Приложение. Рекомендации по исследованию материала на ЕНЕС в лабораториях субъектов Российской Федерации

Приложение

Рекомендации
по исследованию материала на ЕНЕС в лабораториях субъектов Российской Федерации

Клинические показания к обследованию пациентов:

- Гемолитико-уремический синдром

- Гемоколит при эпидемиологических данных, подтверждающих возможность наличия эшерихиоза, вызванного ЕНЕС.

- острая кишечная инфекция (ОКИ) у пациентов, возникшая в течение 10 дней, после возвращения из Германии.

Рекомендованный алгоритм действий при работе с клиническим материалом:

1. Тестирование образцов фекалий на наличие ДНК ЕНЕС с применением зарегистрированных в Российской Федерации в установленном порядке тест-систем.

2. При получении отрицательного результата на наличие ЕНЕС - исследование прекращается.

3. При получении положительного результата на наличие ЕНЕС - проводится высев образца фекалий на плотные дифференциально-диагностические питательные среды для энтеробактерий. 8-10 изолированных колоний отбирают для идентификации Е. coli по культурально-ферментативным свойствам.

4. Каждый изолят Е. coli, полученный из положительных (по наличию ДНК ЕНЕС) образцов фекалий тестируют на принадлежность к группе ЕНЕС (выявление шигоподобных токсинов, или генов, кодирующих их синтез).

5. Изоляты с подтвержденной принадлежностью к ЕНЕС серотипируют с использованием эшерихиозных сывороток (или иммуноглобулинами), согласно инструкции производителя. В первую очередь с сыворотками О157, О26, О55, О111 (при наличии сывороток - к серогруппам О113, О117, О145). Нетипируемые культуры направляются в референс-центры.

Показания к обследованию пищевых продуктов:

- при наличии эпидемиологических данных, подтверждающих возможность наличия в них Е. coli группы ЕНЕС.

Рекомендованный алгоритм действий при работе с пищевыми продуктами:

1. Посев образцов продуктов на среды для первичного обогащения (МУК 4.2.992-00 "Методы выделения и идентификации энтерогеморрагической кишечной палочки Е. coli О157:Н7", ГОСТ Р 50474-93 "Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий)" - среда Кесслера, трипказо-соевый бульон, бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и желчью, грам-негативный бульон (GN-бульон).

2. Тестирование культуральной среды на наличие ДНК ЕНЕС после 24 часового обогащения.

3. При получении отрицательного результата - исследование прекращается.

4. При получении положительного результата проводится высев на плотные питательные среды с изоляцией не менее 8-10 колоний Е. coli для дальнейшего исследования.

5. Каждый изолят Е. coli, полученный из положительных (по наличию ДНК ЕНЕС) образцов культуральной среды тестируют на принадлежность к группе ЕНЕС (выявление шигоподобных токсинов, или генов, кодирующих их синтез).

6. Изоляты с подтвержденной принадлежностью к ЕНЕС серотипируют с использованием эшерихиозных сывороток (или иммуноглобулинами), согласно инструкции производителя. В первую очередь с сыворотками О157, О26, О55, О111 (при наличии сывороток - к серогруппам О113, О117, О145). Нетипируемые культуры направляются в референс-центры.