Приложение А (справочное). Основные принципы аналитических технологий, применяемых в клинической лабораторной аналитике

Приложение А
(справочное)

Основные принципы аналитических технологий, применяемых в клинической лабораторной аналитике

Таблица А.1 -

Основные принципы клинико-лабораторных аналитических технологий

Принцип распознавания аналита	Генерация сигнала о характеристиках аналита	Детекция/измерение сигнала
Химическое сродство молекул реактива и аналита, химическая реакция	Преобразование структуры молекул аналита. Изменение светопропускания раствора, содержащего аналит	Фотоколориметрия Абсорбционная фотометрия Спектрофотометрия
Сродство структуры соединения (аналита) со структурой фермента, расщепление соединения	То же	Абсорбционная фотометрия Спектрофотометрия
То же	Расщепление хромогенного субстрата. Изменение светопропускания раствора, содержащего аналит	То же
Химическое сродство молекул реактива и аналита, химическая реакция	Переход молекул аналита в возбужденное состояние. Испускание света. Хемилюминесценция	Хемилюминометрия
Сродство структуры фибриногена со структурой ферментов - факторов свертывания крови, образование фибрина	Образование сгустка крови, изменение вязкости пробы	Клоттинговые методы коагулометрии - оптическая, механическая, оптико-механическая регистрация времени образования сгустка
Воздействие возбуждающего света определенной длины волны на молекулу аналита	Переход молекул аналита в возбужденное состояние. Испускание света большей длины волны	Флюорометрия
Воздействие химической ионизации, электронной пушки, тока высокого напряжения, нагревания на молекулы аналита	Образование ионов с различной молекулярной массой и зарядом, разделение их с помощью электрических и магнитных полей. Величина сигнала зависит от количества ионов в определенной зоне	Масс-спектрометрия
Воздействие высокотемпературного пламени на молекулу аналита	Ионизация молекул. Испускание света специфической длины волны, окрашивание пламени	Пламенная фотометрия
Воздействие высокой температуры на молекулу аналита	Ионизация молекул. Поглощение света специфической длины волны, излучаемого лампой с полым катодом, изготовленным из исследуемого элемента	Атомно-абсорбционная спектрофотометрия
Электрохимический процесс на границе раздела фаз на электроде, погруженном в раствор, содержащий аналит	Изменение структуры или концентрации аналита. Изменение электрического потенциала	Потенциометрия
То же	Изменение силы проходящего тока	Полярография, вольтамперометрия
Электрохимический процесс на границе раздела [фаз на электроде, погруженном в раствор, содержащий аналит	Изменение количества вещества, выделяющегося на электроде Изменение количества электричества, проходящего между двумя электродами в электрохимической ячейке	Кулонометрия
То же	Изменение электропроводности между двумя электродами	Кондуктометрия
Специфическое связывание аналита лигандами, имеющими к нему высокое сродство. Иммунохимическая реакция связывания белка (антигена) специфическим белком (антителом)	Образование агглютината. Образование преципитата	Радиальная иммунодиффузия. Иммуноэлектрофорез. Электрофорез с иммунофиксацией. Электроиммунодиффузия. Двунаправленный иммуноэлектрофорез. Иммунонефелометрия. Иммунотурбидиметрия
То же	Эффект связанной с лигандом метки - фермента, флюорофора, радиоактивного изотопа	Иммуноферментный анализ. Иммунофлюоресцентный анализ или флюоресцентный иммуноанализ. Радиоиммуноанализ. Иммуноблоттинг
Спаривание комплементарных последовательностей нуклеотидов зонда с однонитевой молекулой исследуемой ДНК или РНК	Эффект связанной с зондом метки	Гибридизация нуклеиновых кислот. Выявление генетических дефектов
Многократная репликация специфического фрагмента исследуемой ДНК, ограниченного олигонуклеотидными праимерами, комплементарными концевым участкам фрагмента-мишени	Образование множества ампликонов (амплификация). Эффект метки	Электрофорез в геле. Регистрация флюоресценции. Выявление генетических дефектов
Избирательная реакция красителя с отдельными [ химическими компонентами структур клетки	Избирательная окраска компонентов клетки (цитохимия)	Визуальная детекция, световая микроскопия
Иммунохимическая реакция связывания белка (антигена) структур клетки специфическим белком (антителом), меченым хромофором или флюорофором	Избирательная окраска или свечение компонентов клетки (иммуноцитохимия)	Визуальная детекция, световая микроскопия, флюоресцентная микроскопия
То же	То же	Световая или флюоресцентная микроскопия, цифровая регистрация изображений клеток, компьютерный анализ изображений
Прохождение клеток через апертуру капиллярной трубки, заполненной электропроводящим раствором, между электродами сети постоянного тока	Изменение электропроводности	Кондуктометрия. Проточная цитометрия
Прохождение клеток через апертуру капиллярной трубки, освещаемую поляризованным лучом лазера, между электродами сети постоянного тока	Изменение электропроводности, рассеяние света лазера	Радиочастотный анализ. Трехмерный анализ лейкоцитов. Многоугловая система лазерного светорассеяния
Прохождение клеток, обработанных антителами, связанными с флюоресцентными красителями, через апертуру капиллярной трубки, освещаемую поляризованным лучом лазера, между электродами сети постоянного тока	Изменение электропроводности, рассеяние света лазера. Специфическое свечение окрашенных структур клеток	Проточная иммуноцитофлюорометрия. Иммунофенотипирование клеток
Способность микроорганизмов размножаться на питательной среде определенного состава, соответствующей особенностям метаболизма данного вида микроорганизмов	Образование растущими микроорганизмами колонии определенного вида	Визуальная оценка, световая микроскопия, счетчики колоний. Культуральный метод
Способность микроорганизмов с помощью присущих им ферментов вызывать расщепление определенных субстратов	Изменение цвета набора субстратов-хромогенов при контакте с образцом из культуры микроорганизма	Визуальная оценка цветной реакции. Фотометрия
Способность микроорганизмов вызывать образование в организме пациента специфических антител	Специфическое связывание антител, образовавшихся в организме пациента под действием патогена, с антигеном или антителом тест-системы Образование агглютината или преципитата	Иммуносерологические методы. Радиальная иммунодиффузия. Иммуноэлектрофорез. Электрофорез, с иммунофиксацией Электроиммунодиффузия. Двунаправленный иммуноэлектрофорез. Иммунонефелометрия. Иммунотурбидиметрия
То же	Специфическое связывание антител, образовавшихся в организме пациента под действием патогена, с мечеными антигеном или антителом тест-системы. Эффект метки	Иммуноферментный анализ. Иммунофлюоресцентный анализ. Иммуноблоттинг. Радиоиммуноанализ
Способность антител тест-системы специфически связываться с антигенами, свойственными микроорганизму, в образце культуры микроорганизма	То же	То же
Спаривание комплементарных последовательностей нуклеотидов зонда с однонитевой молекулой исследуемой ДНК или РНК образца культуры микроорганизма	Эффект связанной с зондом метки	Гибридизация нуклеиновых кислот. Генотипирование микроорганизма
Многократная репликация фрагмента ДНК, ограниченного олигонуклеотидными праимерами, комплементарными концевым участкам мишени, образца микроба	Образование множества ампликонов (амплификация) Эффект метки	Электрофорез в геле. Регистрация флюоресценции. Идентификация микроорганизма