Приложение В (рекомендуемое). Рекомендуемые тест-микроорганизмы для широко используемых культуральных сред (приводится информация о культуральных средах, условиях содержания сред, тест-микроорганизмах, номере коллекции культур тест-микроорганизмов и ожидаемых реакциях)

Приложение В
(рекомендуемое)

Рекомендуемые тест-микроорганизмы для широко используемых культуральных сред (приводится информация о культуральных средах, условиях содержания сред, тест-микроорганизмах, номере коллекции культур тест-микроорганизмов и ожидаемых реакциях)

Таблицы В.1 - В.6 составлены, принимая во внимание контрольные штаммы, используемые в Европейской фармакопее, и рекомендации фармакопеи, касающиеся микробиологии пищевых продуктов в отношении культуральных сред (Рабочая группа Международного комитета по микробиологии пищевых продуктов и гигиене). Данные критерии предстоит включить в соответствующие стандарты при их подготовке или пересмотре в будущем (новый стандарт или пересмотр). Утвержденная партия среды - это партия среды, которая показала удовлетворительные эксплуатационные характеристики. Допускается использование тех же штаммов из других эталонных коллекций (например, NCTC, CIP и др.). Все приводимые среды описаны в стандартах EN и ISO.

Таблица В.1 - Селективные среды для подсчета микроорганизмов

Среда	Тип	Микроорганизмы	Обозначение стандарта	Функция	Инкубация	Контрольные штаммы	Эталонные среды	Метод контроля	Критерии	Характерная реакция
Бэрда-Паркера	S a	Коагулязоположительные стафилококки	ENISO 6888-1	Производительность	24 - 48 ч/37°С	S. aureus АТСС 6538 S. aureus АТСС 25923 b	Триптиказо-соевый агар (TSA)	Количественный	PR0,5	Черные/серые колонии с четким ореолом (реакция просветления яичного желтка)
				Селективность	48 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
				Специфичность	24 - 48 ч/37°С	S. epidermidis АТСС 12228 b	-	Качественный	-	Черные/серые колонии без реакции просветления яичного желтка
RPFA	S	Коагулязоположительные стафилококки	ENISO 6888-2	Производительность	24 - 48 ч/37°С	S. aureus АТСС 6538 или 6538 Р S. aureus АТСС 25923 b	TSA	Количественный	PR0,5	Черные/серые колонии с темным ореолом
				Селективность	48 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
				Специфичность	24 - 48 ч/37°С	S. epidermidis АТСС 12228 b	-	Качественный	-	Черные/серые колонии без темного ореола
Хлор-амфеникол или OGA (OGY)	S	Дрожжи/ плесневые грибы	ISO 7954	Производительность	3 - 5 дней/25°С	С. albicans АТСС 10231 A. niger ATCC 16404 b P. cyclopium АТСС 16025 S. cerevisiae АТСС 9763 b	SDA, OGA или хлорамфениколагар	Количественный	PR0,5	Характерные колонии в соответствии с каждым видом
				Селективность	3 - 5 дней/25°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b В. subtilis АТСС 6633	-	Качественный	Полное ингибирование	-
MRS	S	Молочнокислые бактерии	ISO 15214	Производительность	72 ч/30°С	L. sake ATCC 15521 b Ped. damnosus ATCC 29358 Lc. lactis ATCC 19435 b	Партия среды MRS, уже утвержденная	Количественный	PR0,5	Характерные колонии в соответствии с каждым видом
				Селективность	72 ч/30°С	E. coli ATCC 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
						B. cereus ATCC 11778
MYP	S	Bacillus cereus	EN ISO 7932	Производительность	24 - 48 ч/30°С	B. cereus ATCC 11778 b	TSA	Количественный	PR0,7	Розовые колонии с ореолом осадка
				Селективность	48 ч/37°С	E. coli ATCC 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
				Специфичность	48 ч/37°С	B. subtilis ATCC 6633 b	-	-	-	Желтые колонии без ореола осадка
Oxford	S	Listeria monocytogenes	EN ISO 11290	Производительность	48 ч/37°С	L. mono 1/2a ATCC 19111	TSA	Количественный	PR0,5	Черно-серые колонии с черным ореолом
						L. mono 4b ATCC 13932 b
				Селективность	48 ч/37°С	E. coli ATCC 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
						E. faecalis ATCC 29212 или 19433
						С. albicans ATCC 10231
PALCAM	S	Listeria monocytogenes	EN ISO 11290	Производительность	48 ч/37°С	L. mono 1/2а АТСС 19111	TSA	Количественный	PR0,5	Серо-зеленые и черные колонии с черным ореолом
				Селективность	72 ч/30°С	L. mono 4b АТСС 13932b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
						Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433
TS(C)	S	Clostridium perfringens	EN ISO 7937	Производительность	20 ч/37°С (анаэробная атм.)	CI. perfringens АТСС 13124	Партия среды TS(C), уже утвержденная	Количественный	PR0,7	Черные колонии
						CI. perfringens АТСС 12916
				Селективность TSC	20 ч/37°С (анаэробная атм.)	Е. coli АТСС 25922 или 8739	-	Количественный	Полное ингибирование	-
				Специфичность TS			-	Количественный	-	Белые колонии
VRBG	S	Enterobacteriaceae	ISO 7402 ISO 8523	Производительность	24 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	TSA	Количественный	PR0,5	Розово-красные колонии с ореолом или без ореола осадка
						S. typhimurium АТСС 14028
				Селективность	24 ч/37°С	Е faecalis АТСС 29212 или 19433 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
VRBL	S	Coliforms	ISO 4832	Производительность	24 ч/30°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	TSA	Количественный	PR0,5	Пурпурные колонии с ореолом или без ореола осадка
				Селективность	24 ч/30°С	Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
				Специфичность	24 ч/30°С	Ps. aeruginosa АТСС 27853	-	Качественный	-	Бесцветные или бежевые колонии
СТSMAC	S	Escherichia coli O157	ISO 16654	Производительность	24 ч/37°С	Е. coli О 157:Н7 АТСС 43894 или 43895 b (не токсикогенные)	TSA	Количественный	PR0,5	Прозрачные колонии с бледной желтовато-коричневой окраской и диаметром около 1 мм
				Селективность	24 ч/37°С	S. aureus АТСС 6538 или 25923 b	-	Качественный	Полное ингибирование	-
				Специфичность	24 ч/37°С	Е. coli АТСС 11775 или 25922 b	-	Качественный	-	Розовые колонии
BGBLB	L c	Coliforms	ISO 4831	Производительность	24 - 48 ч/30°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b С. freundii АТСС 43864	-	Полуколичественный	Мутность 2 + газ в 1/3 про бирки Дюрхэма	Образование газа и мутность
				Селективность	24 - 48 ч/30°С	Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b	-	Качественный	Отсутствие роста	-
LST	L	Coliforms	ISO 4831	Производительность	24 - 48 ч/30°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739b С. freundii АТСС 43864	-	Полуколичественный	Мутность 2 + газ в 1/3 про бирки Дюрхэма	Образование газа и мутность
				Селективность		Е . faecalis АТСС 29212 или 19433b	-	Качественный	Отсутствие роста	-
ЕС	L	Escherichia coli	ISO 7251	Производительность	24 - 48 ч/44°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Мутность 2 + газ в 1/3 про бирки Дюрхэма	Образование газа и мутность
				Селективность	24 - 48 ч/44°С	Ps. aeruginosa АТСС 27853 b	-	Качественный	Отсутствие роста	-
а S = твердая среда. b Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум). с L = жидкая среда. Примечание - для твердых культуральных сред возможно также использование полуколичественного метода культивирования.

Таблица В.2 - Неселективные среды для подсчета микроорганизмов

Среды	Тип	Микроорганизмы	Стандарт	Функция	Инкубация	Контрольные штаммы	Эталонные среды	Метод контроля	Критерии	Характеристические реакции
РСА	S a	Общая флора	ISO 4833	Производительность	72 ч/30 °С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	TSA	Количественный	PR0,7	-
						S. aureus АТСС 6538 или 6538 Р
						В. Subtilis АТСС 6633 b
а S = твердая среда. b Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).

