Приложение 1. Схема проведения экспериментов по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в различных воздушных системах окружающей среды

Приложение 1
к МР 1.2.0037-11

Схема
проведения экспериментов по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в различных воздушных системах окружающей среды

Объект исследования	Воздушная среда предприятий, цехов, коммунально-бытовых помещений
Физическая форма объекта исследования	Газообразная
Количество материала для выполнения исследований	10,0
Приборное обеспечение	Аппарат Кротова для отбора проб воздуха, просвечивающий электронный микроскоп, анализатор изображений, соединенный с электронным микроскопом или цифровая фотокамера с матрицей не ниже 5 мегапикселей и компьютер.
Материалы	Пинцет для электронно-микроско-пических работ, электронно-микро-скопические сеточки, пластинка тефлона размером см, чашки Петри, автоматическая микропипетка на 100 , наконечники к микропипетке, колбы вместимостью 100 , пробирки вместимостью 20 , пипетки.
Химические реактивы	Формвар, коллодий, амилацетат, дихлорэтан, уранилацетат, дистиллированная вода
Препарирование образцов для исследования в электронном микроскопе	Этап 1: подготовка реактивов и материалов к эксперименту: - приготовление 0,15% раствора формвара на дихлорэтане или 0,5% раствора коллодия на амилацетате; - покрытие электронно-микроскопичес-ких сеточек формваровой (коллодиевой) пленкой; - приготовление 1,0% раствора уранилацетата. Этап 2: препарирование образцов нано-материалов для электронной микроскопии: - чашку Петри с дистиллированной водой помещают в аппарат Кротова и выдерживают в потоке воздуха 10 мин; - на электронно-микроскопических сеточках наносят по одной капле суспензии частиц из воздуха (50-100 ), через 1 мин удаляют всю жидкость с поверхности сеточки и окрашивают 1,0% водным раствором уранилацетата; - сеточки с наноматериалом контра-ктируют 1,0% раствором уранилацетата в течение 1-2 мин.
Исследование образцов (проб воздуха) в просвечивающем электронном микроскопе	Основные этапы: - предварительная оценка качества образца при низких увеличениях; - исследование и фотографирование структуры образца при высоких разрешениях; - поиск наночастиц на изображениях; - фотографирование 10 случайных полей изображения образца.
Анализ электронно-микроскопических изображений структуры твердой фракции проб воздуха	Основные этапы: - визуализация наночастиц в пробах воздуха; - морфометрический анализ наночастиц; - определение степени полиморфизма; - определение коэффициента формы наночастиц; - определение степени агрегированности наночастиц в воздухе; - определение степени загруженности воздуха наночастицами (количество частиц на единицу объема воздуха).
Основные параметры и характеристики твердой фракции воздуха для выдачи заключения	Структурные и морфометрические характеристики наноматериала: - наличие частиц размерами 1,0-100,0 нм в пробах воздуха; - уровень электронно-оптической плотности частиц (уровень электронно-оптической плотности частиц - как и в оптическом диапазоне, структурный элемент образца может быть прозрачным, полупрозрачным, непрозрачным. Это характеризует элементный состав образца: металлы непрозрачны для электронов и изображения получаются сильно контрастными, легкие металлы почти не рассеивают электроны и выглядят на микрофотографии полупрозрачными); - форма частиц; - коэффициент формы наночастиц; - степень полиморфизма наночастиц в воздухе; - степень агрегированности частиц в пробах воздуха.