Методические указания МУК 4.1.636-96 "Методические указания по определению тиомочевины в атмосферном воздухе методом тонкослойной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 31 октября 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.636-96
"Методические указания по определению тиомочевины в атмосферном воздухе методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 31 октября 1996 г.)

Дата введения: с момента утверждения

Введены впервые

Настоящие методические указания устанавливают методику количественного химического анализа атмосферного воздуха методом тонкослойной хроматографии для определения в нем содержания тиомочевины в диапазоне концентраций 0,008-0,16 мг/м3.

NH2C(S)NH2                      Мол. масса 76,11

Тиомочевина - белое кристаллическое вещество, температура плавления - 174-176°С. При температуре кипения разлагается. Растворимость в воде (13°С) - 9,18 г/100 см3. Легко растворяется в этаноле, ацетоне; трудно - в диэтиловом эфире, этилацетоне; не растворяется в гексане. В воздухе находится в виде аэрозоля.

Угнетает функцию щитовидной железы, органов кроветворения, вызывает аллергические реакции. Предполагаемый ОБУВ для атмосферного воздуха - 0,01 мг/м3.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +-17,7%, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерение концентрации тиомочевины выполняют методом тонкослойной хроматографии с УФ детектированием и денситометрическим количественным определением.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,2 мкг.

Определению не мешают: мочевина и ее производные, амины, карбоновые кислоты.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.

3.1. Средства измерений

Барометр-анероид М-67	ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104-80Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Денситометр любого типа
Меры массы, 1-го кл.	ГОСТ 7328-82Е

См. ГОСТ OIML R 111-1-2009 "Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов , , , , , , , и . Часть 1. Метрологические и технические требования", введеный в действие приказом Росстандарта от 22 августа 2011 г. N 233-ст

Микрошприц МШ-10М	ГОСТ 8043-74
Посуда стеклянная лабораторная	ГОСТ 1770-74Е, 20292-74Е
Секундомер	ГОСТ 5072-79
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2; пределы 0-55°С, цена деления 1°С	ГОСТ 215-73Е
Электроаспиратор ЭА-1	ТУ 25-11-1414-78

3.2. Вспомогательные устройства

Испаритель ротационный
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79
Камера хроматографическая стеклянная типа СП-40	ГОСТ 25336-82Е
Камера для опрыскивания пластинок	ГОСТ 11413-70
Колбы грушевидные для отгонки растворителя	ГОСТ 25336-82Е
Пластины хроматографические "Силуфол" размером 150 х 150 мм (производство Чехия)
Пульверизатор стеклянный	ГОСТ 10391-74
Фильтродержатель, изготовитель ВО "Изотоп"

3.3. Материалы

Фильтр бумажный "синяя лента"

ТУ 6-09-1678-77

3.4 Реактивы

Аммиак водный, х. ч.	ГОСТ 3760-79
Ацетон, ч. д. а.	ГОСТ 2603-79
Гексан, ч.	ТУ 6-09-3375-78
Серебро азотнокислое, х. ч.	ГОСТ 1277-75
Этанол, х. ч.	ТУ 6-09-1710-77
Тиомочевина, х. ч.	ГОСТ 6344-73

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.

4.2. При работе с электроаспиратором следует соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже старшего лаборанта, с опытом работы в тонкослойной хроматографии.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при температуре воздуха (20+-10)°С, атмосферном давлении 630-800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, построение стандартной шкалы, отбор проб.

7.1. Приготовление растворов

Исходный раствор тиомочевины для градуировки (с = 1 мг/см3). 100 мг тиомочевины вносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем до метки ацетоном и тщательно перемешивают. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.

Рабочий раствор тиомочевины для градуировки (с = 0,05 мг/см3). 5 см3 исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем до метки ацетоном и тщательно перемешивают. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

Подвижная фаза для хроматографии. Смесь гексана, ацетона и водного аммиака в объемном соотношении 30 : 30 : 1. Готовят в хроматографической камере за 30 мин до анализа. Высота слоя подвижной фазы 0,5 см.

Проявляющий реагент. 2% водный раствор нитрата серебра, 2 г нитрата серебра растворяют в 98 см3 дистиллированной воды.

7.2. Построение стандартной шкалы

Стандартную шкалу строят по 5-ти сериям градуировочных растворов. Каждую серию, состоящую из 6-ти растворов, готовят в мерных колбах вместимостью 25 см3. В каждую колбу вносят рабочий раствор согласно таблице, доводят объем до метки ацетоном и тщательно перемешивают. Растворы устойчивы в течение месяца при хранении в холодильнике.

Таблица 1

Растворы для построения стандартной шкалы при определении концентрации тиомочевины

Номер раствора для градуировки	1	2	3	4	5	6
Объем рабочего раствора (с = 0,05 мг/см3), см3	0,5	1,0	2,0	2,5	5,0	10,0
Масса тиомочевины в 0,2 см3 (пятно), мкг	0,2	0,4	0,8	1,0	2,0	4,0

В 6 конических пробирок помещают по 0,2 см3 каждого раствора для градуировки. На хроматографической пластине на расстоянии 15 мм от края намечают линию старта. Содержимое пробирок с помощью микрошприца или микропипетки наносят количественно на линию старта в виде отдельных пятен диаметром не более 10 мм по обеим сторонам от ее центра (центр оставляют для нанесения пятна пробы) на расстоянии 15 мм друг от друга. Хроматографический анализ шкалы стандартов проводят одномоментно с анализом пробы в условиях, изложенных в п. 8.

ГАРАНТ:

Нумерация разделов приводится в соответствии с источником

7.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят согласно ГОСТу 17.2.3.01-86.

Воздух со скоростью 10 дм3/мин аспирируют через бумажный фильтр, закрепленный в фильтродержателе, в течение 25 мин. Фильтр с отобранной пробой сворачивают трубочкой, помещают в пробирку. Срок хранения пробы в закрытых пробирках - в течение недели.

8. Выполнение измерений

Фильтр с пробой в пробирке заливают 10 см3 смесью ацетона и этилового спирта в объемном соотношении 80 : 20 и экстрагируют при интенсивном встряхивании в течение 1-2 мин. Экстракцию повторяют дважды. Затем экстракты сливают в отгонную колбу и концентрируют с помощью ротационного испарителя до 2-3 см3, а затем в слабом токе воздуха до 1-2 капель. Остаток растворяют в 2 см3 смеси ацетон : гексан в объемном соотношении 1 : 2. В коническую пробирку переносят 0,2 см3 этого раствора и количественно наносят его в центр линии старта на хроматографическую пластинку с предварительно нанесенной стандартной шкалой. Пластинку помещают в наклонном положении в хроматографическую камеру с подвижной фазой и развивают хроматограмму на высоту 10 см. Затем пластину вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и опрыскивают из пульверизатора 2% водным раствором азотнокислого серебра. Тиомочевина проявляется в виде серо-коричневых пятен с Rf 0,24+-0,01 на белом фоне. Окраска пятен устойчива. Фон пластины не изменяется длительное время при хранении в темноте. Количество тиомочевины в пробе определяют с помощью денситометра, используя светофильтр с длиной волны 254 нм, по отношению интегральных значений содержания вещества в пятнах пробы и стандартной шкалы.

9. Вычисление результатов измерений

Концентрацию тиомочевины в атмосферном воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:

                     m х V

                          1

                С = --------, где

                     V x V

                      2   0

     m - масса тиомочевины, найденная в анализируемом объеме пробы, мкг;

     V  - общий объем раствора пробы, см3;

      1

     V  - объем анализируемого раствора пробы, см3;

      2

     V  - объем  отобранного воздуха, приведенный к нормальным  условиям,

      0

дм3;

                    V x 273 x P

                      t

              V = ----------------, где

               0  (273 + t) x 760

     V  - объем пробы воздуха, дм3;

      t

     Р - атмосферное давление в месте отбора пробы, мм рт. ст.;

     t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.