Таблица В. 3 - Обогатительные селективные среды

Среда	Тип	Микроорганизмы	Обозначение стандарта	Функция	Инкубация	Контрольные штаммы	Эталонные среды	Метод контроля	Критерии	Характерные реакции целевых микроорганизмов
ЕЕ	L	Enterobacteriaceae	ISO 7402 ISO 8523	Производительность	24 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b или S. typhimurium АТСС14028	-	Полуколичественный	Более 10 колоний на VRGB	Розово-красные колонии с или без ореола осадка
				Селективность	24 ч/37°С	+ Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b		Полуколичественный	Полное ингибирование
Half-Fraser	L	Listeria monocytogenes	EN ISO 11290-1	Производительность	24 ч/30°С	L. mono 1/2а АТСС 19111		Полуколичественный	> 10 колоний на Oxford или PALCAM	Серо-черные колонии с черным ореолом
						или L mono 4b АТСС 13932 b
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b
				Селективность	24 ч/30°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b			< 100 колоний на TSA
Fraser	L	Listeria monocytogenes	EN ISO 11290-1	Производительность	48 ч/37°С	L. mono 1/2а АТСС 19111	-	Полуколичественный	> 10 колоний на Oxford или PALCAM	Серо-черные колонии с черным ореолом
						или L. mono 4b АТСС 13932 b
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b
				Селективность	24 - 48 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433 b			< 100 колоний на TSA
ITC	L	Yersinia enterocolitica	ISO 10273	Производительность	48 ч/25°С	Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610 b	-	Полуколичественный	< 10 колоний на CIN или SSDC	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Ps. aeruginosa АТСС 27853 b
				Селективность	48 ч/25°С	Ps. aeruginosa АТСС 27853 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						P. mirabilis ATCC 29906
Park & Sanders	L	Campylobacter	ISO 10272	Производительность	См. стандарт	С coli ATCC 43478*	-	Полуколичественный	< 10 колоний на среде Karmali или любой другой среде по выбору	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						или С. jejuni АТСС 33291 или 29428*
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Р mirabilis АТСС 29906 b
				Селективность	См. стандарт	+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						P. mirabilis АТСС 29906
Preston	L	Campylobacter	ISO 10272	Производительность	18 ч/42°С	С. coli АТСС 43478 b	-	Полуколичественный	< 10 колоний на среде Karmali или любой другой среде по выбору	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						или С. jejuni АТСС 33291 или 29428 b
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ P. mirabilis АТСС 29906 b
				Селективность	18 ч/42°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						P. mirabilis АТСС 29906
PSB	L	Yersinia enterocolitica	ISO 10273	Производительность	3 - 5 дней/25°С	Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610 b	-	Полуколичественный	> 10 колоний на CIN или SSDC	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Ps. aeruginosa АТСС 27853 b
				Селективность	3 - 5 дней/25°С	Ps. aeruginosa АТСС 27853 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						P. mirabilis АТСС 29906
МКТТп	L	Salmonella	ISO 6579	Производительность	24 ч/37°С	S. typhimurium АТСС 14028 b	-	Полуколичественный	> 10 колоний на XLD или другой среде по выбору	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						или S. enteritidis ATCC 13076 b
						+ E. coli ATCC 25922 или 8739 b
						+ Ps. aeruginosa ATCC 27853 b
				Селективность	24 ч/ 37°С	E. coli ATCC 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						E. faecalis ATCC 29212 или 19433			< 10 колоний на TSA
Rappaport Vassiliadis	L	Salmonella	EN 12824	Производительность	24 ч/41,5°С	S. typhimurium АТСС 14028 b	-	Полуколичественный	< 10 колоний на BGA или другой среде по выбору	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						или S. enteritidis АТСС 13076 b
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Ps. aeruginosa АТСС 27853 b
				Селективность	24 ч/41,5°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433			< 10 колоний на TSA
RVS	L	Salmonella	ISO 6579	Производительность	24 ч/41,5°С	S. typhimurium АТСС 14028	-	Полуколичественный	> 10 колоний на XLD или другой среде по выбору	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						или S. enteritidis АТСС 13076 b
						+ Е. coli АТСС 25922 или 8739 b
						+ Ps. aeruginosa АТСС 27853b
				Селективность	24 ч/41,5°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739b	-	Полуколичественный	Полное ингибирование на TSA	-
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433	-	-	<10 колоний на TSA	-
Selenite-cystine	L	Salmonella	EN 12894	Производительность	24 ч/37°С	S. typhimunum АТСС 14028 b	-	Полуколичественный	< 10 колоний на BGA или другой среде по выбору	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
						или S. enteritidis АТСС 13076 b
						+ Е. coh АТСС 25922 или 8739b
						+ Ps. aeruginosa АТСС 27853b
				Селективность	24 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Полуколичественный	< 100 колоний на TSA	-
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433
а L = жидкая среда.
b Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).

