Методические указания МУК 4.1.1428-03 "Измерение концентраций Десмедифама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1428-03
"Измерение концентраций Десмедифама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)

Дата введения: 30 июня 2003 г.

Введены впервые

2. Методика измерения концентраций Десмедифама в воздухе рабочей зоны и атмосфрном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип методики

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента". Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в т.ч. фенмедифама.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)

Число параллельных определений	6.
Предел обнаружения в хроматографируемом объеме	2 нг.
Предел обнаружения в воздухе при отборе 60 дм3 воздуха	0,005 мг/м3.
Диапазон определяемых концентраций	0,005 - 0,05 мг/м3 (при отборе 60 дм3 воздуха); 0,3 - 3,0 мг/м3 (при отборе 1 дм3 воздуха)
Среднее значение определения	95,6%.
Стандартное отклонение (S)	2,34%.
Относительное стандартное отклонение (DS)	0,95%.
Доверительный интервал среднего	2,44%.
Суммарная погрешность измерения	не превышает 19%.

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Десмедифам с содержанием д.в. 99,5%
Ацетон, чда	ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии (УФ 210 нм)	ТУ 6-09-4326-6
Вода дистиллированная, деионизованная или перегнанная над КМO4
Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные, предварительно промытые ацетоном	ТУ 6-09-2678-77

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф Waters (США) с ультрафиолетовым детектором или другой аналогичного типа
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Zorbax SB-C18, зернением 5 мкм
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Lichrosorb RP-18, зернением 5 мкм
Микрошприц для жидкостного хроматографа, вместимостью 50 - 100 мкл
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-76
Весы аналитические типа ВЛА-200	ГОСТ 34104-80Е
Насос водоструйный	ГОСТ 10696-75
Аспирационное устройство типа ЭА-1 или аналогичное	ТУ 25-11-1414-78
Барометр	ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0 - 55°С	ГОСТ 215-73Е
Колбы мерные, вместимостью 100 и 1 000 мл	ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные, вместимостью 10 и 500 мл	ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл	ГОСТ 10394-72
Пробирки центрифужные	ГОСТ 25336-82Е
Стаканы химические, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Воронки химические, конусные, диаметром 34 - 40 мм	ГОСТ 25336-82Е
Груша резиновая
Фильтродержатели
Стеклянные палочки

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 10394-72 и ГОСТ 10696-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

2.4. Отбор проб

Воздух со скоростью 1 - 5 дм3/мин пропускают через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации вещества на уровне 0,005 мг/м3 следует отобрать 60 дм3 воздуха.

Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в холодильнике при температуре 6 +- 2°С в течение 10 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

Отмеряют 450 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1 000 мл, добавляют 500 мл бидистиллированной воды, фильтруют и дегазируют.

2.5.2. Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ подвижной фазой при скорости подачи растворителя 1 мл/мин в течение 30 - 45 мин до получения стабильной базовой линии.

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор Десмедифама с содержанием 1,0 мг/мл готовят растворением 0,1005 г препарата, содержащего 99,5% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике при 6 +- 2°С в течение месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора соответствующим последовательным разбавлением ацетонитрилом. Растворы хранят в холодильнике при 6 +- 2°С не более 10 дней.

2.5.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного Десмедифама с концентрацией 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение площади хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график зависимости площади хроматографического пика (мВ x мин) от концентрации Десмедифама в растворе (мкг/мл).

2.6. Описание определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетона, оставляют на 10 - 15 мин, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40°С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл ацетонитрила, фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Waters (США)

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Zorbax SB-C18, зернением 5 мкм

Температура колонки	комнатная.
Подвижная фаза	ацетонитрил-вода (45:50, по объему).
Скорость потока элюента	1 мл/мин.
Рабочая длина волны	235 нм.
Чувствительность	0,005 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы	20 мкл
Время выхода Десмедифама	12,805 - 13,059 мин
Линейный диапазон детектирования	2,0 - 20 нг

2.7.2. Альтернативная неподвижная фаза: колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Lichrosorb RP-18, зернением 5 мкм

Подвижная фаза	ацетонитрил-вода (60:40, по объему)
Условия хроматографирования те же.
Время выхода Десмедифама	5,07 - 5,023 мин

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/мл, разбавляют ацетонитрилом.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание Десмедифама рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                          C x W

                      X = -----, где

                            V

Х - содержание Десмедифама в пробе воздуха, мг/м3;

С - концентрация Десмедифама в хроматографируемом растворе,  найденная по

    калибровочному графику, мкг/мл;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

V - объем  пробы  воздуха,   отобранного  для  анализа,   приведенного  к

    стандартным  условиям  (давление 760 мм рт. ст.,  температура  20°С),

    дм3.

3. Требования безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

4. Разработчики

Калинин В.А., проф., к. с-х. н.; Довгилевич Е.В., к. биол. н.; Калинина Т.С, к. с-х. н.; Довгилевич А.В., к. хим. н.

Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976- 43-26.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко