Приложение N 16. Порядок лабораторного обследования больных ПОЛИО/ОВП (при подозрении на заболевание), хранения и доставки материала в лабораторию вирусологических исследований

Приложение N 16
к приказу
N 276 от 28 декабря 2015 г.
N 369-ОД от 31 декабря 2015 г.
N 1123-о от 25 декабря 2015 г.

Порядок
лабораторного обследования больных ПОЛИО/ОВП (при подозрении на заболевание), хранения и доставки материала в лабораторию вирусологических исследований

При выявлении больного ПОЛИО/ОВП проводится взятие двух проб фекалий для лабораторного вирусологического исследования с интервалом 24-48 часов. Пробы должны быть отобраны в возможно короткие сроки, но не позднее 14 дня от начала пареза/паралича.

Отбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник ЛПО в установленном порядке.

Первую пробу фекалий отбирают в день установления клинического диагноза, вторую через 24-48 ч. после взятия первой пробы. Оптимальный размер фекальной пробы 8-10 г, что соответствует величине двух ногтей большого пальца взрослого человека. Сбор проб производят в специальные пластиковые ёмкости с завинчивающейся крышкой для забора фекальных проб.

В тех случаях, когда получить фекалии от больного невозможно, можно получить фекальную пробу с помощью ректальной "соломинки" или ректального тампона. Ректальную "соломинку" (натуральную или пластиковую, твёрдую, с внутренним диаметром 5 мм) осторожно вводят в прямую кишку и медленными движениями набирают достаточное количество фекальной массы. После выведения из прямой кишки соломинку сгибают или переламывают и помещают в стерильный флакон/пробирку. При использовании ректального тампона стерильный ватный тампон на деревянной палочке вводят в прямую кишку и протирают слизистую оболочку так, чтобы захватить фекальный материал. Тампон извлекают и, отломив палочку, помещают его в стерильную пробирку/флакон с 1-2 мл транспортировочной среды (при необходимости вопрос получения среды согласовать с лабораторией вирусологических исследований ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае").

При подозрении на полиомиелит (в том числе ВАПП) проводят забор парных сывороток крови. Первую сыворотку отбирают при поступлении больного в стационар (в первые 7 дней от начала заболевания), вторую - через 2-3 недели. Оптимальный объём пробы - 3-5 мл. Если взятие крови из вены по каким-либо причинам невозможно, берут кровь уколом пальца, что позволяет взять 0,3-0,4 мл крови. Пробы крови помещают в стерильные ёмкости (пробирки, флакончики) без антикоагулянтов или консервантов. Пробы оставляют при комнатной температуре на 2 часа для свёртывания крови. После образования сгустка его отделяют от стенки сосуда, пробу помещают в холодильник при температуре от 2 до 8°С и спустя 24 часа отбирают сыворотку. Центрифугированием при 1500 g в течение 5-10 минут сыворотку осветляют, переносят стерильной пипеткой в стерильную ёмкость. Если нельзя воспользоваться центрифугой, или если обработке подлежит сразу большое количество проб, с помощью стерильной пипетки можно осторожно отсосать сыворотку от сгустка так, чтобы в неё не попали выпавшие в осадок эритроциты. Во всех случаях следует предотвращать попадание в сыворотку эритроцитов, так как при хранении они подвергаются гемолизу, что может повлиять на результаты серологических исследований.

При подозрении на острый полиомиелит больному проводят исследование иммунологического статуса (иммунограмму) и электронейромиографию.

Выписка из стационара переболевшего полиомиелитом, вызванным диким полиовирусом, допускается после получения однократного отрицательного результата вирусологического исследования.

Повторный осмотр больного и отбор проб фекалий для лабораторного исследования от больных полиомиелитом, в том числе ВАПП, проводят на 60 и 90 дни от начала пареза/паралича.

В случае летального исхода заболевания в первые часы после смерти осуществляют забор секционного материала для лабораторных исследований.

В летальных случаях берут пробы (кусочки ткани) из шейного и поясничного отделов спинного мозга, продолговатого мозга, Варолиева моста, нисходящего отдела толстой кишки. Пробы отбирают как можно раньше после наступления смерти. Ткани иссекают стерильными инструментами, помещают в отдельные стерильные пластиковые или стеклянные ёмкости с транспортировочной средой, добавленной в таком количестве, чтобы сохранить их влажными. Объём каждой пробы (кусочка тканей ЦНС) должен составлять примерно 1 см3; из толстой кишки иссекают сегмент длиной 3-5 см, содержащий фекальные массы.

Забор и доставку материалов для лабораторных исследований осуществляют в соответствии с установленными требованиями.

Пробы фекалий должны быть доставлены в РЦ или в НЛДП в течение 72 часов с момента отбора второй пробы фекалий. До отправки их хранят в холодильнике при температуре от 2 до 8°С. Транспортирование проб осуществляют при температуре от 2 до 8°С (обратная "холодовая" цепь). Если доставка проб по какой-либо причине задерживается, пробы хранят при температуре минус 20°С. Условия транспортирования должны обеспечивать их сохранение.

Пробы крови (сыворотки) доставляют в лабораторию в течение 72 часов от момента отбора. До отправки пробы хранят при температуре от 2 до 8°С. Эту же температуру обеспечивают при транспортировании проб. Если доставка по какой-либо причине задерживается, сыворотки хранят при температуре минус 20°С. Условия транспортирования должны обеспечивать их сохранение.

Все материалы должны быть снабжены этикеткой, на которой четко обозначают фамилию и инициалы больного, идентификационный номер, тип пробы, дату отбора. Пробы доставляются с направлением (в 2 экз.) на лабораторное исследование (приложение N 3 настоящего приказа).

При транспортировании материалов в лабораторию необходимо соблюдать принцип "тройной упаковки", которая включает следующие компоненты:

1) первичная ёмкость - маркированный контейнер/пробирка/флакон с пробой, надёжно закрытые крышкой, герметизированной лабораторной плёнкой или парафином;

2) вторичная ёмкость - прочный водонепроницаемый, не протекающий контейнер (или полиэтиленовый пакет) с адсорбирующим материалом в количестве, достаточном для адсорбции всего образца в случае его протечки. Во вторичную ёмкость помещают контейнер/пробирку/флакон с пробой. Образцы от одного пациента упаковываются отдельно. Также во вторичную ёмкость помещают направление на исследование, вложенное в полиэтиленовый пакет.

3) внешняя упаковка - прочный термоизолирующий контейнер или термос, предназначенные для транспортирования биологических материалов. Для обеспечения температурных условий транспортировки, в термоконтейнеры помещают охлаждающие элементы или пакеты со льдом. На внешней поверхности термоконтейнера или термоса укрепляют этикетку с указанием адреса, телефона, факса, электронной почты отправителя, адреса, телефона, факса, электронной почты получателя, условий транспортирования.

Перед отправкой материалов отправитель должен проинформировать получателя о планируемой отправке и её сроках. Недопустимо отправлять материалы без предварительной договорённости с получателем.