Методические указания МУК 4.1.1727-03 "Методические указания по измерению массовых концентраций S-метил-N-(метилкарбомоил) окситиоацетимидата (метомила) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1727-03
"Методические указания по измерению массовых концентраций S-метил-N-(метилкарбомоил) окситиоацетимидата (метомила) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный анализ воздуха рабочей зоны на содержание метомила методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне массовых концентраций 0,25-2,50

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 162,23.

2.4. Регистрационный номер CAS 16752-77-5.

2.5. Физико-химические свойства.

Метомил - белый кристаллический порошок, растворим в воде, этаноле, ацетоне, ацетонитриле, = 77°С, d = 1,29 .

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Метомил обладает антихолинэстеразным действием.

Класс опасности - второй.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) метомила в воздухе рабочей зоны 0,5 .

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений метомила с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации метомила выполняют методом высокоэффективной хроматографии с УФ-детектированием при длине волны 234 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения метомила в анализируемом объеме пробы - 0,02 мкг.

Нижний предел измерения концентрации метомила в воздухе 0,25 (при отборе 20 воздуха).

Метод специфичен в условиях приготовления различных препаративных форм. Измерению не мешают сопутствующие вещества: сахар, феромон.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Хроматограф жидкостный типа "Стайер" с детектором по поглощению в ультрафиолете с переменной длиной волн, с градиентной системой элюирования, автосэмплером
Колонка из нержавеющей стали, длиной 25 см и внутренним диаметром 4 мм, заполненная
Силасорбом С18 (размер частиц 7 мкм)
Аспирационное устройство, модель 822	ГОСТ 2.6.01-86
Фильтродержатель	ТУ 95-72-05-77
Фильтры обеззоленные "синяя лента"	ТУ 6-09-1676-77
Колбы мерные, вместимостью 25	ГОСТ 1770-74Е
Весы аналитические ВЛР-200	ГОСТ 24104-88Е
Стаканы химические, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки колориметрические с притертыми пробками, вместимостью 5 и 10	ГОСТ 25336-82Е
Стеклянные палочки	ГОСТ 25336-82Е

5.2. Реактивы

Метомил с содержанием основного вещества не менее 92%, СОП АК 2975000
Ацетонитрил, хч, для жидкостной хроматографии	ТУ 6-09-14-2167-84
Вода бидистиллированная	ГОСТ 7602-72
Элюент - вода:ацетонитрил = 85:5

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или среднеспециальным образованием, прошедшие обучение работе на жидкостном хроматографе.

8. Условия измерений

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84,0-106,0 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор метомила с концентрацией 1 готовят растворением 27 мг метомила (с учетом процента содержания основного вещества) в мерной колбе вместимостью 25 в элюенте. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор N 1 с концентрацией 100 готовят разведением 2,5 основного стандартного раствора элюентом в мерной колбе вместимостью 25 . Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.3. Градуировочные растворы с концентрацией метомила от 1 до 10 готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку жидкостного хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (приборные единицы) от массы метомила в градуировочной объеме раствора, устанавливают по методу абсолютной калибровки с использованием серии градуировочных растворов, которые готовят разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении метомила

Номер стандарта	Стандартный раствор метомила N 1,	Элюент,	Концентрация метомила в градуировочном растворе,	Содержание метомила в хроматографируемом объеме, мкг
1	0	25,00	0	0
2	0,25	24,75	1,0	0,02
3	0,50	24,50	2,0	0,04
4	0,75	24,25	4,0	0,08
5	1,25	23,75	5,0	0,10
6	1,75	23,25	7,5	0,15
7	2,50	22,50	10,0	0,20

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

состав элюента - ацетонитрил : вода	85:15;
температура термостата колонки	20°С;
скорость подачи элюента	0,8 см/мин;
длина волны УФ-детектора	234 нм;
объем вводимой пробы	20 ;
время удерживания метомила	7 мин 36 с.

Градуировочный график строят в координатах: количество введенного метомила (мкг) - площадь пика (приборные единицы).

Градуировку выполняют по 6 точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации согласно табл. 1.

Проверку градуировочного графика проводят не реже 1 раза в три месяца и при изменении условий анализа.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ПДК метомила необходимо отбрать 20 воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение месяца в пробирках с притертыми пробками.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан вместимостью 25 и заливают 5 элюента, оставляют на 10 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции метомила с фильтра 98%. Полученный раствор количественно переносят в пробирку вместимостью 5 и доводят объем до метки элюентом. Хроматографический анализ выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.

Количественное содержание метомила в хроматографируемом объеме (мкг) определяют по предварительно построенному градуировочному графику.

11. Вычисление результатов измерения

Массовую концентрацию метомила в воздухе (С, ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание метомила в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, ;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, ;

V - объем воздуха, отобранного для анализа () и приведенного к стандартным условиям (прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественноно анализа представляют в виде () , Р = 0,95. Значение , , где - характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости представлены в табл. 2.

Таблица 2

Диапазон определяемых концентраций метомила,	Наименование метрологической характеристики
	Характеристика погрешности, , (Р = 0,95)	Норматив оперативного контроля погрешности, К, (Р = 0,90, m = 3)	Норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, (Р = 0,95, m = 2)
0,25-2,50	0,016 + 0,088С	0,023 + 0,12С	0,064 + 0,24С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике.

После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - .

Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до массовой концентрации исходной рабочей пробы () (общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , разбавленной в два раза, - и рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - получают по возможности в одинаковых условиях, т.е., их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

X - величина добавки анализируемого компонента;

K - норматив оперативного контроля погрешности.

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны.

Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, неоходимому для проведения анализа по методике.

После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко