Приложение N 5. Порядок проведения микробиологического (бактериологического, вирусологического) исследования аутопсийного материала трупов умерших детей

Приложение N 5
к приказу
Министерства здравоохранения
Свердловской области
от 27 мая 2016 г. N 845-п

Порядок
проведения микробиологического (бактериологического, вирусологического) исследования аутопсийного материала трупов умерших детей

1. При установлении диагноза, особенно, в случаях внезапно наступившей смерти, производится взятие биологического материала для микробиологического (бактериологического, вирусологического) исследования и передача его в соответствующие структурные подразделения медицинских организаций (лаборатории клинической микробиологии), органы Роспотребнадзора с целью идентификации возбудителя, вызвавшего заболевание, приведшего к смерти ребенка.

2. Забор биологического материала для микробиологического (бактериологического, вирусологического) исследований производится патологоанатомом (судебно-медицинским экспертом) с соблюдением стерильности, согласно правилам забора аутопсийного материала для данного вида исследований и передается в соответствующие структурные подразделения медицинских организаций (лаборатории клинической микробиологии), органы Роспотребнадзора с целью идентификации возбудителя, вызвавшего заболевание, приведшего к смерти ребенка в соответствии с п.п. 78.1 - 10 приказа Министерства здравоохранения и социального развития Российской федерации от 12.05.2010 N 346н "Об утверждении Порядка организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях РФ", п. 24 приказа Министерства здравоохранения Российской Федерации от 06.06.2013 N 354н "О порядке проведения патологоанатомических вскрытий".

3. Микробиологическое исследование трупного материала осуществляется за счет средств медицинской организации, направившей труп ребенка на патологоанатомическое (судебно-медицинское) исследование с максимальным спектром исследований микроорганизмов.

Правила взятия аутопсийного материала для расшифровки возбудителей инфекционных заболеваний

1. использование информативного клинического материала;

2. высокое качество клинического материала (техника получения материала);

3. обеспечение сохранности клинического материала.

Правила взятия аутопсийного материала для ПЦР-исследований

- Работа должна выполняться в одноразовых перчатках без талька (опудренные тальком перчатки предварительно протираются этанолом).

- Взятие материала осуществляется строго в соответствии с настоящими правилами, только стерильным одноразовым инструментарием, в одноразовую стерильную посуду (флаконы, контейнеры)

- Одноразовые стерильные пробирки, содержащие транспортную среду, должны быть получены только из лаборатории, выполняющей данные исследования.

- Допустимым (максимальным) сроком взятия аутопсийного материала для ПЦР исследований является 24 часа после наступления смерти.

- Материал забирают из зоны предполагаемого местонахождения возбудителя инфекции, из поврежденной ткани или из пограничного с поврежденным местом участка.

- Кусочки ткани диаметром не более 5 мм помещают в одноразовые стерильные пробирки объемом 1,5 - 2,0 - 5,0 мл, содержащие соответствующую транспортную среду.

- Содержимое кишечника и аналогичный материал помещают в стерильную посуду (пробирки, контейнеры) без транспортной среды.

- Посуда открывается непосредственно перед внесением в нее аутопсийного материала и сразу плотно закрывается крышкой, при этом, нельзя касаться внутренних поверхностей емкости и крышки.

- Посуда с аутопсийным материалом маркируется с указанием фамилии погибшего, даты взятия и локализации взятого материала (надписи на посуде с материалом должны соответствовать данным направительного документа).

- Направление должно быть оформлено в двух экземплярах на бланке учреждения, подписано ответственным лицом, заверено печатью учреждения и содержать следующую информацию: наименование учреждения, направившего материал на исследование; вид материала; Ф.И.О., дата рождения и смерти погибшего, дата вскрытия, предварительный диагноз; Ф.И.О., подпись и контактный телефон лица, направившего материал на исследование.

Условия хранения материала

Образцы аутопсийного материала, предназначенного для выделения ПЦР исследований хранят:

- при комнатной температуре - в течение 6 часов;

- при температуре 2 - 8°С - в течение 1 суток;

- при температуре минус 20°С - в течение 1 недели;

- при температуре минус 70°С - длительно;

- допускается только однократное замораживание и оттаивание аутопсийного материала.

Условия транспортирования материала

- Транспортирование клинического материала осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами:

- при температуре 2-8°С - в течение 6 часов,

- в замороженном виде - в течение 1 суток (только для материала, предназначенного для выделения ДНК).

Готовность анализов -15 дней после поступления материала на исследование.

Правила взятия секционного материала для электронномикроскопического исследования

Для получения достоверных данных, взятие материала необходимо осуществлять строго в соответствии с настоящими правилами. Доступным (максимальным) сроком взятия материала для исследований является 4 (четыре) часа после наступления смерти при условии нахождения трупа при температуре окружающего воздуха не выше +20 (Двадцать) градусов по Цельсию и умеренной влажности, с целью исключения развития в тканях глубоких аутолитических явлений и посмертной микробной флоры.

1. Для взятия материала необходимо иметь:

- чашку Петри с дном, залитым тонким слоем парафина (2 - 3 мм);

- флакон-"пеницилинку" с 2,5% раствором глютаральдегида;

- острый режущий инструмент;

- пинцет.

2. Порядок взятия материала для проведения исследований:

- небольшие фрагменты ткани (размером 5 мм), взятые от трупа, быстро измельчаются таким образом, чтобы размер каждого из фрагментов ткани не превышал 1 мм;

- материал помещается во флакон с глютаральдегидом;

- произвести маркировку флакона простым карандашом;

- образцы материала, предназначенного для исследования необходимо хранить при не выше температуре +4 по Цельсию. Замораживать материал категорически Запрещается!

- хранение материала в глютаральдегиде при соблюдении температурного режима допускается не более 30 суток.