Методические указания МУК 4.1.1690-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 1,4:3,6-диангидро-Д-глицитола динитрата (изосорбида динитрат, нитросорбид) в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1690-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 1,4:3,6-диангидро-Д-глицитола динитрата (изосорбида динитрат, нитросорбид) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание нитросорбида в диапазоне концентраций 0,015-0,45 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 236,16.

2.4. Регистрационный номер CAS 87-33-0.

2.5. Физико-химические свойства.

Нитросорбид - белый мелкокристаллический порошок, без запаха с температурой плавления 69-71°С. Практически нерастворим в воде, умеренно (1 г в 50 ) растворим в 95%-м спирте, легкорастворим в эфире и хлороформе.

Нитросорбид, как и многие другие эфиры азотной кислоты, взрывоопасен. Хранение по списку Б, герметично, в сухом, прохладном, защищенном от света месте, вдали от огня.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль + пары.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Нитросорбид - антиангинальное, сосудорасширяющее средство, входит в группу органических нитратов. По фармакологическому и биологическому действию имеет сходство с нитроглицерином. Нитросорбид оказывает влияние на центральную нервную и сердечно-сосудистую системы, обладает эмбрио- и гонадотоксическим эффектами. Нитросорбид может вызывать привыкание.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) нитросорбида в воздухе рабочей зоны 0,03 ; 1 класс опасности.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентрациий нитросорбида с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовой концентрации нитросорбида выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на гидролизе нитросорбида в спиртовом растворе натрия гидроокиси с образованием нитрит-ионов и последующим их спектрофотометрическим определением реактивом Грисса-Илосвая.

Измерение производят при длине волны 526 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр и в спирт этиловый 95%.

Нижний предел измерения содержания нитросорбида в анализируемом объеме пробы - 1 мкг.

Нижний предел измерения концентрации нитросорбида в воздухе - 0,015 (при отборе 70 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства таблеток нитросорбида.

Определению не мешают сахар, крахмал картофельный, кальций стеариново-кислый.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е
Аспирационное устройство, модель 822	ГОСТ 2.6.01-86
Фильтродержатель	ТУ 95.72.05-77
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80
Поглотительный прибор Рихтера 7П	ТУ 25-11-1081-75
Колбы мерные, вместимостью 100 , 500	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Колбы грушевидные, вместимостью 50	ГОСТ 23932-90
Колбы конические термостойкие, вместимостью 100, 250	ГОСТ 1770-74Е
Колбы конические, вместимостью 200	ГОСТ 1770-74Е
Кружка фарфоровая, вместимостью 500	ГОСТ 9147-80
Пробирки мерные с притертыми пробками, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Стаканы химические, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Цилиндры мерные, вместимостью 25, 50, 100, 250, 500	ГОСТ 1770-74Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметр 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Воронки химические, диаметр 30 мм	ГОСТ 25336-82
Кюветы с толщиной оптического слоя 10 мм
Баня водяная	ТУ 64-1-425-72
Секундомер	ГОСТ 5072-79
Термометр лабораторный стеклянный, от 0 до 100°С	ГОСТ 16590-71
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы, растворы

Нитросорбид, с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	ВФС 42-422-92
Спирт этиловый, 95%, ректификат	ГОСТ 5963-67
Натрия гидроокись, хч, 15%-ый водный раствор	ГОСТ 4328-77
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Кислота серная, хч, плотность 1,84 , 20%-ый водный раствор	ГОСТ 4204-77
Кислота уксусная ледяная, плотность 1,05 , 10%-ый водный раствор	ГОСТ 61-75
Кислота сульфаниловая	ГОСТ 5821-78
1-Нафтиламин	ГОСТ 8827-74

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. При работе с нитросорбидом следует учитывать его взрывоопасность и не проводить операции с веществом в больших количествах.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц с высшим или средним специальным образованием, прошедших обучение и имеющих навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор нитросорбида с концентрацией 500 готовят растворением 0,0500 г вещества в спирте этиловом 95% в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор нитросорбида N 1 с концентрацией 50 готовят разбавлением 10 основного стандартного раствора спиртом этиловым 95% в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.3. Стандартный раствор нитросорбида N 2 с концентрацией 5 готовят разбавлением 10 стандартного раствора N 1 спиртом этиловым 95% в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.4. Приготовление 15%-го водного раствора натрия гидроокиси: 15 г натрия гидроокиси вносят в фарфоровую кружку, добавляют 85 дистиллированной воды при перемешивании стеклянной палочкой, раствор используют для анализа после охлаждения. Раствор устойчив в течение двух недель.

