Приложение 6 (обязательное). Определение прививаемости испытуемого вакцинного штамма

Приложение 6

(обязательное)

Определение прививаемости испытуемого вакцинного штамма

Прививаемость вакцинных штаммов туляремийного микроба проверяют накожно на морских свинках массой 300 - 400 г со светлой кожей. Накануне прививки у 20 морских свинок на боку выщипывают шерсть в зоне светлой (белой) кожи.

Для определения прививаемости используют двухсуточную агаровую культуру испытуемого и контрольного вакцинных штаммов второй генерации, выращенную на питательной среде Мак-Коя или на FT-агаре. Готовят взвесь культуры концентрацией 5 x 10(9) м.к./мл туляремийного микроба в 0,9%-м растворе натрия хлорида по стандартному образцу мутности ОСО 42-28-85П 10 единиц, затем делают последовательные десятикратные разведения этой взвеси от 10(-1) до 10(-3). Культурой из двух последних разведений 10(-2) (5 х 10(7) м.к./мл) и 10(-3) (5 х 10(6) м.к./мл) прививают накожно по 5 морских свинок каждой дозой, каждого штамма. Перед прививкой кожу обрабатывают спиртом или эфиром. После испарения спирта или эфира на кожу наносят по 2 капли взвесей из разведений 10(-2) и 10(-3) на расстоянии 2 - 3 см одна от другой. Через каждую каплю оспопрививательным пером делают по 2 параллельные насечки длиной в 1 см. Взвесь, нанесенную на кожу, тщательно втирают в течение 1 мин плоской стороной пера. Насечки следует делать таким образом, чтобы они излишне не кровоточили; кровь должна выступать только мелкими росинками при втирании взвеси микробов. Поверхностное нанесение на кожу царапин, без появления росинок крови, снижает эффективность прививки. Наблюдение за животными в опытной и контрольной группах ведут в течение 10 сут.; отмечают кожные реакции на месте прививки культур вакцинных штаммов: диаметр гиперемии (в мм), отека, наличие или отсутствие инфильтрата.

У всех привитых контрольным и испытуемым штаммами туляремийного микроба на вторые-пятые сутки после прививки должен появиться инфильтрат и гиперемия вокруг насечек размером 0,5 - 1,5 см.