Приложение В (справочное). Руководящие указания по сохранению и поддержанию контрольных (референс) штаммов

Приложение В
(справочное)

Руководящие указания
по сохранению и поддержанию контрольных (референс) штаммов

В.1 Общие положения

Есть несколько доступных методов, то есть лиофилизация, хранение на шариках при температуре 70°С или с использованием жидкого азота для успешного сохранения и поддержания всех микроорганизмов, используемых в микробиологии пищевых продуктов. При этом не существует единственного метода сохранения и поддержания контрольных штаммов для всех штаммов коллекции, использующихся в исследованиях (см. рисунок В.1).

                                  /-------------------------------------\

                                  |Получен из банка справочных культур, |

/---------------\                 |лиофилизированный и под вакуумом; или|

|  Справочный   |----------------|  микроорганизм, определенный, как   |

|     штамм     |                 |  минимум, на уровне рода и вида с   |

\---------------/                 |   хорошими характеристиками ввиду   |

        |                         |      известного происхождения       |

        |                         \-------------------------------------/

/---------------------\           /-------------------------------------\

| Справочная исходная |           |  Серия аликвот идентичных культур,  |

|      культура       |--------- |  полученных в лаборатории из одной  |

\---------------------/           |   субкультуры справочного штамма    |

        |                         \-------------------------------------/

        |

/---------------\                 /-------------------------------------\

|    Рабочая    |                 |Первичная субкультура, полученная от |

|   культура    |----------------|аликвоты справочной исходной культуры|

\---------------/                 \-------------------------------------/

Рисунок В.1

В.2 Контрольные (референс) штаммы из коммерческих источников

Если контрольные (референс) штаммы получены из референс (контрольных) коллекций или поставщиков, сертифицированных ISO 9001 [2] или ISO 9002 [3], то их использование в отношении культивирования должно осуществляться в соответствии с указаниями производителя или поставщика коллекции.

В.3 Контрольные (референс) наборы, приготовляемые в лаборатории

Наборы культур контрольных (референс) штаммов (см. В.2) для контроля качества и определения эффективности следует поддерживать и сохранять таким образом, чтобы свести к минимуму возможность заражения, мутации или изменения типичных характеристик. Контрольные наборы следует поддерживать в многочисленных образцах (аликвотах) или свежезамороженными (минус 70°С), или лиофилизированными. Их ростовые характеристики должны быть полностью документированными для каждой среды, на/в которой они будут использоваться в качестве контрольных микроорганизмов.

В.4 Рабочие культуры

Рабочие культуры готовят из лиофилизированных или свежезамороженных образцов контрольных наборов (см. В.3). Определенные количества должны быть обработаны таким образом, чтобы избежать возможной контаминации контрольного набора и ухудшения его ростовых характеристик. Рабочие культуры должны быть приготовлены посредством суспендирования образца контрольного набора в неселективную культуральную среду, инкубируя его до достижения роста культуры до стационарной фазы.

Имеющиеся в продаже системы консервации культур должны иметь инструкцию по поддержанию, сохранению и принципам работы с рабочими культурами.

Примечание - Из рабочих культур не должны приготовляться субкультуры. Однако рабочие культуры допускается использовать неоднократно в течение не более одной недели, если они обработаны и хранятся таким образом, что исключается возможность перекрестного заражения или ухудшения их ростовых характеристик.