9.1.5. Приготовление 20%-го водного раствора серной кислоты: в коническую термостойкую колбу вместимостью 200 , наливают 50 дистиллированной воды и осторожно, при перемешивании, добавляют 11 см концентрированной серной кислоты (плотность 1,84 ), затем добавляют 30 дистиллированной воды, раствор перемешивают и охлаждают. Полученный раствор переносят в мерную колбу, вместимостью 100 , и доводят дистиллированной водой до метки. Раствор устойчив в течение месяца.

9.1.6. Приготовление 10%-го водного раствора уксусной кислоты: в мерную колбу вместимостью 500 , наливают 300 дистиллированной воды и добавляют 47,5 ледяной уксусной кислоты (плотность 1,05 ), раствор перемешивают и доводят дистиллированной водой до метки. Раствор устойчив в течение месяца,

9.1.7. Приготовление раствора сульфаниловой кислоты: в коническую колбу, вместимостью 200 , внести 0,5 г сульфаниловой кислоты и добавить 150 10%-й уксусной кислоты.

9.1.8. Приготовление раствора 1-нафтиламина: 0,1 г 1-нафтиламина вносят в коническую термостойкую колбу, вместимостью 100 , добавляют 20 дистиллированной воды, нагревают на кипящей водяной бане до образования на дне лиловой капли. Бесцветный раствор декантируют в коническую колбу вместимостью 200 , и доводят до 150 10%-м водным раствором уксусной кислоты.

9.1.9. Приготовление реактива Грисса-Илосвая: перед употреблением смешивают равные объемы растворов сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина.

Растворы сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина хранят в темных склянках; они пригодны к употреблению пока не приобретут бурую окраску.

Все реактивы и дистиллированная вода не должны давать положительной реакции на ион нитрита.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы нитросорбида, устанавливают по 6 сериям растворов из 5 параллельных определений для каждой серии согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении нитросорбида

Номер стандарта	Стандартный раствор нитросорбида N 1,	Стандартный раствор нитросорбида N 2,	Спирт этиловый 95%,	Содержание нитросорбида в анализируемом объеме, мкг
1	0,0	0,0	10,0	0,0
2	0,0	0,2	9,8	1,0
3	0,0	0,4	9,6	2,0
4	0,0	1,0	9,0	5,0
5	0,2	0,0	9,8	10,0
6	0,4	0,0	9,6	20,0
7	0,6	0,0	9,4	30,0

Градуировочные растворы используют свежеприготовленными.

Градуировочные растворы готовят в грушевидных колбах вместимостью 50 . Колбу помещают в нагретую до 50°С водяную баню на 3 мин (не больше). Затем прибавляют 0,1 15%-го водного раствора натрия гидроокиси, перемешивают и выпаривают досуха на водяной бане при температуре бани 90-95°С в течение 50-60 мин. Остаток в колбе растворяют в 4,0 дистиллированной воды, добавляют 0,1 20%-го водного раствора серной кислоты и 1,0 реактива Грисса-Илосвая. После прибавления каждого реактива раствор перемешивают. Через 30 мин измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 526 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания нитросорбида в мкг.

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактивов, оборудования, после ремонта прибора.

9.4. Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 7 аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель, и один поглотительный прибор, содержащий 10 спирта этилового 95%. При отборе поглотительный прибор охлаждается льдом с солью. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 70,0 воздуха. Пробы хранят герметично в химических бюксах с пришлифованными крышками в холодильнике не более трех суток.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс с пришлифованной крышкой, вместимостью 25 , приливают 5 раствора из поглотительного прибора и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, повторно обрабатывают 5 раствора из поглотительного прибора. Фильтр снова тщательно отжимают и удаляют. Оба экстракта последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в грушевидную колбу, вместимостью 50 . Степень десорбции вещества с фильтра - 97%. Раствор обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 526 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания нитросорбида проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание: фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в спирте этиловом вспомогательных веществ, входящих в состав таблеток нитросорбида.

11. Вычисление результатов измерений

Концентрацию нитросорбида (С, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - количество вещества, найденное в анализируемом объеме раствора по градуировочному графику, мкг;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, .

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде:

, Р = 0,95

Значение , , где

- характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Таблица 2

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости

Диапазон определяемых концентраций нитросорбида,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности, , , Р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, , (Р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, , (Р = 0,95, m = 2)
0,015-0,45	0,00088 + 0,21 С	0,0017 + 0,25 С	0,0024 + 0,39 С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - . Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до концентрации исходной рабочей пробы () (общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , рабочей пробы, разбавленной в два раза - , и рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - , получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

Х - величина добавки анализируемого компонента;

К - норматив оперативного контроля погрешности.

K = 0,0017 + 0,25 С ()

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. Отобранный объем делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,0024 + 0,39 С ()

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 2 ч 40 мин.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко