Методические указания МУК 4.1.0.496-96 "Фотометрическое измерение концентрации карбенициллина в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.496-96
"Фотометрическое измерение концентрации карбенициллина в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 422,4

Карбенициллин - антибиотик широкого спектра антимикробного действия. Относится к группе полусинтетических пенициллинов.

Карбенициллин-динатриевая соль (6R)-6-[-(R)-2-карбокси-2-фенил-ацетамидо]пенициллановой кислоты - белый гигроскопический порошок, хорошо растворим в воде (850 мг/мл при рН 6-8). Быстро инактивируется в кислой среде. Практически не растворим в хлороформе и эфире. Разлагается на свету. В темноте устойчив.

В воздухе находится в виде аэрозоля дезинтеграции.

Вызывает нарушения нормальной микрофлоры кожи, дыхательных путей, кишечника. Является аллергеном.

ПДК в воздухе - 0,1 .

Характеристика метода

Определение основано на окислении карбенициллина фосфорно-молибденовой кислотой (ФМК) и последующем фотометрическом измерении окрашенного в синий цвет "молибденовой сини" продукта реакции при 750 нм.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел в анализируемом объеме раствора - 5 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе (при отборе 200 л воздуха) - 0,05 .

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,05 до 0,8 .

Определению мешает присутствие других пенициллиновых антибиотиков, а также восстановителей.

Суммарная погрешность измерений не превышает %.

Время проведения измерений, включая отбор проб, - 1 час 5 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Фотоэлектроколориметр
Аспирационное устройство
Баня водяная
Штатив для пробирок
Пинцет	ГОСТ 21241-77
Секундомер	ГОСТ 5072-79Е
Колбы мерные, вместимостью 50, 100, 250 и 500 мл	ГОСТ 1770-74Е
Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 5 или 10 мл	ГОСТ 10515-75

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 10515-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

Пипетки, вместимостью 1, 2 и 5 мл	ГОСТ 20292-74Е
Микропипетки, вместимостью 0,2 мл	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки Мора, вместимостью 5 и 10 мл	ГОСТ 1770-74Е
Стаканы химические, вместимостью 50 мл	ГОСТ 19908-85

Реактивы, растворы и материалы

Кислота фосфорно-молибденовая (ФМК)	МРТУ 6-09-3540-78
15%-ный раствор в воде
Готовят при нагревании в кипящей водяной бане до растворения, затем фильтруют через пористую пластинку
Устойчив длительное время при условии хранения в защищенном от света месте, при температуре 4°С
Натрий углекислый, х.ч., насыщенный при нагревании раствор в воде	ГОСТ 84-76
Кислота серная, х.ч., 30% (по объему) раствор в воде	ГОСТ 2184-77
Фильтры аэрозольные АФА-ВП-20

Стандартный раствор N 1 карбенициллина с концентрацией 100 мг/мл готовят, растворяя точную навеску стандартного образца антибиотика в воде.

Раствор устойчив 4 дня.

Стандартный раствор N 2 карбенициллина с концентрацией 10 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 в воде.

Раствор устойчив 2 дня.

Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 15 л/мин аспирируют через фильтр типа АФА-ВП-20. Для измерения 1/2 величины ПДК следует отобрать 200 л воздуха.

Срок хранения отобранных проб 2 недели при условии хранения при температуре 4°С в защищенном от света месте.

Подготовка к измерению

Градуировочные растворы (устойчивы в течение двух часов) готовят согласно таблице.

Таблица

Шкала градуировочных растворов

N стандарта	Стандартный р-р N 2, мл	Стандартный р-р N 1, мл	Дистиллированная вода, мл	Содержание карбенициллина, мкг
1	0	0	4	0
2	0,5	-	3,5	5
3	2	-	2	20
4	4	-	-	40
5	-	0,6	3,4	60
6	-	0,8	3,2	80

В каждую пробирку добавляют 0,25 мл ФМК и нагревают в кипящей водяной бане 20 мин. Затем раствор охлаждают под водопроводной водой в течение 5-10 мин, добавляют по 0,5 мл насыщенного раствора углекислого натрия, хорошо перемешивают. Через 10 мин добавляют по 0,14 мл 30% раствора серной кислоты и снова хорошо перемешивают. Измеряют оптическую плотность синих растворов при длине волны 750 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптической плотности градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочных растворах (в мкг).

Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3 месяца, в случае использования другой партии реактивов.

Проведение измерения

Фильтр с пробой при помощи пинцета помещают в стакан, заливают 8 мл воды, растворяют его и, при периодическом помешивании, оставляют на 15-20 мин для растворения. Для анализа в пробирки с пришлифованной пробкой отбирают 4 мл раствора антибиотика. Затем проводят обработку и фотометрирование содержимого пробирок аналогично градуировочным растворам.

Количественное определение содержания карбенициллина в анализируемом объеме пробы (мкг) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию карбенициллина С в воздухе в () вычисляют по формуле:

, где

а - количество карбенициллина в анализируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;

V - объем воздуха, взятого для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России, заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Е.Н. Беляев