагентом.
Измерения выполняют в области спектра, близкой к максимуму поглощения на длине волны лямбда = (410+-10) нм.
4. Средства измерения, вспомогательные устройства и материалы
При подготовке и выполнении измерений применяют средства измерений и другие технические средства, приведенные в табл. 1.
Таблица 1
| Наименование средств измерений и вспомогательных устройств |
Обозначение стандарта, ТУ и типа средства измерений либо его метрологические характеристики, или ссылки на чертеж или приложение |
Назначение по МВИ | |
| Подготовите- льные операции |
Операции измерения |
||
| Средства измерения | |||
| 1. Государственный стандартный образец состава водного раствора формальдегида или аттестованная смесь производства ГУП "ВНИИМ им.Д.И.Менделеева" |
ГСО 6263-91 | прилож. | |
| 2. Весы лабораторные любого типа |
Абсолютная погрешность взвешивания - 10 мг |
6.1;6.7 | - |
| 3. Фотоколориметр или спектрофотометр любой |
Спектральный диапазон измерений должен включать (410+-10) нм |
прилож. 2 | 7.2 |
| 4. Кюветы стеклянные | Номинальная длина - 50 и 30 мм |
6.4; прилож. 2 |
7.2 |
| 5. Иономер любого типа |
Абсолютная погрешность измерения - 0,1 ед. РН; диапазон измерений - от 0 до 14 ед. рН |
6.7 | - |
| 6. Электроды стеклянные, лабораторные ЭСЛ-43-07, ЭСЛ-63-07 |
ТУ 25.05.2234-77 | 6.7 | - |
| 7. Стеклянные меры вместимости | |||
| 7.1. Колбы мерные | 2 класса точности по ГОСТу 1770 | ||
| 1-500-2 или 2-500-2 | 6.7 | - | |
| 1-250-2 или 2-250-2 | прилож. 2 | - | |
| 1-100-2 или 2-100-2 | прилож. 2 | - | |
| 1-25-2 или 2-25-2 | прилож. 2 | - | |
| 7.2. Цилиндры мерные | 2 класса точности по ГОСТу 1770 | ||
| 1-500-2 или 2-500-2 | - | 7.1 | |
| 1-250-2 или 2-250-2 | - | 7.1 | |
| 7.3. Пипетки | 2 класса точности по ГОСТу 29169-91 или 29227-91 | ||
| 1-1-1, 1-2-2-1 | прилож. 2 | - | |
| 2-2-5 или 1-2-2-5 |
6.7; прилож. 2 |
- | |
| 2-2-10 или 1-2-2-10 | прилож. 2 | - | |
| 2-2-25 или 1-2-2-25 | - | - | |
| Вспомогательные устройства | |||
| 1. Колбы конические | |||
| Кн-1-500-29/32 по ГОСТу 25336 |
- | 7.1 | |
| Кн-1-100-29/32 по ГОСТу 25336 |
прилож. 2 | 7.2 | |
| 2. Стаканы | |||
| В-1-500 по ГОСТу 25336 | - | 7.1 | |
| В-1-250 по ГОСТу 25336 | 6.7 | - | |
| 3. Холодильник с прямой трубкой |
ХПТ-1-300-14/23 по ГОСТу 25336 |
- | 7.1 |
| 4. Насадка | H1 по ГОСТу 25336 | - | 7.1 |
| 5. Алонж | ГОСТ 23932-90 | - | 7.1 |
| 6. Воронка | ВК-50-1 ХС по ГОСТу 25336 |
6.7 | 7.1 |
| 7. Шпатель | ГОСТ 23932-90 | 6.7 | 7.1 |
| 8. Пуансон | Формат (50 х 25) мм | - | 7.1 |
| 9. Шкаф сушильный любого типа |
Температура 100°С; неоднородность поля температуры - +-2°С |
прилож. 2 | 7.1; 7.2 |
| 10. Плитка электрическая |
С закрытой спиралью; регулируемая мощность - не менее 800 Вт |
6.5 | 7.1 |
| 11. Парообразователь | Регулируемая паропроизводительность по конденсату - не менее 4 см3/мин |
- | 7.1 |
| 12. Колбонагреватель | Регулируемая мощность - не менее 300 Вт |
- | 7.1 |
| Реактивы и материалы | |||
| 1. Ацетилацетон | х.ч.или ч.д.а. по ГОСТу 10259 |
6.7 | - |
| 2. Аммоний уксуснокислый |
х.ч. или ч.д.а. по ГОСТу 3117 |
6.7 | - |
| 3. Кислота уксусная | х.ч.по ГОСТ 61-75 | 6.7 | - |
| 4. Натрий серно-кислый безводный |
х.ч. или ч.д.а. по ГОСТу 4233 |
- | 7.1 |
| 5. Вода дистиллированная |
по ГОСТу 6709 |
6.4; 6.5; 6.7; |
7.1; 7.2 |
| прилож. 2 | |||
| 6. Бумага фильтровальная |
Любая | 6.7 | 7.1 |
5. Условия измерений
При подготовке и в ходе выполнения измерений необходимо выполнять следующие условия:
- температура окружающей среды - от 15 до 30°С;
- относительная влажность воздуха - от 40 до 95%;
- атмосферное давление - (84 - 106) кПа.
6. Подготовка к выполнению измерений
При подготовке к выполнению измерений должны быть выполнены перечисленные ниже операции.
6.1. Калибровка стеклянных мер вместимости
Для уменьшения систематической составляющей погрешности следует выполнить калибровку мерной посуды, используемой для приготовления градуировочных растворов по ГОСТу 25794.1.
6.2. Подготовка к работе установки для отгонки альдегидов
Собирают установку для отгонки альдегидов в соответствии с рисунком (прилож. 1)
Парообразователь заполняют на 2/3 объема дистиллированной водой и нагревают ее до кипения.
6.3. Подготовка иономера к работе
Иономер и электроды готовят к измерению рН в соответствии с инструкцией по эксплуатации.
6.4. Подготовка фотоколориметра (спектрофотометра) к работе
Фотоколориметр (спектрофотометр) готовят к работе в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Устанавливают монохроматор на длину волны лямбда_max = (410+-10) нм.
Подготовка кювет
Необходимое число кювет заполняют до метки свежей дистиллированной водой. Выбирают одну из них в качестве кюветы сравнения. Выполняют измерения оптической плотности остальных кювет относительно кюветы сравнения.
Если отклонение оптической плотности контролируемой кюветы от кюветы сравнения |Дельта_к| > 0,01, полученную поправку вычитают из результата измерений.
Кювету сравнения маркируют и хранят отдельно от других кювет. Значения поправки наносят карандашом на верхнюю (вытравленную) кромку кюветы. Если значения поправок всех используемых кювет различаются не более чем на 0,01, допускается характеризовать весь набор кювет единым средним значением поправки Дельта_к.
6.5. Приготовление дистиллированной воды, не содержащей углекислоты
Дистиллированную воду, используемую для приготовления градуировочных растворов, кипятят по ГОСТу 4517.
6.6. Перегонка ацетилацетона
Ацетилацетон перегоняют при атмосферном давлении, собирая фракцию с Т_кип. - (134-138)°С. Используют в течение месяца после перегонки. Хранят в холодильнике в посуде из темного стекла.
6.7. Приготовление ацетилацетоноаммиачного реагента
В сухом стакане вместимостью 250 м3 взвешивают (75,0+-0,1) г ацетата аммония. Соль в стакане растворяют в 200 см3 свежей дистиллированной воды. Раствор из стакана фильтруют в мерную колбу вместимостью 500 см3; используя пипетку, вносят 1,5 см3 ледяной уксусной кислоты и 1 см3 свежеперегнанного ацетилацетона; объем раствора доводят до метки дистиллированной водой. Раствор тщательно перемешивают.
Хранят в холодильнике в посуде из темного стекла не свыше одного месяца. Не реже одного раза в неделю проверяют значение рН реагента, которое должно быть в пределах рН - 5,8 - 6,4. Если реагент не соответствует данному требованию, готовят свежий.
6.8. Построение градуированного графика
Градуировочную характеристику определяют в соответствии с прилож. 2.
6.9. Подготовка проб
Испытуемый образец оболочки тщательно расправляют и вырезают 10 двойных высечек размерами (25 х 50) мм (общая односторонняя поверхность 250 см2).
Высечки помещают в стакан вместимостью 500 см3; закрывают воронкой и промывают проточной водой с температурой (10-25)°С при расходе (0,5-1,0) дм3/мин в течение 20 мин. Затем воду из стакана сливают и промывают высечки дистиллированной водой - двумя порциями по 50 см3.
Подготовленные высечки сразу используют для выделения определяемого компонента.
7. Выполнение измерений
При выполнении измерений должны быть последовательно выполнены перечисленные ниже операции, причем операции, начиная с п.7.2 - дважды.
7.1. Выделение определяемого компонента
Подготовленные по п.6.9 высечки переносят в коническую колбу вместимостью 500 см3. Наливают 500 см3 дистиллированной воды с температурой (20-25)°С и закрывают колбу пробкой.
Колбу помещают в сушильный шкаф, нагретый до температуры (80+-1)°С. Выдерживают в течение:
- для оболочек диаметром от 21 до 35 мм включительно - 30 мин;
- для оболочек диаметром свыше 35 мм - 3 ч.
По окончании выдержки колбу помещают в водяную баню с температурой (10-25)°С на (15-20) мин.
После охлаждения колбу оставляют настаиваться. Продолжительность настаивания:
- для оболочек диаметром от 21 до 35 мм включительно - 4 ч;
- для оболочек диаметром свыше 35 мм - 24 ч.
7.1.2. Отгонку формальдегида из полученного экстракта выполняют сразу после проведения настаивания. Отбирают 200 см3 экстракта, наливают его в круглодонную колбу вместимостью 500 см3, добавляют (25 +-0,5) г сульфата натрия, соединяют части подготовленной по п.6.2 перегонной установки, и отгоняют со скоростью (4-6) см3/мин в мерную колбу 100 см3 дистиллята. В ходе отгонки равномерно подают в колбу пар, следя за тем, чтобы степень заполнения парообразователя водой была в пределах 1/3-2/3 объема.
Дистиллят тщательно перемешивают и используют для измерений массовой концентрации альдегидов.
Допускается хранить в холодильнике до 6 ч.
7.2. Измерение оптической плотности
7.2.1. Приготовление испытуемого раствора N 1
В коническую колбу вместимостью 100 см3 вносят, используя пипетку, 15,0 см3 дистиллята, полученного по п.7.1, 10,0 см3 ацетилацетоноаммиачного реагента и тщательно перемешивают.
Приготовление растворов сравнения (N 2 и N 3)
Раствор N 2. В коническую колбу вместимостью 100 см3 вносят 10,0 см3 ацетилацетоноаммиачного реагента, 15,0 см3 дистиллированной воды и тщательно перемешивают.
Раствор N 3. В коническую колбу вместимостью 100 см3 вносят 15,0 см3 дистиллята, полученного по п.7.1, 10,0 см3 дистиллированной воды и тщательно перемешивают.
Растворы N 2 и N 3 годны в течение одного рабочего дня.
7.2.2. Измерение оптической плотности
Испытуемый раствор и раствор сравнения N 2 термостатируют при (50 +-1)°С в течение (20+-1) мин и охлаждают водой до комнатной температуры.
Испытуемый раствор и растворы сравнения N 2 и N 3 тщательно перемешивают и из колб наливают в пронумерованные рабочие кюветы номинальной длиной 50 мм.
В кювету сравнения наливают кипяченую дистиллированную воду, приготовленную по п.6.5.
Кюветы с испытуемым раствором и дистиллированной водой устанавливают в кюветодержатель так, чтобы их торцевые грани находились в одной плоскости. Определяют (в соответствии с инструкцией по эксплуатации используемого средства измерения) по трем наблюдениям оптическую плотность для испытуемого раствора относительно дистиллированной воды - D_1i (I - номер пробы дистиллята, i - от 1 до 2).
Затем аналогично, по трем параллельным наблюдениям, измеряют оптическую плотность раствора сравнения N 2 - D_2, и раствора сравнения N 3 - D_3 относительно дистиллированной воды.
Если D_1i > 0,8, измерения выполняют в кюветах номинальной рабочей длиной 30 мм.
8. Обработка (вычисление) результатов измерений
Вычисляют значение величины D_0:
D = D - D - D - Дельта, где (1)
0i 1i 2 3 к
Дельта - алгебраическая величина кюветной поправки,
к
установленная по к п.6.4.
Исходя из значения D, вычисляют массовую концентрацию
альдегидов в
0i
дистилляте - С, мг/ дм3:
дi
C = 25D /15 B, где (2)
дi 0i
В - угловой коэффициент градуировочной характеристики, дм3/мг
(прилож. 2, п.2.2);
15 и 25 см3 - объемы отбираемой аликвоты дистиллята и полученного из нее после добавления ацетилацетонового реагента раствора соответственно.
Массовую концентрацию альдегидов в белковой оболочке С (мг/дм3) в вытяжке рассчитывают по формуле:
С = К х С [2 + С], где (3)
i дi дi
К - поправочный коэффициент (табл. 2), зависящий от диаметра
оболочки.
Таблица 2
Значения поправочных коэффициентов К
| Номиналь- ный диаметр, мм |
21 | 28 | 35 | 40 | 45 | 50 | 55 | 60 | 65 | 70 | 75 | 85 | 100 | 120 |
| Значение К |
0,23 | 0,22 | 0,21 | 0,20 | 0,19 | 0,18 | 0,17 | 0,16 | 0,16 | 0,16 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 |
За результат измерения массовой концентрации свободных альдегидов в белковой оболочке принимают среднее арифметическое двух параллельных определений при удовлетворительных результатах контроля сходимости по п.10.1:
С = (С + С )/2, где
1 2
С, С - результаты первого и второго определений, соответственно.
1 2
9. Представление результатов измерений
Результаты измерений массовой концентрации свободных альдегидов в белковой оболочке при записи в документах представляют в виде:
(С+-Дельта), мг/дм3 (Р = 0,95), где
С - среднее значение
Вы можете открыть актуальную версию документа прямо сейчас.
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.