Приложение 6 (рекомендуемое). Метод определения остаточного содержания акриламида в образцах анионного или неионного полиакриламида

Приложение 6

(рекомендуемое)

Метод определения остаточного содержания акриламида в образцах анионного или неионного полиакриламида

1. Принцип метода: мономер акриламид экстрагируется из образца анионного или неионного полиакриламида смесью воды и метанола, которая размягчает, но не растворяет полимер. Экстракт анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР) с ультрафиолетовым детектором. Идентификация осуществляется сравнением с внешним стандартом, концентрация определяется измерениями площади пиков.

2. Аппаратура.

2.1. Для экстракции.

2.1.1. Стеклянные колбы, емкостью около 125 мл, с притертыми пробками.

2.1.2. Весы точностью до 0,1 мг.

2.1.3. Лабораторный вибростол или смеситель.

2.1.4. Мерные цилиндры.

2.1.5. Шприцы, емкостью 2 мл.

2.1.6. Одноразовые фильтры для шприцов диаметром 25 мм, снабженные мембранами из поливинилфторида, с размером пор 0,45 мкм.

2.1.7. Лабораторные дробилки.

2.1.8. Сита из плетеной проволоки, размер апертуры - 1000 мкм.

2.2. Для анализов.

2.2.1. Жидкостной хроматограф высокого разрешения, с системой непрерывной подачи растворителя, клапаном введения образцов, контуром (петлей) на 5 мкм, термостатом для колонок, спектрометрическим ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны, регистрирующее устройство или электронный интегратор, колонка с наполнителем длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм (к примеру, FISONS PLRP-S 100А).

2.2.2. Весы с точностью до 0,1 мг.

2.2.3. Мерные колбы.

2.2.4. Пипетки с точностью 0,03 мл.

2.2.5. Микролитровые шприцы.

2.3. Реактивы.

2.3.1. Гелий высокой чистоты, давление на линии 0,0069 кПа.

2.3.2. Акриламид (марки для электрофореза).

2.3.3. Метанол.

2.3.4. Фосфорная кислота 88% масс., плотность р = 1,75 г/см3.

2.3.5. Дигидрофосфат натрия дигидрат.

2.3.6. Элюент. Взвесить с точностью до 0,001 г 6,240 г дигидрофосфата натрия дигидрата и растворить его в 500 мл воды. Перенести количественно в мерную колбу на 2000 мл, заполнить колбу до метки и перемешать. Довести рН до 3,0 фосфорной кислотой. Дегазировать при помощи ультразвуковой бани или пропусканием через раствор гелия. Хранить элюент в бутылке из темного стекла.

2.3.7. Растворитель - метаноловодная смесь. Отмерить 800 мл метанола в мерный цилиндр на 1 л. Затем отмерить 200 мл воды в мерный цилиндр на 250 мл. Перелить воду в 1-й цилиндр тщательно смешать, но без интенсивного перемешивания (произойдет уменьшение объема, что является нормальным). Дегазировать при помощи ультразвуковой бани или пропусканием через раствор гелия. Хранить смесь в бутылке из темного стекла.

2.3.8. Мономер акриламид, стандартный раствор для хранения (1000 мг/л). Взвесить с точностью до 0,001 г 0,5 г акриламида, поместить мономер в колбу и залить 200 мл метаноловодной смеси, затем перенести в мерную колбу на 500 мл и довести объем до метки растворителем. Хранить в герметичной склянке в холодильнике. Раствор устойчив в течение 4 недель.

2.3.9. Мономер акриламид, стандартный раствор (20 мг/л). Ввести пипеткой 5 мл основного раствора (1000 мг/л) в мерную колбу на 250 мл, довести объем до метки растворителем. Хранить в герметичной склянке в холодильнике. Раствор устойчив в течение 1 недели.

2.4. Ход определения.

2.4.1. Подготовка образца для испытаний. Образцы, содержащие более 10 масс. % частиц размером более 1000 мкм, должны быть измельчены с помощью лабораторной дробилки, пока весь материал не будет проходить через сито с апертурой 1000 мкм. Полученный материал - проба А.

2.4.2. Подготовка пробы для анализа.

2.4.2.1. Взвесить с точностью до 0,001 г 4 г образца для испытаний (А), поместить его в колбу на 125 мл, добавить 40 мл метаноловодной смеси.

2.4.2.2. Плотно закрыть колбу и перемешивать на вибростоле или смесителе не менее 16 часов.

2.4.2.3. Полученный жидкий экстракт (проба Б) хранить в холодильнике не более 1 недели до анализа.

2.4.3. Условия хроматографирования:

- мобильная фаза/растворитель для элюирования - водный раствор 0,02 моль/л дигидрофосфата натрия при рН 3,0;

- объемная скорость потока - 1,5 мл/мин;

- температура колонки - 40°С;

- длина волны - около 220 нм в области максимального поглощения.

2.4.4. Анализ экстракта. Используя шприц отобрать часть жидкого экстракта (образец Б). Уста