Таблица В.4 - Обогатительные неселективные среды

Среда	Тип	Микроорганизмы	Обозначение стандарта	Функция	Инкубация	Контрольные штаммы	Эталонные среды	Метод контроля	Критерии	Характерная реакция
BHI	L a	Staphylococcus	ISO 6888	Производительность	24 ч/37°С	S. aureus АТСС 25923 b		Качественный	Мутность 1 - 2	-
Brucella	L	Campylobacter	ISO 10272	Производительность	2 - 5 дней/25°С	С. coli АТСС 43478	-	Качественный	Мутность 1 - 2	-
						С. jejuni АТСС 33291 или 29428 b
Peptonesalt (пептоновая соль)	L	Dilution liquids (разбавитель)	ISO 6787	Растворитель	45 мин/20°С - 25°С	Е. coli ATCC25922 или 8739 b	TSA	Количественный	+/- 50% кол. к (+/- 50% изначального подсчета)	-
						S. aureus АТСС 25923	-	-	-	-
Thioglycollate	L	Clostridium perfringens	ISO 3937	Производительность	24 ч/37°С	CI. perfringens АТСС 13124 b	-	Качественный	Мутность 1 - 2	-
TSYEB	L	Listeria monocytogenes	ISO 11290	Производительность	24 ч/25°С	L. mono 1/2а АТСС 19111	-	Качественный	Мутность 1 - 2	-
						L. mono 4b АТСС 13932 b	-	-	-	-
a L = жидкая среда. b Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).

Таблица В.5 - Селективные разделительные среды

Среда	Тип	Микроорганизмы	Обозначение стандарта	Функция	Инкубация	Контрольные штаммы	Эталонные среды	Метод контроля	Критерии	Характерные реакции
Модифицированная среда Butzler	S a	Campylobacter	ISO 10272	Производительность	24 - 72 ч/42°С	С. coli АТСС 43478	-	Качественный	Хороший рост (2)	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
CCDA	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
Karmali	-	-	-	-	-	С. jejuni АТСС 33291 или 29428 b	-	-	-	-
Preston	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
Skirrow				Селективность	24 - 72 ч/42°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное или частичное ингибирование (0 - 1)	Не обнаруживается никаких характерных колоний
						S. aureus АТСС 25923			Полное ингибирование (0)	-
CIN	S	Yersinia ente-rocolitica	ISO 10273	Производительность	24 ч/30°С	Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610 b	-	Качественный	Хороший рост (2)	Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)
SSDC	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
				Селективность	24 ч/30°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739b	-	Качественный	Полное или частичное ингибирование (0-1)	Не обнаруживается никаких характерных колоний
						S. aureus АТСС 25923	-	-	Полное ингибирование (0)	-
Агар с бриллиантовым зеленым (BGA)	S	Salmonella	EN 12824/ ISO 6579	Производительность	24 - 48 ч/37°С	S. typhimurium АТСС 14028 b	-	Качественный	Хороший рост (2)	Характерные колонии согласно каждой среде (см стандарт)
						S. enteritidis АТСС 13076
XLD				Селективность	24 - 48 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 b	-	Качественный	Полное ингибирование или медленный рост (0-1)	Не обнаруживается никаких характерных колоний
						Е. faecalis АТСС 29212 или 19433			Полное ингибирование (0)	-
а S = твердая среда. b Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).

Таблица В.6 - Неселективные разделительные среды

Среда	Тип	Микроорганизмы	Обозначение стандарта	Функция	Инкубация	Контрольные штаммы	Эталонные среды	Метод контроля	Критерии	Характерная реакция
Пита тельный агар	S a	Enterobacteriaсеае	ISO 7402, ISO 8523	Производительность	24 ч/37°С	Е. coli АТСС 25922 или 8739 c	-	Качественный	Хороший рост (2)	-
-	-	Salmonella	EN 12824, ISO 6579		24 ч/37°С	S. typhimurium АТСС 14028 c	-	-	-	-
-	-	Yersinia enterocolitica	ISO 10273		24 ч/30°С	Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610c	-	-		-
Агар TSYEA	S	Listeria monocytogenes	EN ISO 11290	Производительность	24 ч/37°С	L. mono 1/2а АТСС 19111 или L. mono 4b АТСС 13932 b	-	Качественный	Хороший рост (2)	-
а S = твердая среда. b Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум). с Произвольные штаммы в зависимости от используемого метода.