Методические указания МУК 4.1.1694-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций [R-(R*,R*)]-2,2-дихлор-N-[2-гидрокси-1-(гидроксиметил)-2-(4-нитрофенил)эт ил]ацетамида (синтомицин) в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1694-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций [R-(R*,R*)]-2,2-дихлор-N-[2-гидрокси-1-(гидроксиметил)-2-(4-нитрофенил)эт ил]ацетамида (синтомицин) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание синтомицина в диапазоне массовых концентраций 0,5-5,0 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 323,13.

2.4. Регистрационный номер CAS 56-75-7.

2.5. Физико-химические свойства.

Синтомицин - белый или белый с зеленовато-желтоватым оттенком кристаллический порошок с температурой плавления 150-154°С и размером частиц 300-360 мм. Очень малорастворим в воде и эфире, практически нерастворим в хлороформе, умеренно растворим (3%) в этиловом спирте.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Синтомицин - рацемат с активным левовращающим изомером левомицетином (хлорамфеникол), используется местно, антибиотик широкого спектра действия, малоопасен при введении внутрь, обладает слабыми местно-раздражающими и кумулятивными свойствами, возможны тяжелые осложнения со стороны кроветворной системы вплоть до апластической анемии и лейкоза, обладает канцерогенным, тератогенным, иммуномодулирующим и общетоксическим действием.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) синтомицина в воздухе рабочей зоны 1,0 ; 2 класс опасности.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций синтомицина с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций синтомицина выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов синтомицина в этиловом спирте поглощать свет в ультрафиолетовой области спектра.

Измерение проводят при длине волны 275 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания в анализируемом объеме пробы - 25 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации синтомицина в воздухе рабочей зоны - 0,5 (при отборе 50 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства мази синтомицина.

Определению не мешают ланолин, пропиленгликоль, целлюлоза микрокристаллическая.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е
Аспирационное устройство, модель 822	ГОСТ 2.6.01-86
Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80
Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82Е
Воронки химические, диаметром 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметр 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Кюветы с толщиной оптического слоя 10 мм
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы

Синтомицин, с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	НД 42-9952-99
Этиловый спирт, 95%, ректификат	ГОСТ 5963-67

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие обучение и имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор синтомицина с концентрацией 200 готовят растворением 0,0200 г вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.2. Стандартный раствор синтомицина N 1 с концентрацией 100 готовят разбавлением 25 основного стандартного раствора этиловым спиртом в мерной колбе вместимостью 50 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.3. Стандартный раствор синтомицина N 2 с концентрацией 50 готовят разбавлением 25 основного стандартного раствора этиловым спиртом в мерной колбе вместимостью 50 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности растворов от массы синтомицина, устанавливают по 6 сериям растворов из 5 параллельных определений для каждой серии согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении синтомицина

Номер стандарта	Стандартный раствор синтомицина N 1,	Стандартный раствор синтомицина N 2,	Этиловый спирт,	Содержание синтомицина в градуировочном растворе, мкг
1	0,0	0,0	10,0	0,0
2	0,0	0,5	9,5	25,0
3	0,0	1,0	9,0	50,0
4	1,0	0,0	9,0	100,0
5	1,5	0,0	8,5	150,0
6	2,0	0,0	8,0	200,0
7	2,5	0,0	7,5	250,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение часа.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 20 мин измеряют оптическую плотность растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 275 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания синтомицина в градуировочном растворе в мкг.

Проверку градуировочного графика проводят не реже одного раза в квартал, а также в случае использования новой партии реактивов, оборудования или после ремонта прибора.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 10 аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ПДК синтомицина следует отобрать 50 воздуха. Отобранные пробы могут храниться в химических бюксах с пришлифованными крышками в течение трех суток.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический бюкс с пришлифованной крышкой, вместимостью 25 , приливают 5 этилового спирта и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения синтомицина. Фильтр тщательно отжимают и повторно обрабатывают 5 этилового спирта. Затем фильтр отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку вместимостью 10 , и доводят объем раствора пробы до 10 этиловым спиртом. Степень десорбции синтомицина с фильтра 98%.

Оптическую плотность анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 275 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания синтомицина проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание: фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в этиловом спирте вспомогательных веществ, входящих в состав мази синтомицина.

11. Вычисление результатов измерения

Массовую концентрацию синтомицина (С, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - содержание синтомицина в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

V - объем воздуха, отобранного для анализа () и приведенного к стандартным условиям (прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде:

, , P = 0,95

Значение , , где

- характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Диапазон определяемых массовых концентраций синтомицина,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности, , , P = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, , (Р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, , (Р = 0,95, m = 2)
0,5-5,0	0,017 + 0,19С	0,024 + 0,20С	0,067 + 0,27С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - . Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до массовой концентрации исходной рабочей пробы () (общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , рабочей пробы, разбавленной в два раза - , и рабочей пробы, разбавленной в два раза с добавкой, - , получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

Х - величина добавки анализируемого компонента;

К - норматив оперативного контроля погрешности.

К = 0,024 + 0,20С, ()

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны.

Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,067+ 0,27С, ()

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко