Приложение 1. Питательные среды, диагностические наборы, реактивы

Приложение 1

Питательные среды, диагностические наборы, реактивы

1. Транспортные среды

0,1% пептонная вода.

Вода дистиллированная - 100,0 мл

Пептон бактериологический - 0,1 г

Натрия хлорид - 0,5 г.

Калия нитрат - 0,1 г.

Натрия бикарбонат - 0,2 г.

рН - 7,4

Среда разливается по пробиркам и стерилизуется в режиме автоклава при 1,1 атм и 121°С в течение 15 минут.

Среда для контроля стерильности

Берется навеска 20 г/л коммерческой питательной среды для контроля стерильности. Далее согласно прилагаемому наставлению готовая среда разливается по пробиркам в объеме 3,0-5,0 мл и стерилизуется при 1,1 атм и 121°С в течение 20 минут.

2. Питательная среда для культивирования кампилобактерий, сухая (кампилобакагар)

40 г сухой среды размешать в 1 л дистиллированной воды, довести до кипения и кипятить 2-3 мин до полного растворения. Среду разлить по 400 мл в колбы и стерилизовать автоклавированием 20 минут при 121°С. В остуженную до 50-55°С питательную основу вносят FBP-добавки и 20 мл бараньей, лошадиной или донорской крови и разлить в чашки Петри по 15-20 мл. Для придания среде селективных свойств используют селективные смеси. Среда может храниться в холодильнике до 10 дней. Перед посевом чашки подсушивают в термостате в течение 15-25 минут.

ГАРАНТ:

Нумерация пунктов приводится в соответствии с источником

2. Угольный эритрит-агар

Эритрит-агар - 36 г,

железо II сернокислое - 0,15 г,

экстракт кормовых дрожжей - 4 г,

уголь бактериологический активированный - 4 г,

вода дистиллированная - 1 л.

Компоненты среды растворить в воде при нагревании и довести до кипения.

Разлить в колбы или флаконы и стерилизовать автоклавирование# при 121°С в течение 15 минут. Охлажденную среду разлить в чашки Петри и хранить в холодильнике при 4°С 14-20 дней. Перед использованием чашки подсушить в течение 25-30 минут.

3. Мясо-пептонно-печеночный-полужидкий агар (МПППА) - для сохранения выделенных культур и постановки температурного теста.

Мясная вода - 250,0 мл,

печеночный отвар - 250 мл,

вода дистиллированная - 500,0 мл,

пептон бактериологический - 10,0 г,

натрий хлористый - 5,0 г,

агар-агар - 1,6 г

рН - 7,2-7,4

Питательная среда после непродолжительного кипячения до растворения агар-агара, стерилизуется в режиме автоклава при 1,1 атм и 121°С в течение 20 минут.

МПППА может использоваться для сохранения выделенных культур и постановки температурного теста: полной бактериологической петлей материал суточной агаровой культуры инокулируются в 2 высоких столбика МПППА, посевы инкубируют 48 часов в аэробных условиях - один при 25°С , другой - при 42°С. Термофильные кампилобактеры способны к росту на МПППА только при 42°С.

Добавки для повышения аэротолерантности (FBP-добавки).

Указанное количество добавок рассчитано на 1 литр питательной среды:

- железа сульфат II - 0,25 г,

- натрия метабисульфит - 0,25 г,

- натрия пируват - 0,25 г.

Навески солей внести в сухую стерильную пробирку, добавить 5 мл стерильной дистиллированной воды, периодически встряхивать в течение 15-20 минут.

Приготовленный раствор имеет оливковый цвет не подлежит хранению и должен быть использован в день приготовления.