Приложение 5 (рекомендуемое). Метод определения диаллилдиметиламмоний хлорида (ДАДМАХ) гельпроникающей хроматографией (ГПХ)

Приложение 5

(рекомендуемое)

Метод определения диаллилдиметиламмоний хлорида (ДАДМАХ) гельпроникающей хроматографией (ГПХ)

1. Принцип метода. Продукт разбавляется мобильной фазой и вводится непосредственно в жидкостной хроматограф (ЖХ). Высота пика мономера пропорциональна концентрации мономера в продукте и измеряется интегратором.

2. Реактивы.

2.1. Ацетата натрия тригидрат, марка - для жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР).

2.2. Ледяная уксусная кислота марки ЖХВР.

2.3. Мономер ДАДМАХ марки ЧДА.

2.4. Подвижная фаза: 0,3125 М эквимолярный буферный раствор - ацетат натрия/уксусная кислота. Взвесить 42,5 +- 0,01 г тригидрата ацетата натрия, поместить в стакан и добавить примерно 300 мл воды. Перемешать и перенести в мерную колбу на 1 л. Пипеткой ввести в колбу 18 мл ледяной уксусной кислоты, заполнить до метки водой и хорошо перемешать. Профильтровать под вакуумом через 0,22 мкм мембрану.

2.5. Мономер ДАДМАХ, стандартный раствор для хранения (1000 мг/л): взвесить с точностью до 0,001 г 0,1 ДАДМАХ, перенести в мерную колбу на 100 мл и заполнить до метки буферным раствором.

2.6. Мономер ДАДМАХ калибровочный раствор: количественно разбавлять стандартный раствор ДАДМАХ для хранения (1000 мг/л) буферным раствором, чтобы получить растворы концентраций 20, 50, 100, 200 и 400 мг/л.

3. Аппаратура.

3.1. Система для ЖХ, включающая:

- насос подачи растворителя ЖХВР;

- инжектор для пробы с петлей на 200 мкл;

- дифференциальный рефрактометр;

- интегратор;

- делительная колонка (внутренний диаметр 7,8 мм, длина 30 см);

- защитная колонка (внутренний диаметр 7,8 мм, длина 30 см).

3.2. Пипетки с точностью 0,03 мл.

3.3. Весы точностью до 0,1 мг.

3.4. Мерные колбы и стаканы.

3.5. Мембрана для фильтрации пробы и стандартного раствора из поливинилдифторида (размер пор - 0,45 мкм), помещенная в диск из полипропилена.

4. Ход определения.

4.1. Тестовая порция: взвесить с точностью до 0,1 мг 0,5-1,0 г тестируемой пробы продукта, перенести в мерную колбу на 100 мл. Добавить около 50 мл буферного раствора, закрыть колбу и сильно потрясти для перемешивания. Заполнить до метки буферным раствором, закрыть колбу и тщательно перемешать до получения гомогенного раствора.

4.2. Настройки приборов.

4.2.1. Образцы, калибровочные и контрольные растворы анализируются ЖХ при следующих условиях и настройках:

- расход подвижной фазы 1 мл/мин;

- рН подвижной фазы 4,7;

- закачка 200 мкл, используя шприц на 2 мл.

4.2.2. Настройки детектора:

- выходной сигнал на интегратор 1 вольт;

- чувствительность детектора 31,2 мвольт.

4.2.3. Настройки интегратора:

- "ослабление" 32 мвольт на полной шкале;

- ноль установить на 10% от полной шкалы.

4.3. Анализ пробы: пропустить 2 мл каждого калибровочного раствора через 0,45 мкм фильтр в контур и закачать в систему ЖХ.

Получить с помощью интегратора высоты соответствующих пиков и построить калибровочный график в координатах: высота пика - концентрация. Повторить эту процедуру для исследуемого раствора.

4.4. Анализ контрольного раствора: повторить процедуру (п. 4.3), заменив исследуемый раствор на буфер.

4.5. Выражение результатов.

4.5.1. Способ расчета. Содержание ДАДМАХ С_3, выраженное в мг/кг образца, вычисляют по следующей формуле:

                                   100 x c

                              C = ---------,

                               3      m

     где с - концентрация   ДАДМАХ  (мг/л)  в   исследуемом  растворе, по

             калибровочному графику;

         m - масса образца, г.

Содержание ДАДМАХ, в мг на кг образца, можно вычислить и по другой формуле:

                                  10000 x c

                             C = -----------,

                              3     m х С

                                         0

     где С  - содержание активного вещества в %.

          0

4.5.2. Точность. Абсолютное различие между двумя отдельными результатами, полученными при условии повторяемости, не должно превышать величину повторяемости r, рассчитываемую по следующему уравнению:

r = 0,07 Z, где:

Z - среднее из двух результатов, выраженных в мг/кг продукта.